单宁酸诱导猪肾细胞氧化损伤和凋亡

发布时间：2022-01-07 02:31

　　本试验对单宁酸（TA）介导的动物肾细胞毒性的分子机制展开研究,旨在为消减和利用饲料中的抗营养因子提供试验依据。采用猪肾细胞系PK-15细胞,以不同浓度[0（空白对照）、10、20、30μmol/L]TA处理PK-15细胞24 h后,测定细胞活性、乳酸脱氢酶（LDH）活性、氧化损伤指标、线粒体膜电位（MMP）、凋亡相关蛋白表达量、细胞周期。结果显示:TA剂量依赖性地降低PK-15细胞的活力。与空白对照相比,30μmol/L TA极显著增加了培养基中LDH的活性（P<0.01）;极显著升高了PK-15细胞中丙二醛（MDA）含量（P<0.01）,显著或极显著降低了谷胱甘肽（GSH）含量（P<0.01）以及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）（P<0.01）、超氧化物歧化酶（SOD）（P<0.01）和过氧化氢酶（CAT）（P<0.05）活性,极显著增加了活性氧（ROS）含量（P<0.01）;极显著降低了MMP（P<0.01）。与空白对照相比,30μmol/L TA可使Bcl-2相关的X蛋白（Bax）/B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）（P<0.0... 

【文章来源】：动物营养学报. 2020,32(09)北大核心CSCD

【文章页数】：10 页

【部分图文】：

TA对PK-15细胞的毒性作用

ROS是主要发生在氧化应激反应中的重要的信号分子。相反，SOD、GSH-Px和CAT是清除ROS的3种重要抗氧化酶。当抗氧化酶活性降低时，ROS的积累会引起脂质过氧化，主要表现为MDA含量的增加。通过分析不同浓度TA对MDA含量的影响（图2-A）发现，随着TA浓度的增加，MDA含量呈剂量依赖性增加，且20、30μmol/L TA处理PK-15细胞24 h后MDA含量较空白对照极显著增加（P<0.01）。如图2-B至图2-E所示，高浓度（30μmol/L)TA处理PK15细胞后，GSH-Px(P<0.01）、SOD(P<0.01）和CAT活性（P<0.05）显著或极显著降低；如图2-F和图2-G所示，ROS含量与TA浓度成正比，20、30μmol/L TA处理PK-15细胞24 h后ROS含量较空白对照极显著增加（P<0.01）。此外，与空白对照相比，10、20、30μmol/L TA处理PK-15细胞24 h后GSH含量均极显著降低（P<0.01）。上述结果证实了TA可以诱导PK-15细胞产生氧化应激反应。2.3 TA诱导MMP降低

采用PI/RNaseA染色液和流式细胞仪进行细胞周期分析。经30μmol/L的TA处理24 h后，PK-15细胞的S期状态较未处理细胞显著增加（图5-A和图5-B）。与空白对照相比，PK-15细胞处于S期的比例由22.15%增加到46.82%，说明30μmol/L TA处理使PK-15细胞S期阻滞。图4 TA对PK-15细胞线粒体通路凋亡蛋白表达的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]不同来源单宁酸替代高锌对保育猪生长性能、血清生化指标和抗氧化指标的影响[J]. 蓝林诚,沈水宝,农斯伟,伍校军,吴克宁,韦区,李修宇,郭辉.  饲料研究. 2019(07)
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[3]单宁的抗营养作用与去除方法的研究进展[J]. 艾庆辉,苗又青,麦康森.  中国海洋大学学报(自然科学版). 2011(Z1)
[4]单宁急性毒性及其对小鼠丙二醛和抗氧化酶的影响[J]. 秦绪军,海春旭,何伟,梁欣,赵康涛,张晓迪,陈宏莉,刘瑞.  卫生毒理学杂志. 2004(02)

硕士论文
[1]单宁酸提高保育猪生产性能及其机制研究[D]. 胡爱国.福建农林大学 2018



本文编号：3573629