瘤胃异常代谢产物组胺对奶牛肝脏中COX-2表达的影响
发布时间：2022-01-07 02:07
随着规模化、集约化饲养方式的普及,现代牧业中高产奶牛疾病的疾病增多明显,严重危害奶牛业健康发展,而奶牛亚急性瘤胃酸中毒（SARA）是高产奶牛的常见疾病,每年造成巨大损失。奶牛亚急性瘤胃酸中毒时,瘤胃内产生的大量组胺是导致奶牛产生各种炎症的重要因素。炎性因子COX-2、IL-6、TNF-α及NF-κB信号通路与炎症的产生密切相关。为研究奶牛瘤胃酸中毒时血液内组胺浓度的变化及对奶牛炎性因子及炎性信号通路的影响,本试验通过对健康奶牛饲喂高精料日粮,诱发亚急性瘤胃酸中毒,促使瘤胃内大量产生组胺,手术安装血管瘘管采集门静脉和肝静脉血液样品,通过检测血液中组胺含量及COX-2含量,并通过RT-PCR对在体肝脏中的COX-2、NF-κB、IL-6、TNF-α表达水平进行相对定量和绝对定量检测,为组胺对奶牛炎性信号通路产生的影响提供一定的依据。1.不同日粮精粗比对奶牛组胺和COX-2产生的影响随机选取6头泌乳期的成年健康奶牛,随机分组,采用2×2的拉丁方设计,对两组奶牛分别饲喂等能等氮的高精料日粮和低精料日粮,诱发亚急性瘤胃酸中毒,手术安装血管瘘管采集门静脉和肝静脉血液样品,组胺Elisa试剂盒检测血...
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１．由ＯＲＡＩｌ介导的ＮＦ－ｋ?Ｂ信号通路在组胺导致ｃｏｘ－２活化中的作用的图??示
图３－１肝静脉和口静脉在肝化内的分支??Ｆｉｇ．３－１?Ｂｒａｎｃｈ?ｏｆ?化ｅ?ｈｅｐａｔｉｃ?ｖｅｉｎ?ａｎｄ?ｐｏｒｔａｌ?ｖｅｉｎ?ｉｎ?化ｅ?ｌｉｖｅｒ??样品的米集??ｌ无菌注射器的针尖剪去０．２?ｃｍ，然后磨平，分别插入巧静抽掉血管湊内的肝素后，吸取肝静脉血和口静脉血，注入真空采血管使注射器内的血液慢慢流入。迅速将真空采血管。超低温离屯、机４?°Ｃ、３０００?ｒｐｍ离必２０?ｍｉｎ，吸取上清，－２０?ｒ冰箱保存、待测。??组胺浓度的测定??胺浓度测定的方法主要参考牛组胺Ｅｌｉｓａ试剂盒（上海科兴行，步骤如下；??
３．１?Ｃ０Ｘ－２、ＮＦ－ＫＢ、圧－６和ＴＮＦ?ａ的民Ｔ－ＰＣ民扩增结果??３．?１．１?ＲＮＡ琼脂糖凝胶电泳??提取总ＲＮＡ琼脂糖凝胶电泳结果如图４－１，２８?Ｓ和１８?Ｓ条带清晰，没有脱尾现??象，灰度比约为２；?１，表明所提ＲＮＡ完整，质量可靠。同时分光光度计检测结??果也显示，在２６０?ｎｍ和２８０?ｎｍＲＮＡ的紫外吸光度比值在１．８－２．０之间，说明ＲＮＡ??无降解，纯度较高，可用于后继相关实验。??■—２８Ｓ??一??ｉｏｏ??－巧??图４－１总ＲＮＡ掠脂糖凝胶电泳??Ｆｉｇ?４－１?ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ??３．?１．２?Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣＲ?扩增曲线??由图４－２至图４－５可见，各基因的融解曲线均为单峰，无异常峰出现，也没有??出现主峰的异常增宽；且扩増曲线均呈标准的＂Ｓ＂形。说明试验ＰＣＲ产物较纯、??未出现污染、引物二聚体和非特异性的扩增，可Ｗ进行后续的定量分析。??．械减??‘?ｆ??—?Ｊ??？?：?＞?？?？?巧：巧??ＳＭ??仪曲Ｊ！拟Ｗ泌ＵＷ卽ｆ扑‘＂Ｓ??４４??
【参考文献】：
期刊论文
[1]组胺及组胺受体对免疫系统调节作用[J]. 钟斐,蒋瑾瑾. 中华临床医师杂志(电子版). 2013(21)
[2]奶牛日粮中物理有效中性洗涤纤维作用的研究进展[J]. 王炳,申军士,叶均安,刘建新. 中国畜牧杂志. 2013(19)
[3]奶牛亚急性瘤胃酸中毒及其防治[J]. 钱春艳. 中国畜牧兽医文摘. 2013(06)
[4]组胺H4受体基因多态性与结肠癌的相关性[J]. 王红珊,李国豪,曹毅敏,林美仪,关爱萍,臧林泉. 中国老年学杂志. 2012(13)
[5]奶牛亚急性瘤胃酸中毒的诊断及防治[J]. 加合甫·艾迪西. 新疆畜牧业. 2012(02)
[6]奶牛蹄叶炎的病因探究[J]. 崔海,李旭. 中国奶牛. 2012(03)
[7]iNOS/COX-2与恶性肿瘤[J]. 王菊勇,郭净,郑展. 现代肿瘤医学. 2012(01)
[8]亚急性瘤胃酸中毒诊断方法研究进展[J]. 徐俊,周凌云,姜雅慧,孙鹏,沈维军,杨永新. 华北农学报. 2011(S1)
[9]NF-κB、Bcl-2与酒精性肝病[J]. 张曦,王沁. 胃肠病学和肝病学杂志. 2011(07)
[10]NF-κB国外最新研究进展[J]. 刘海楠,陈雷,高彦宏. 临床合理用药杂志. 2011(07)
博士论文
[1]奶牛蹄底溃疡发病机理和治疗试验研究[D]. 罗安智.中国农业大学 2005
硕士论文
[1]肥胖与非肥胖2型糖尿病患者外周血C-反应蛋白、肿瘤坏死因子-α和白介素-1β水平的比较研究[D]. 王露.中国医科大学 2006
[2]南京地区奶牛隐性乳房炎流行调查与病原分析及PCR检测[D]. 郑浩.南京农业大学 2004
本文编号：3573593
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１．由ＯＲＡＩｌ介导的ＮＦ－ｋ?Ｂ信号通路在组胺导致ｃｏｘ－２活化中的作用的图??示
图３－１肝静脉和口静脉在肝化内的分支??Ｆｉｇ．３－１?Ｂｒａｎｃｈ?ｏｆ?化ｅ?ｈｅｐａｔｉｃ?ｖｅｉｎ?ａｎｄ?ｐｏｒｔａｌ?ｖｅｉｎ?ｉｎ?化ｅ?ｌｉｖｅｒ??样品的米集??ｌ无菌注射器的针尖剪去０．２?ｃｍ，然后磨平，分别插入巧静抽掉血管湊内的肝素后，吸取肝静脉血和口静脉血，注入真空采血管使注射器内的血液慢慢流入。迅速将真空采血管。超低温离屯、机４?°Ｃ、３０００?ｒｐｍ离必２０?ｍｉｎ，吸取上清，－２０?ｒ冰箱保存、待测。??组胺浓度的测定??胺浓度测定的方法主要参考牛组胺Ｅｌｉｓａ试剂盒（上海科兴行，步骤如下；??
３．１?Ｃ０Ｘ－２、ＮＦ－ＫＢ、圧－６和ＴＮＦ?ａ的民Ｔ－ＰＣ民扩增结果??３．?１．１?ＲＮＡ琼脂糖凝胶电泳??提取总ＲＮＡ琼脂糖凝胶电泳结果如图４－１，２８?Ｓ和１８?Ｓ条带清晰，没有脱尾现??象，灰度比约为２；?１，表明所提ＲＮＡ完整，质量可靠。同时分光光度计检测结??果也显示，在２６０?ｎｍ和２８０?ｎｍＲＮＡ的紫外吸光度比值在１．８－２．０之间，说明ＲＮＡ??无降解，纯度较高，可用于后继相关实验。??■—２８Ｓ??一??ｉｏｏ??－巧??图４－１总ＲＮＡ掠脂糖凝胶电泳??Ｆｉｇ?４－１?ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ??３．?１．２?Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣＲ?扩增曲线??由图４－２至图４－５可见，各基因的融解曲线均为单峰，无异常峰出现，也没有??出现主峰的异常增宽；且扩増曲线均呈标准的＂Ｓ＂形。说明试验ＰＣＲ产物较纯、??未出现污染、引物二聚体和非特异性的扩增，可Ｗ进行后续的定量分析。??．械减??‘?ｆ??—?Ｊ??？?：?＞?？?？?巧：巧??ＳＭ??仪曲Ｊ！拟Ｗ泌ＵＷ卽ｆ扑‘＂Ｓ??４４??
【参考文献】：
期刊论文
[1]组胺及组胺受体对免疫系统调节作用[J]. 钟斐,蒋瑾瑾. 中华临床医师杂志(电子版). 2013(21)
[2]奶牛日粮中物理有效中性洗涤纤维作用的研究进展[J]. 王炳,申军士,叶均安,刘建新. 中国畜牧杂志. 2013(19)
[3]奶牛亚急性瘤胃酸中毒及其防治[J]. 钱春艳. 中国畜牧兽医文摘. 2013(06)
[4]组胺H4受体基因多态性与结肠癌的相关性[J]. 王红珊,李国豪,曹毅敏,林美仪,关爱萍,臧林泉. 中国老年学杂志. 2012(13)
[5]奶牛亚急性瘤胃酸中毒的诊断及防治[J]. 加合甫·艾迪西. 新疆畜牧业. 2012(02)
[6]奶牛蹄叶炎的病因探究[J]. 崔海,李旭. 中国奶牛. 2012(03)
[7]iNOS/COX-2与恶性肿瘤[J]. 王菊勇,郭净,郑展. 现代肿瘤医学. 2012(01)
[8]亚急性瘤胃酸中毒诊断方法研究进展[J]. 徐俊,周凌云,姜雅慧,孙鹏,沈维军,杨永新. 华北农学报. 2011(S1)
[9]NF-κB、Bcl-2与酒精性肝病[J]. 张曦,王沁. 胃肠病学和肝病学杂志. 2011(07)
[10]NF-κB国外最新研究进展[J]. 刘海楠,陈雷,高彦宏. 临床合理用药杂志. 2011(07)
博士论文
[1]奶牛蹄底溃疡发病机理和治疗试验研究[D]. 罗安智.中国农业大学 2005
硕士论文
[1]肥胖与非肥胖2型糖尿病患者外周血C-反应蛋白、肿瘤坏死因子-α和白介素-1β水平的比较研究[D]. 王露.中国医科大学 2006
[2]南京地区奶牛隐性乳房炎流行调查与病原分析及PCR检测[D]. 郑浩.南京农业大学 2004
本文编号：3573593
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