蓝舌病病毒1型VP2、VP5蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定

发布时间：2022-01-17 16:34

　　蓝舌病（Bluetongue，BT）是由呼肠孤病毒科环状病毒属蓝舌病病毒（BTV）引起的可感染山羊、绵羊、牛、鹿和骆驼等反刍动物的传染病。该病可经媒介昆虫（如库蠓、伊蚊等）传播，病畜以口腔、鼻腔和胃肠道黏膜发生溃疡性炎症变化为特征。BTV血清型众多，目前已至少存在26个血清型。由于BT各个血清学之间没有交叉保护作用，因此，尽早鉴别诊断爆发的BT血清型并在该病流行区域接种相应的疫苗是防治本病的关键。BTV基因组由10个双股正链RNA组成，10个节段基因编码7种结构蛋白（VP1～VP7）和4种非结构蛋白（NS1、NS2、NS3、NS3a）。其中VP2蛋白和VP5蛋白是BT的血清型特异性抗原。根据Genbank中BTV1L2基因序列（登录号：JN848760.1）和M5基因序列（登录号：JN848763.1）各设计1对引物，从感染BTV1的BHK-21细胞沉淀中提取病毒RNA，经RT-PCR扩增L2基因和M5基因。将这两段基因酶切后分别克隆至pMAL-c4x原核表达载体和pFastBacHTA真核表达载体，分别表达重组的VP2蛋白和VP5蛋白。分别以原核系统表达的VP2蛋白和VP5蛋白免疫4... 

【文章来源】：中国农业科学院北京市

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

M5、L2基因的PCR扩增Fig.2-2PCRamplificationofM5andL2gene

重组质粒pC4X-VP2、pC4X-VP5的酶切鉴定和PCR鉴定Fig.2-3IdentificationoftherecombinantplasmidpC4X-VP5andplasmidpC4X-VP2byrestrictedenzymedigestionandPCRM:DNAMarker;1、8:pMAL-C4Xcontrol;2:pC4X-VP2;3:pMAL-C4XdigestedbyBamHⅠandHindⅢ;4:pC4X-VP2digestedbyBamHI;5:pC4X-VP2digestedbyHindⅢ;6:pC4X-VP2digestedbyBamHⅠandHindⅢ;7:Identificationofthe

重组VP2蛋白、VP5蛋白的Western-Blot分析

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
[1]蓝舌病病毒8型VP2蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定[D]. 秦永丽.中国农业科学院 2012
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本文编号：3595065