二、三维培养模式对奶牛乳腺上皮细胞泌乳代谢相关基因的影响

发布时间：2022-01-08 12:19

　　本文主要进行了奶牛乳腺上皮细胞（BMEC）三维培养体系的建立，在此基础上通过不同的试验条件下（全营养因素处理、单一氨基酸处理、催乳素处理）比较二、三维养模式对奶牛乳腺上皮细胞泌乳代谢相关基因的影响。同时利用优化的培养模式进行支链氨基酸和催乳素影响乳蛋白基因转录的的研究。通过以上研究，为BMEC三维培养体系的建立和支链氨基酸、催乳素调控BMEC乳蛋白基因转录提供一定的理论基础。试验结果如下：1、BMEC在Matrigel基质胶中可以快速的形成类腺泡结构，而在鼠尾胶中则形成散落的聚集物。且在培养的过程中Matrigel基质胶比鼠尾胶稳定。三维模式下培养时间和接种密度影响BMEC中αs1-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白的基因表达量。三维模式下BMEC在培养的第5d形成了完全成熟的腺泡，三维模式下BMEC的适合接种密度为1x106个/mL。2、在相同的营养物质及激素水平下，三维培养的BMEC三种乳蛋白的基因表达量显著高于二维培养（P＜0.05），三维培养的BMEC通过western blot的方法能够检测到β-酪蛋白，二维培养的BMEC检测不到β-酪蛋白。三维培养的BMEC在形态上呈现的特点与... 

【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区

【文章页数】：112 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

二维和三维接种方式模式图

图 1 二维和三维接种方式模式图Fig.1 Schematic of inoculation method for 3D and 2D culture奶牛乳腺在体内的发育及体外三维培养条件奶牛乳腺上皮细胞的发育 奶牛乳腺在体内的发育奶牛的乳腺在胚胎期开始发育，经历青春期、妊娠期、泌乳期和干奶奶牛乳腺的典型特征是形成一个强大的树枝状的管腔网。妊娠期在激皮细胞开始大量的增殖，形成一个末端有腺泡的管腔网络，这个网络奶牛乳腺泌乳的基本分泌单元，结构见图 1。乳腺的发育在分娩前已经量乳汁的分泌主要是由这些具有分泌活性的乳腺上皮细胞完成。到上皮细胞开始凋亡，随之奶牛乳汁的分泌结束[93]。在奶牛的乳腺中乳增殖、分化和消退的过程，随着奶牛不同的生理期而循环往复，进而。

二、三维培养模式对奶牛乳腺上皮细胞泌乳代谢相关基因的影响4.2 体外三维培养条件奶牛乳腺上皮细胞的发育在三维培养模式下 BMEC 的发育过程与体内乳腺的发育过程相似，间也会形成特定的结构。BMEC 在基质胶中经历连续的增殖和迁移聚个发育完全的类腺泡结构。BMEC 在三维培养模式下，也经历细胞腺构的形成、腺泡结构的凋亡。BMEC 在基质胶中的发育过程见图 8。5 三维培养模式下凝胶诱导细胞分化的原理以凝胶为载体的三维培养，对细胞分化起维持和调控作用的主要是凝蛋白和培养体系内的激素。


本文编号：3576547