猪流行性腹泻病毒HeB10/2014株的分离与鉴定

发布时间：2022-01-10 17:58

　　为确定2014年河北某猪场哺乳仔猪群腹泻的病原,本研究从该发病猪场采集了22份临床样品,采用PCR方法进行腹泻病原的检测。结果显示其中17份样品为猪流行性腹泻病毒（PEDV）阳性,而猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）和猪轮状病毒（PoRV）均为阴性。选取其中5份PEDV阳性样品在Vero细胞中进行病毒的分离,结果显示,仅一份样品在接种细胞24 h后即可观察到细胞病变。对病变细胞进行RT-PCR及间接免疫荧光鉴定均为PEDV阳性。将分离的病毒株命名为He B10/2014。将其在Vero细胞中传至F5代次后病毒增殖明显增快,病毒滴度于感染细胞24 h达到峰值。对分离株的S基因进行克隆和测序分析,结果显示该病毒分离株符合国内近年来流行病毒株S蛋白的变异特征,即在S蛋白中存在4个连续氨基酸的插入(⁵⁹QGVN⁶²)和3个氨基酸的缺失(¹⁴0N和¹⁶³NI¹⁶⁴)。本研究结果表明分离获得的HeB10/2014株为国内近年来新的PEDV流行株。 

【文章来源】：中国预防兽医学报. 2016,38(04)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 抗体、细胞及临床样品
    1.2 主要试剂
    1.3 样品检测
    1.4 病毒的分离
    1.5 病毒特异性鉴定
    1.6 病毒间接免疫荧光(IFA)鉴定
    1.7 病毒增殖曲线的绘制
    1.8 病毒S基因的克隆及测序分析
2 结果
    2.1 临床样品的RT-PCR检测
    2.2 病毒分离及效价测定
    2.3 He B10/2014分离株的特异性检测
    2.4 He B10/2014分离株的IFA鉴定
    2.5 He B10/2014 F5代分离株的增殖动态
    2.6 He B10/2014分离株S基因序列分析
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]应用猪胎肠单层细胞培养猪流行性腹泻病毒的研究[J]. 宣华,邢德坤,王殿瀛,朱维正,赵凤玉,巩怀俊,费思阁.  兽医大学学报. 1984(03)



本文编号：3581162