牛结核病诊断用细胞因子的筛选及其在临床检测中的初步应用

发布时间：2022-01-11 07:04

　　牛结核病（Bovine Tuberculosis）主要由牛分枝杆菌（M. bovis）感染引起。牛结核病的防治和彻底根除需要灵敏、有效的诊断方法,目前以牛提纯结核菌素皮内变态反应试验和IFN-γ释放试验应用最为广泛。与皮内变态反应试验相比,IFN-γ释放试验灵敏度高,但是进口的IFN-γ检测试剂盒价格昂贵,发展中国家的养殖企业难以承担。因此,筛选能够作为结核病诊断用的新型细胞因子,进而建立相关诊断方法,符合我国畜牧业和奶业发展的需要。研究主要以临床结核病阳性牛和人工感染牛为试验对象,收集外周血淋巴细胞,经牛结核菌素（PPD-B）或重组CE蛋白刺激后,用荧光定量PCR和间接ELISA方法分别检测外周血淋巴细胞中IL-6、IL-12A、IL-17A、IP-10和TNF-α的转录、表达水平,分析各细胞因子与IFN-γ转录、表达水平之间的相关性,初步探讨其与牛分枝杆菌感染之间的关系,以期筛选到可用于牛结核病诊断的细胞因子。结果表明,临床结核病阳性牛外周血淋巴细胞IP-10与IL-17A的nRNA相对转录水平显著高于健康牛,与IFN-γ的mRNA转录具有良好相关性,表明IP-10与IL-17A的... 

【文章来源】：中国农业科学院北京市

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

实验动物皮内变态反应及IFN-Y释放试验检测结果

蛋白表达水平之间相关性，如表2.4。结果显示在CE刺激后，丨FN-Y与IL-17、IP-IO、TNF-a的蛋白表达水平之间无相关性（5口^11113111"值分别为-0.1429，-0.4714和-0.2643),而且图2.5显示在重组蛋白CE刺激全血后，只有IFN-Y的蛋白表达水平在结核病阳性牛和健康牛之间有显著性差异，阴性健康牛血装中IL-17、丨P-IO、TNF-a的蛋白表达水平均高于IFN-Y,但是与结核病阳性牛样品中的表达水平无显著差异，因此IL-17、[P-IO、TNF-a的蛋白表达水平不适合作为牛结核病的分子标19

5头阴性健康牛的全血或PBMC样品）的IFN-y、IL-17、IP-10的TNF-a的mRNA转录水平和蛋白表达水平进行相关性分析，结果如图2.6。结果显示，IFN-y的蛋白表达水平与mRNA转录水平之间有一定的相关性，其spearman r为0.6286，而IL-17、IP-10. TNF-a的蛋白表达税与mRNA转录水平之间并无相关性。20

【参考文献】：
期刊论文
[1]牛结核病诊断方法的研究进展[J]. 王金果,刘爱林,周向梅,苑方重,尹晓敏,杨建民,杨利峰,赵德明.  中国畜牧兽医. 2010(07)



本文编号：3582334