鹅GnIH及其受体基因的克

发布时间：2022-01-12 09:50

　　促性腺激素抑制激素（GnIH）能以剂量依赖的模式作用于垂体前叶减少促性腺激素的释放,是目前发现的唯一能抑制生殖系统发育和功能的神经肽。GnIH能从下丘脑、垂体和性腺三个方面同时对繁殖进行调节。除了繁殖方面,它还在压力反射、摄食调节和季节性繁殖等多个方面起着重要的调节作用。为了研究GnIH对鹅繁殖的影响,本试验检测了GnIH及其两个受体RFRPR和NPFFR在产蛋高峰期母鹅不同组织中的表达,并以鹅卵巢颗粒细胞为研究模型,通过添加不同浓度的外源GnIH处理,分析了GnIH对鹅卵巢颗粒细胞功能的影响。主要研究结果如下：（1）获得了GnIH前体mRNA、RFRPR、NPFFR的编码区部分CDS区序列。通过序列分析和氨基酸比对,发现RFRPR与NPFFR之间碱基序列的同源性为65.35%,并且都具有7个相似的氨基酸跨膜结构域。（2）分析了GnIH前体mRNA在产蛋高峰期母鹅不同组织的表达模式。发现GnIH在下丘脑中的表达最高,除了脑部外,在肾上腺、输卵管和卵巢中也有表达,说明GnIH主要的合成场所是下丘脑。（3） RFRPR和NPFFR主要在脑部表达。RFRPR更符合GnIH免疫神经纤维的分布,... 

【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
主要符号说明
前言
1 文献综述
    1.1 GNIH的发现以及在脑部的定位
    1.2 GNIH受体的鉴别
    1.3 GNIH的表达与释放
        1.3.1 褪黑激素对GnIH的调控
        1.3.2 压力对GnIH的调控
    1.4 GNIH在垂体中的研究
    1.5 GNIH在生殖腺中的重要作用
    1.6 研究的目的和意义
2 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 试验动物
        2.1.2 主要试验器材与软件
        2.1.3 主要试剂和试剂盒
        2.1.4 主要试剂与配制
    2.2 试验方法
        2.2.1 目的基因部分序列的获得
        2.2.2 鹅颗粒细胞的培养
        2.2.3 不同浓度GnIH处理鹅颗粒细胞
        2.2.4 鹅各组织及颗粒细胞中GnIH相关基因mRNA表达水平检测
        2.2.5 不同浓度GnIH处理鹅颗粒细胞后雌二醇和孕酮分泌的变化
        2.2.6 不同浓度GnIH处理鹅颗粒细胞的BrdU免疫组化染色
        2.2.7 不同浓度GnIH处理鹅颗粒细胞的TUNEL免疫组化染色
        2.2.8 GnIH对颗粒细胞活性的影响
3 结果与分析
    3.1 鹅RFRPR和NPFFR基因部分序列的获得
        3.1.1 鹅组织RNA的提取和RT-PCR结果
        3.1.2 基因同源性分析及分子进化树的构建
        3.1.3 蛋白质结构比对与分析
    3.2 鹅各组织中GNIH、RFRPR和NPFFR的MRNA表达水平
    3.3 GNIH对颗粒细胞类固醇激素合成与分泌的影响
        3.3.1 GnIH对颗粒细胞E_2和P_4的分泌影响
        3.3.2 GnIH对颗粒细胞类固醇激素合成相关基因的调控
    3.4 GNIH对颗粒细胞凋亡的影响
        3.4.1 GnIH对颗粒细胞活性的影响
        3.4.2 BrdU和TUNEL免疫组化实验
        3.4.3 GnIH对增殖与凋亡相关基因的影响
    3.5 GNIH的相关调控
4 讨论
    4.1 基因进化分析
    4.2 GNIH及其受体基因在鹅不同组织中的表达
    4.3 GNIH能抑制颗粒细胞类固醇激素的合成与分泌
    4.4 GNIH促进颗粒细胞凋亡
    4.5 GNIH能通过LH-R和FSH-R来实现对颗粒细胞的调节
5 结论
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的论文及著作


【参考文献】：
期刊论文
[1]鹅GnIH基因克隆及其在卵泡发育中的表达规律研究[J]. 董霞,肖其海,刘贺贺,韩春春,王继文,李亮.  中国家禽. 2013(07)



本文编号：3584560