APS缓解LPS诱导的BEAS-2B细胞内质网应激炎症反应机制
发布时间：2022-01-06 04:25
集约化养殖密度的增加加重了家禽呼吸系统疾病压力。家禽肺损伤是严重的呼吸系统病症,通常由环境变化、应激、病原感染等多种因素引起。其发病机制受多细胞器、细胞因子和信号通路调控。内质网应激信号通路是介导气道结构细胞命运的重要途径,区别于其它两条调控细胞命运的线粒体途径和死亡受体途径。表观遗传学参与多种生命活动（细胞生长、分化、凋亡）,旨在从分子水平解释临床症状。本研究中,我们利用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导人正常肺上皮细胞（BEAS-2B）构建体外内质网应激（endoplasmic retieulumstress,ERS）模型,分析表观遗传修饰酶的表达变化及其生物学功能,并探讨黄芪多糖（astragalus polysaccharides,APS）对LPS刺激的促炎性细胞因子的调控作用,以期为营养表观遗传调控肺部炎症反应奠定理论基础。试验一LPS诱导BEAS-2B细胞内质网应激模型的构建本试验首先检测LPS刺激BEAS-2B细胞ERS发生标志性蛋白免疫球蛋白重链结合蛋白（immunoglobulin heavy chain binding protein,BIP...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
LPS/TM对BEAS-2B细胞ERS标志蛋白BIP表达的影响；数据表示为平均值±SE（n=3），柱标*代表差异显著（P<0.05），**代表差异性极显著（P<0.01），下同
24图 3-4 PRMT1 在 LPS 诱导的 BEAS-2B 细胞 ERS 中的表达情况Fig. 3-4 The expression of PRMT1 in BEAS-2B cell ERS stimulated by LPS.2.4 AMI-1 处理对 BEAS-2B 细胞 ERS 蛋白的影响AMI-1 抑制剂处理 BEAS-2B 细胞的结果显示：添加 200 ng/mL LPS 联合 10 uMMI 处理细胞 12 h 可抑制 PRMT1（P < 0.05）蛋白水平的表达图 3-5（A），但是对磷化的 PERK（P > 0.05）无影响图 3-5（B）。进一步我们对 PRMT1 的定位情况进行检测，与空白对照组相比，发现 AMI 添加组使胞质绿色荧光强度减弱图 3-5（C）。
图 3-5 AMI-1 处理对 BEAS-2B 细胞蛋白水平的影响Fig 3-5 Effect of BEAS-2B cell protein level stimulated by AMI-1.2.5 过表达 PRMT1 对 BEAS-2B 细胞 ERS 蛋白的影响由图 3-6（A，B）可知，在 PRMT1 质粒转染细胞后，PRMT1 转录水平和蛋白水均显著性升高（P < 0.01），而内质网应激 PERK-eIF2α 信号通路蛋白 p-PERK（及其游 eIF2α 蛋白（P < 0.05）表达减少图 3-6（C，D）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]内毒素致急性肺损伤的发病机制研究进展[J]. 赵利利,戎浩,孙芳云. 实用药物与临床. 2015(04)
[2]内质网应激在呼吸系统疾病中的生物学效应[J]. 林帆,陈亚红. 中华医学杂志. 2015 (02)
[3]组蛋白修饰与肝癌关系的研究进展[J]. 张浩鹏,畅建平,杨艳梅,张新宇. 胃肠病学和肝病学杂志. 2014(08)
[4]Role of PRMTs in cancer: Could minor isoforms be leaving a mark?[J]. R Mitchell Baldwin,Alan Morettin,Jocelyn C?té. World Journal of Biological Chemistry. 2014(02)
[5]家禽营养与表观遗传学[J]. 喻小琼,赵桂苹,刘冉冉,郑麦青,文杰. 动物营养学报. 2013(10)
[6]Role of microRNAs in the immune system,inflammation and cancer[J]. Jennifer Raisch,Arlette Darfeuille-Michaud,Hang Thi Thu Nguyen. World Journal of Gastroenterology. 2013(20)
[7]蛋白精氨酸甲基转移酶在E3大鼠哮喘模型中表达变化的研究[J]. 孙青竹,焦芳芳,杨旭东,钟波,蒋梅花,李国良,吕彬,韩燕,宁启兰,张富军,孙健,吕社民. 南方医科大学学报. 2010(04)
[8]黄芪多糖对卵白蛋白致敏大鼠皮肤内微血管及肥大细胞的影响[J]. 张爽,张涛,滕可导,王安如,俞英昉,张晗. 中国农业大学学报. 2010(01)
[9]黄芪多糖对糖尿病鼠T细胞亚群的免疫调节作用[J]. 陈蔚,李益明,俞茂华,施小梅. 中国现代医学杂志. 2007(01)
[10]利多卡因对LPS致大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的保护作用[J]. 徐道妙,明广峰,吴晓英,陈胜喜. 中南大学学报(医学版). 2006(02)
硕士论文
[1]PRMT2过表达对乳腺癌细胞增殖的影响[D]. 张艳敏.南华大学 2015
本文编号：3571726
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
LPS/TM对BEAS-2B细胞ERS标志蛋白BIP表达的影响；数据表示为平均值±SE（n=3），柱标*代表差异显著（P<0.05），**代表差异性极显著（P<0.01），下同
24图 3-4 PRMT1 在 LPS 诱导的 BEAS-2B 细胞 ERS 中的表达情况Fig. 3-4 The expression of PRMT1 in BEAS-2B cell ERS stimulated by LPS.2.4 AMI-1 处理对 BEAS-2B 细胞 ERS 蛋白的影响AMI-1 抑制剂处理 BEAS-2B 细胞的结果显示：添加 200 ng/mL LPS 联合 10 uMMI 处理细胞 12 h 可抑制 PRMT1（P < 0.05）蛋白水平的表达图 3-5（A），但是对磷化的 PERK（P > 0.05）无影响图 3-5（B）。进一步我们对 PRMT1 的定位情况进行检测，与空白对照组相比，发现 AMI 添加组使胞质绿色荧光强度减弱图 3-5（C）。
图 3-5 AMI-1 处理对 BEAS-2B 细胞蛋白水平的影响Fig 3-5 Effect of BEAS-2B cell protein level stimulated by AMI-1.2.5 过表达 PRMT1 对 BEAS-2B 细胞 ERS 蛋白的影响由图 3-6（A，B）可知，在 PRMT1 质粒转染细胞后，PRMT1 转录水平和蛋白水均显著性升高（P < 0.01），而内质网应激 PERK-eIF2α 信号通路蛋白 p-PERK（及其游 eIF2α 蛋白（P < 0.05）表达减少图 3-6（C，D）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]内毒素致急性肺损伤的发病机制研究进展[J]. 赵利利,戎浩,孙芳云. 实用药物与临床. 2015(04)
[2]内质网应激在呼吸系统疾病中的生物学效应[J]. 林帆,陈亚红. 中华医学杂志. 2015 (02)
[3]组蛋白修饰与肝癌关系的研究进展[J]. 张浩鹏,畅建平,杨艳梅,张新宇. 胃肠病学和肝病学杂志. 2014(08)
[4]Role of PRMTs in cancer: Could minor isoforms be leaving a mark?[J]. R Mitchell Baldwin,Alan Morettin,Jocelyn C?té. World Journal of Biological Chemistry. 2014(02)
[5]家禽营养与表观遗传学[J]. 喻小琼,赵桂苹,刘冉冉,郑麦青,文杰. 动物营养学报. 2013(10)
[6]Role of microRNAs in the immune system,inflammation and cancer[J]. Jennifer Raisch,Arlette Darfeuille-Michaud,Hang Thi Thu Nguyen. World Journal of Gastroenterology. 2013(20)
[7]蛋白精氨酸甲基转移酶在E3大鼠哮喘模型中表达变化的研究[J]. 孙青竹,焦芳芳,杨旭东,钟波,蒋梅花,李国良,吕彬,韩燕,宁启兰,张富军,孙健,吕社民. 南方医科大学学报. 2010(04)
[8]黄芪多糖对卵白蛋白致敏大鼠皮肤内微血管及肥大细胞的影响[J]. 张爽,张涛,滕可导,王安如,俞英昉,张晗. 中国农业大学学报. 2010(01)
[9]黄芪多糖对糖尿病鼠T细胞亚群的免疫调节作用[J]. 陈蔚,李益明,俞茂华,施小梅. 中国现代医学杂志. 2007(01)
[10]利多卡因对LPS致大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的保护作用[J]. 徐道妙,明广峰,吴晓英,陈胜喜. 中南大学学报(医学版). 2006(02)
硕士论文
[1]PRMT2过表达对乳腺癌细胞增殖的影响[D]. 张艳敏.南华大学 2015
本文编号：3571726
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