牛诺如病毒、牛星状病毒和牛环曲病毒多重PCR检测方法的建立及应用

发布时间：2022-01-11 22:35

　　为建立能同时检测牛诺如病毒（BNoV）、牛星状病毒（BAstV）和牛环曲病毒（BToV）的方法,根据BNoV、BAstV和BToV基因组的保守区域设计3对特异性引物,预期特异性扩增BNoV、BAstV和BToV的片段大小分别为542,376,698 bp,建立了BNoV、BAstV和BToV的多重PCR检测方法。结果显示,该方法能特异性扩增BNoV、BAstV和BToV的目的条带,且未扩增出其他犊牛腹泻病原;BNoV、BAstV和BToV的最低检测限分别为1.34×10⁴,1.06×10⁴,1.03×10⁴拷贝/μL。对采集自河南省的221份犊牛腹泻样品的检测结果显示,BNoV、BAstV和BToV的检出率分别为9.96%（22/221）,18.10%（40/221）和19.00%（42/221）。三者与单一PCR检测结果相一致。结果表明,本试验建立的多重PCR方法可用于BNoV、BAstV和BToV的检测和流行病学调查。 

【文章来源】：中国兽医学报. 2020,40(10)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

BNoV、BAstV和BToV多重和单一PCR扩增结果

多重PCR的特异性试验

经核酸分析仪测定,pMD18-T-BNoV、pMD18-T-BAstV和pMD18-T-BToV的质粒质量浓度分别为47.6,35.7和38.3 mg/L。结果显示,用建立的多重PCR方法对BNoV、BAstV和BToV的最低检测限分别为1.34×104,1.06×104和1.03×104 拷贝/μL(图3)。2.4 重复性试验

【参考文献】：
期刊论文
[1]牛环曲病毒RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 师志海,徐照学,兰亚莉,王文佳,孟红丽,王亚州.  中国兽医学报. 2019(12)



本文编号：3583570