猪源链球菌耐药性检测及质粒P69生物信息学分析
发布时间：2022-01-10 22:30
猪链球菌（Streptococcus suis）是猪只上呼吸道常在的革兰氏阳性球菌,可引起猪败血症、脑膜炎和心内膜炎等多种疾病,通常存在于猪的鼻腔、扁桃体、生殖器和消化道等几个部位。在过去几十年内,猪链球菌感染一直是困扰全球养猪业的主要问题,给养殖业造成了巨大的经济损失,已被列为国家二类动物疫病。同时可通过伤口及呼吸道等途径感染人,引发人的化脓性关节炎、脑膜脑炎及心内膜炎等,严重的可致人死亡,使得猪链球菌感染成为严重的公共卫生问题。我国曾在四川、江苏等地爆发过人感染猪链球菌的疫情。猪链球菌广泛的存在,对人类和动物健康造成了极大的威胁。抗生素的使用与耐药病原菌密切相关,多重耐药菌的出现对公众健康构成严重威胁。国内外对猪链球菌耐药性的调查结果显示其耐药情况已经十分严重,其中optrA耐药基因可介导恶唑烷酮类和酰胺醇类药物耐药,而恶唑烷酮类代表性药物利奈唑胺（LZD）作为抗革兰氏阳性菌的“最后一道防线”,可用于治疗包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐万古霉素肠球菌（VRE）在内的革兰氏阳性菌感染。为了解猪链球菌在健康猪群中的血清型、耐药性以及optrA基因在猪链球菌中的流行情况。本研...
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
革兰氏染色结果图
第3章猪链球菌的分离鉴定17猪链球菌在选择性培养基上形成针尖大小溶血单菌落单菌落。3.3.2革兰氏染色结果猪链球菌经革兰染色，在油镜下观察，为紫色成对或短链状排列的革兰氏阳性球菌（图3-2）。图3-1革兰氏染色结果图Fig.3-1Theresultofgramstain3.3.3分子生物学鉴定结果猪链球菌分离株扩增出689bp大小gdh基因片段（图3-3）。M：DL2000；1：ddH2O；2-23：临床分离菌株；24：标准株M：DL2000;1：ddH2O;2-23：isolates；24：Streptococcussuistype2图3-2猪链球菌特异性gdh基因鉴定结果Fig.3-2DetectionofStreptococcussuisspecificgdhgene3.3.4猪链球菌的采集及分离情况
第6章质粒P69的生物信息学分析43在研究体外诱导鉴定耐药基因对猪链球菌耐药水平的影响实验中，采用氟苯尼考升高浓度连续诱导体系进行诱导，具体方法如下图：图6-1猪链球菌氟苯尼考体外诱导示意图Fig.6-1TheinvitroinductionofStreptococcussuisFlorfenicol6.3实验结果6.3.1耐药基因检测结果对58株猪链球菌进行optrA基因的检测，optrA阳性率为1.7%（1/58）。图6-1optrA基因PCR扩增结果Fig.6-1AmplificationofoptrAgenebyPCR图6-2optrA基因PCR扩增结果Fig.6-2AmplificationofoptrAgenebyPCR6.3.2体外诱导结果筛选携带optrA与不携带optrA的猪链球菌测定菌株对氟苯尼考的MIC值划线于含相应浓度氟苯尼考的血平板以1/2MIC、MIC、2MIC、4MIC…诱导猪链球菌将诱导后的菌株划线于血平板传代10次测定其对氟苯尼考的MIC值和检测optrA
【参考文献】：
期刊论文
[1]上海市闵行区首例人感染猪链球菌2型病例流行病及病原学调查[J]. 吕静,潘浩,朱敏慧,周文琴,陈明亮,吴敏. 公共卫生与预防医学. 2020(01)
[2]130株上海地区猪链球菌血清分型调查研究[J]. 王晓旭,宁昆,徐锋,沈莉萍. 上海畜牧兽医通讯. 2019(04)
[3]2017年我国4个省份屠宰场猪链球菌的分离鉴定及耐药性分析[J]. 王长珍,刘文宇,祝瑶,栾天,于淼,杨亲,刘思国,张万江. 中国预防兽医学报. 2019(12)
[4]江苏苏北地区猪链球菌耐药性调查及万古霉素耐药基因检测[J]. 杜凡姝,吕茜,段锻,陈丽,黄金虎,王丽平. 畜牧与兽医. 2018(12)
[5]广东地区猪群中猪链球菌流行病学调查分析[J]. 王娟,刘琪,周如月,贾爱卿,王贵平. 中国预防兽医学报. 2017(08)
[6]山西省致病性猪链球菌毒力基因测定及耐药性监测[J]. 王红宝,李红丽,郭雪丽,王树华,曹日亮,杨晋青,王志俊,韩惠瑛,段亚娜,张国权. 养猪. 2015(06)
[7]β-内酰胺抗生素作用机制的研究进展[J]. 张韬,倪孟祥,邵雷,陈代杰. 中国抗生素杂志. 2015(10)
[8]广东地区猪链球菌的耐药性特点及四环素耐药基因携带情况[J]. 黄文明,欧阳昀,张民泽,黄震,谢杰雄,孙龙,张桂红. 中国畜牧兽医. 2013(05)
[9]表观健康的猪肉携带猪链球菌的调查[J]. 臧莹安,谢乐新,李家侨,庞木生,李淼,宋帅,李春玲. 中国兽医杂志. 2012(08)
[10]猪链球菌河北分离株对常用抗菌药物的耐药性[J]. 芮萍,陈翠珍,段玲欣,王秋悦,杨彩然,马增军. 中国兽医杂志. 2012(02)
博士论文
[1]猪链球菌致STSLS相关转录因子的筛选及其调控机制的研究[D]. 许仲旻.华中农业大学 2018
硕士论文
[1]天津地区猪链球菌2型流行情况调查及耐药性检测[D]. 王颖.吉林大学 2017
[2]江苏部分地区2016年健康猪群猪链球菌流行病学调查[D]. 贺亚楠.南京农业大学 2017
[3]2015年苏南地区健康猪群猪链球菌流行病学调查[D]. 周明瑶.南京农业大学 2016
[4]猪链球菌的耐药性及猪链球菌在健康猪群中分布特征的研究[D]. 何宏魁.华中农业大学 2010
[5]重庆市猪链球菌流行病学调查及GDH基因的克隆和序列分析[D]. 谭世君.西南大学 2007
本文编号：3581535
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
革兰氏染色结果图
第3章猪链球菌的分离鉴定17猪链球菌在选择性培养基上形成针尖大小溶血单菌落单菌落。3.3.2革兰氏染色结果猪链球菌经革兰染色，在油镜下观察，为紫色成对或短链状排列的革兰氏阳性球菌（图3-2）。图3-1革兰氏染色结果图Fig.3-1Theresultofgramstain3.3.3分子生物学鉴定结果猪链球菌分离株扩增出689bp大小gdh基因片段（图3-3）。M：DL2000；1：ddH2O；2-23：临床分离菌株；24：标准株M：DL2000;1：ddH2O;2-23：isolates；24：Streptococcussuistype2图3-2猪链球菌特异性gdh基因鉴定结果Fig.3-2DetectionofStreptococcussuisspecificgdhgene3.3.4猪链球菌的采集及分离情况
第6章质粒P69的生物信息学分析43在研究体外诱导鉴定耐药基因对猪链球菌耐药水平的影响实验中，采用氟苯尼考升高浓度连续诱导体系进行诱导，具体方法如下图：图6-1猪链球菌氟苯尼考体外诱导示意图Fig.6-1TheinvitroinductionofStreptococcussuisFlorfenicol6.3实验结果6.3.1耐药基因检测结果对58株猪链球菌进行optrA基因的检测，optrA阳性率为1.7%（1/58）。图6-1optrA基因PCR扩增结果Fig.6-1AmplificationofoptrAgenebyPCR图6-2optrA基因PCR扩增结果Fig.6-2AmplificationofoptrAgenebyPCR6.3.2体外诱导结果筛选携带optrA与不携带optrA的猪链球菌测定菌株对氟苯尼考的MIC值划线于含相应浓度氟苯尼考的血平板以1/2MIC、MIC、2MIC、4MIC…诱导猪链球菌将诱导后的菌株划线于血平板传代10次测定其对氟苯尼考的MIC值和检测optrA
【参考文献】：
期刊论文
[1]上海市闵行区首例人感染猪链球菌2型病例流行病及病原学调查[J]. 吕静,潘浩,朱敏慧,周文琴,陈明亮,吴敏. 公共卫生与预防医学. 2020(01)
[2]130株上海地区猪链球菌血清分型调查研究[J]. 王晓旭,宁昆,徐锋,沈莉萍. 上海畜牧兽医通讯. 2019(04)
[3]2017年我国4个省份屠宰场猪链球菌的分离鉴定及耐药性分析[J]. 王长珍,刘文宇,祝瑶,栾天,于淼,杨亲,刘思国,张万江. 中国预防兽医学报. 2019(12)
[4]江苏苏北地区猪链球菌耐药性调查及万古霉素耐药基因检测[J]. 杜凡姝,吕茜,段锻,陈丽,黄金虎,王丽平. 畜牧与兽医. 2018(12)
[5]广东地区猪群中猪链球菌流行病学调查分析[J]. 王娟,刘琪,周如月,贾爱卿,王贵平. 中国预防兽医学报. 2017(08)
[6]山西省致病性猪链球菌毒力基因测定及耐药性监测[J]. 王红宝,李红丽,郭雪丽,王树华,曹日亮,杨晋青,王志俊,韩惠瑛,段亚娜,张国权. 养猪. 2015(06)
[7]β-内酰胺抗生素作用机制的研究进展[J]. 张韬,倪孟祥,邵雷,陈代杰. 中国抗生素杂志. 2015(10)
[8]广东地区猪链球菌的耐药性特点及四环素耐药基因携带情况[J]. 黄文明,欧阳昀,张民泽,黄震,谢杰雄,孙龙,张桂红. 中国畜牧兽医. 2013(05)
[9]表观健康的猪肉携带猪链球菌的调查[J]. 臧莹安,谢乐新,李家侨,庞木生,李淼,宋帅,李春玲. 中国兽医杂志. 2012(08)
[10]猪链球菌河北分离株对常用抗菌药物的耐药性[J]. 芮萍,陈翠珍,段玲欣,王秋悦,杨彩然,马增军. 中国兽医杂志. 2012(02)
博士论文
[1]猪链球菌致STSLS相关转录因子的筛选及其调控机制的研究[D]. 许仲旻.华中农业大学 2018
硕士论文
[1]天津地区猪链球菌2型流行情况调查及耐药性检测[D]. 王颖.吉林大学 2017
[2]江苏部分地区2016年健康猪群猪链球菌流行病学调查[D]. 贺亚楠.南京农业大学 2017
[3]2015年苏南地区健康猪群猪链球菌流行病学调查[D]. 周明瑶.南京农业大学 2016
[4]猪链球菌的耐药性及猪链球菌在健康猪群中分布特征的研究[D]. 何宏魁.华中农业大学 2010
[5]重庆市猪链球菌流行病学调查及GDH基因的克隆和序列分析[D]. 谭世君.西南大学 2007
本文编号：3581535
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3581535.html
