犬流感病毒江苏分离株致病生物学特性研究

发布时间：2022-01-12 12:41

　　犬流感病毒（Canine influenza virus, CIV）是新出现的能引起犬严重急性呼吸系统疾病的病原体,对犬的健康构成严重危害。犬作为伴侣动物在人类生活中占据特殊地位,因此犬流感病毒的感染也具有重要的公共卫生意义。禽源CIV是近年来在亚洲地区流行的能够引起犬严重呼吸系统疾病的主要病原。目前我国分离到的CIV绝大多数是禽源H3N2亚型。本实验室先前对禽源H3N2亚型CIV江苏分离株在小鼠上进行的致病性研究显示,A/canine/Jiangsu/06/2010（CIV06）能够对小鼠造成肺外感染并且能够经肠道排出病毒,暗示CIV06很可能具备不同于现已报道的大多数CIV毒株的致病生物学特性。为了研究CIV06对犬的致病性,在已有CIV06对小鼠致病性研究的基础上开展了动物回归实验。感染组采用9只比格犬,鼻内接种10795半数鸡胚感染量（EIDso）的病毒液,对照组接种等量灭菌PBS。感染后第1天犬即出现临床症状,并检测到病毒排出。呼吸系统疾病临床症状计分发现,感染组在感染后第4-6天,临床症状得分达到峰值。PCR检测表明,实验感染犬经呼吸道和消化道途径均可排毒。荧光定量PCR检... 

【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一篇 文献综述
    第一章 流感病毒的研究进展
        1 流感病毒病毒粒子的结构和功能
            1.1 病毒粒子结构
            1.2 病毒粒子的组成
                1.2.1 PB2聚合酶
                1.2.2 PB1聚合酶
                1.2.3 PA聚合酶
                1.2.4 血凝素
                1.2.5 核蛋白
                1.2.6 神经氨酸酶
                1.2.7 M1蛋白
                1.2.8 M2蛋白
                1.2.9 非结构蛋白NS1和NS2
            1.3 流感病毒的复制
        2 流感病毒在自然界的传播
            2.1 流感病毒的自然宿主
            2.2 流感病毒跨宿主传播
            2.3 流感病毒对宿主的适应
            2.4 流感病毒的监测
        3 犬流感病毒
            3.1 概述
            3.2 H3N2犬流感病毒
        4 结束语
        参考文献
    第二章 犬流感病毒的致病特征
        1 决定流感病毒毒力的因素
            1.1 病毒的因素
            1.2 宿主的因素
        2 犬流感的临床症状
            2.1 H3N8犬流感病毒感染
            2.2 H3N2犬流感病毒感染
            2.3 H5N2犬流感病毒感染
            2.4 临床症状小结
        3 犬流感病毒的感染特征
            3.1 病毒感染犬的能力
            3.2 毒株间差异对感染的影响
            3.3 病理剖检与组织病理学观察
        4 犬流感病毒对其他动物的感染能力
            4.1 马
            4.2 禽类
            4.3 小鼠和豚鼠
        5 小结
        参考文献
第二篇 试验研究
    第三章 H3N2亚型犬流感病毒江苏分离株在犬体内的实验感染及组织动态分布
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 主要试剂与仪器
            1.2 毒株
                1.2.1 病毒扩增
                1.2.2 病毒纯化
                1.2.3 病毒滴度测定
            1.3 菌株
            1.4 实验动物
            1.5 感染试验
            1.6 临床症状观察与样品采集
                1.6.1 临床数据采集
                1.6.2 鼻腔与肛门拭子采集
                1.6.3 血样采集
                1.6.4 剖检与脏器样品采集
            1.7 病毒RNA检测
                1.7.1 RNA提取
                1.7.2 cDNA合成
                1.7.3 套式PCR检测
                1.7.4 荧光定量PCR检测
            1.8 组织病理学检查与免疫组织化学
                1.8.1 组织固定
                1.8.2 组织包埋
                1.8.3 组织切片
                1.8.4 HE染色
                1.8.5 IHC染色
        2 结果
            2.1 HI试验
            2.2 临床症状表现和评估
            2.3 血常规与血液生化指标检测
            2.4 剖检
            2.5 病毒排出
            2.6 REAL-TIME PCR检测组织中病毒载量
            2.7 组织病理学与免疫组织化学
        3 讨论
        参考文献
        ABSTRACT
    第四章 H3N2亚型犬流感病毒江苏分离株在鸡体内的实验感染及组织动态分布
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 主要试剂与仪器
            1.2 毒株
            1.3 菌株
            1.4 细胞
                1.4.1 原代鸡胚成纤维细胞的制备
                1.4.2 MDCK细胞
            1.5 间接免疫荧光试验
            1.6 实验感染鸡
            1.7 临床症状观察与样品采集
                1.7.1 临床数据采集
                1.7.2 鼻腔与肛门拭子采集
                1.7.3 血样采集
                1.7.4 剖检与脏器样品采集
            1.8 病毒RNA检测
            1.9 组织病理学检查与IHC
        2 结果
            2.1 IFA
            2.2 HI试验
            2.3 临床观察和评估
            2.4 REAL-TIME PCR检测样品中病毒载量
            2.5 组织病理学检查与免疫组织化学
        3 讨论
        参考文献
        ABSTRACT
全文总结
致谢



本文编号：3584792