神经肽Y对猪小肠上皮细胞NaPi-IIb蛋白表达及磷吸收的影响
发布时间：2022-01-21 23:28
本研究通过猪小肠上皮细胞（intestinal epithelial cells, IEC）的体外培养,建立体外IEC模型,旨在从细胞水平、基因转录和蛋白表达三个层面研究不同浓度神经肽Y（neuropeptide Y,NPY）对猪IEC中Ⅱb型钠磷转运蛋白（sodium dependent phosphate cotransporter II b, NaPi-II b）表达及小肠无机磷（inorganic phosphorus, Pi）吸收的影响,阐释NPY调控Pi吸收的机理,为进一步研究动物Pi吸收和调控机制提供试验依据。试验设有6个处理,对照组未加NPY,其他处理组添加不同浓度的NPY（10-11mol/L10-10mol/L、10-9mol/L、10-8mol/L和10-7mol/L）,每个处理设有6-8个重复,通过噻唑蓝（3-（4,5-Dimethylthiazol-2-yl）-2,5-diphenyltetrazolium bromide, MTT）比色法检测小肠上皮细胞的增殖情况,通过磷检测试剂盒采用磷钼酸法测定细胞上清液Pi含量的变化,采用荧光定量PCR技术检测IEC中N...
【文章来源】：湖南农业大学湖南省
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
动物体内憐的吸收代谢模式图
与小鼠NaPi-IIa同源性在85?97%之间（Hartmann等，1996)，而与斑马鱼同源性只有47% (Nalbant等，1999)。NaPi-IIa和NaPi-IIb的进化关系和序列同源性见图1.3。NaPi-II型蛋白家族由溶质转运蛋白（solme carriers, SLC )编码，SLC34A1、SLC34A2 和 SLC34A3 基因分别编码NaPi- II a.NaPi- II b 和 NaPi- II c 蛋白（Villa-Bellosta等，2009; Patti等，2013; Forster等，2013)。NaPi-II型蛋白在憐主动转运过程中表达活性最强（1\401^￡:06等，2007;：6丨卜6〖等,2013)。NaPi-IIb蛋白主要在动物小肠中表达，调节小肠BBMV对无机憐的吸收（Wang等，2009); NaPi-IIa蛋白和NaPi-IIc蛋白主要在肾脏中表达（Forster等
位于2173bp位点。后又采用SWISS-MODEL在线工具对NaPi-lib蛋白三级结构进行了预测分析，提出了 NaPi-lib蛋白可能的三维结构模式如图1.4所示。图1.4猪NaPi-nb预测蛋白三维结构模式图（引自项智锋，2013)Fig. 1.4 The 3 d institutions structure analysis of predicted swine NaPi-11 b protein.1.3 NaPi-IIb蛋白与磷吸收的关系NaPi-IIb蛋白在维持动物机体憐稳态上起着关键性作用（Ohi等，2011;曹满湖，2009),为了确定NaPi-IIb蛋白在小肠憐吸收和机体隣平衡中所扮演的角色，Sabbagh等（2009)用NaPi-lib基因敲除小鼠（Npt2b—)作为试验模型，结果发现Npt2b-'?小鼠增加了粪便中憐的排泄，而血清中憐含量保持不变；降低了尿中憐的排泄，减少血清中FGF23的水平（Tomoe等
【参考文献】：
期刊论文
[1]动物肠道磷吸收的影响因素[J]. 李建慧. 中国饲料. 2013(06)
[2]多巴胺D1类受体对神经肽Y受体介导的促血管平滑肌细胞增殖的影响[J]. 周永巧,王震,刘莉,王微,韩愈,陈彩宇,任红梅,何多芬,杨剑,曾春雨. 第三军医大学学报. 2012(07)
[3]神经肽Y促进3T3L1前脂肪细胞的增殖和分化[J]. 刘敏,胡平安,丁克祥. 细胞与分子免疫学杂志. 2011(06)
[4]日粮磷水平对肉鸡磷代谢及Na/Pi-Ⅱb基因mRNA表达的影响[J]. 方热军,贺佳,曹满湖,陈娟,李美君,方成堃. 畜牧兽医学报. 2011(02)
[5]不同质量浓度神经肽培养正常人成骨细胞的增殖活性[J]. 张学敏,马文辉,时述山,李亚非. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(50)
[6]低磷条件下VD3对大鼠小肠NaPi-Ⅱb mRNA表达及磷吸收的调控[J]. 曹满湖,贺建华,方热军,陈娟. 中国农业科学. 2010(18)
[7]不同磷水平对Na+/PiⅡb转运载体蛋白mRNA表达和磷吸收的影响[J]. 曹满湖,方热军,陈娟. 动物营养学报. 2010(04)
[8]猪小肠粘膜上皮细胞的分离及体外原代培养模型的建立[J]. 职爱民,左建军,黄志毅,邹仕庚,冯定远. 饲料工业. 2010(01)
[9]猪无机磷吸收机制研究进展[J]. 罗士津,韩进诚,张铁鹰,汪儆,瞿明仁. 饲料博览(技术版). 2008(03)
[10]生长猪小肠钠依赖型磷摄入特性的研究[J]. 孙杰,张铁鹰,陈志伟,韩进诚,刘志伟. 畜牧兽医学报. 2008(01)
硕士论文
[1]日粮磷水平对肉仔鸡小肠磷吸收的影响及机理[D]. 周晓.中国农业科学院 2012
[2]日粮磷水平对肉鸡生长性能和磷利用的影响及其机理研究[D]. 陈娟.湖南农业大学 2012
[3]神经肽Y引起人肝细胞凋亡机制的比较蛋白组学研究[D]. 王霞.第二军医大学 2012
[4]神经肽Y对3T3-L1前脂肪细胞增殖与分化的影响及其作用机制的研究[D]. 唐浩能.中南大学 2012
[5]鸡小肠离体培养条件优化及在饲料磷效价评定中的应用研究[D]. 徐运杰.湖南农业大学 2009
[6]猪小肠黏膜上皮细胞培养方法的建立[D]. 王静.西北农林科技大学 2009
[7]不同方法评定饲料磷生物学效价的比较研究[D]. 邹秀芸.湖南农业大学 2008
[8]山羊小肠上皮细胞系的建立及其对氮素的利用研究[D]. 王海霞.扬州大学 2008
本文编号：3601153
【文章来源】：湖南农业大学湖南省
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
动物体内憐的吸收代谢模式图
与小鼠NaPi-IIa同源性在85?97%之间（Hartmann等，1996)，而与斑马鱼同源性只有47% (Nalbant等，1999)。NaPi-IIa和NaPi-IIb的进化关系和序列同源性见图1.3。NaPi-II型蛋白家族由溶质转运蛋白（solme carriers, SLC )编码，SLC34A1、SLC34A2 和 SLC34A3 基因分别编码NaPi- II a.NaPi- II b 和 NaPi- II c 蛋白（Villa-Bellosta等，2009; Patti等，2013; Forster等，2013)。NaPi-II型蛋白在憐主动转运过程中表达活性最强（1\401^￡:06等，2007;：6丨卜6〖等,2013)。NaPi-IIb蛋白主要在动物小肠中表达，调节小肠BBMV对无机憐的吸收（Wang等，2009); NaPi-IIa蛋白和NaPi-IIc蛋白主要在肾脏中表达（Forster等
位于2173bp位点。后又采用SWISS-MODEL在线工具对NaPi-lib蛋白三级结构进行了预测分析，提出了 NaPi-lib蛋白可能的三维结构模式如图1.4所示。图1.4猪NaPi-nb预测蛋白三维结构模式图（引自项智锋，2013)Fig. 1.4 The 3 d institutions structure analysis of predicted swine NaPi-11 b protein.1.3 NaPi-IIb蛋白与磷吸收的关系NaPi-IIb蛋白在维持动物机体憐稳态上起着关键性作用（Ohi等，2011;曹满湖，2009),为了确定NaPi-IIb蛋白在小肠憐吸收和机体隣平衡中所扮演的角色，Sabbagh等（2009)用NaPi-lib基因敲除小鼠（Npt2b—)作为试验模型，结果发现Npt2b-'?小鼠增加了粪便中憐的排泄，而血清中憐含量保持不变；降低了尿中憐的排泄，减少血清中FGF23的水平（Tomoe等
【参考文献】：
期刊论文
[1]动物肠道磷吸收的影响因素[J]. 李建慧. 中国饲料. 2013(06)
[2]多巴胺D1类受体对神经肽Y受体介导的促血管平滑肌细胞增殖的影响[J]. 周永巧,王震,刘莉,王微,韩愈,陈彩宇,任红梅,何多芬,杨剑,曾春雨. 第三军医大学学报. 2012(07)
[3]神经肽Y促进3T3L1前脂肪细胞的增殖和分化[J]. 刘敏,胡平安,丁克祥. 细胞与分子免疫学杂志. 2011(06)
[4]日粮磷水平对肉鸡磷代谢及Na/Pi-Ⅱb基因mRNA表达的影响[J]. 方热军,贺佳,曹满湖,陈娟,李美君,方成堃. 畜牧兽医学报. 2011(02)
[5]不同质量浓度神经肽培养正常人成骨细胞的增殖活性[J]. 张学敏,马文辉,时述山,李亚非. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(50)
[6]低磷条件下VD3对大鼠小肠NaPi-Ⅱb mRNA表达及磷吸收的调控[J]. 曹满湖,贺建华,方热军,陈娟. 中国农业科学. 2010(18)
[7]不同磷水平对Na+/PiⅡb转运载体蛋白mRNA表达和磷吸收的影响[J]. 曹满湖,方热军,陈娟. 动物营养学报. 2010(04)
[8]猪小肠粘膜上皮细胞的分离及体外原代培养模型的建立[J]. 职爱民,左建军,黄志毅,邹仕庚,冯定远. 饲料工业. 2010(01)
[9]猪无机磷吸收机制研究进展[J]. 罗士津,韩进诚,张铁鹰,汪儆,瞿明仁. 饲料博览(技术版). 2008(03)
[10]生长猪小肠钠依赖型磷摄入特性的研究[J]. 孙杰,张铁鹰,陈志伟,韩进诚,刘志伟. 畜牧兽医学报. 2008(01)
硕士论文
[1]日粮磷水平对肉仔鸡小肠磷吸收的影响及机理[D]. 周晓.中国农业科学院 2012
[2]日粮磷水平对肉鸡生长性能和磷利用的影响及其机理研究[D]. 陈娟.湖南农业大学 2012
[3]神经肽Y引起人肝细胞凋亡机制的比较蛋白组学研究[D]. 王霞.第二军医大学 2012
[4]神经肽Y对3T3-L1前脂肪细胞增殖与分化的影响及其作用机制的研究[D]. 唐浩能.中南大学 2012
[5]鸡小肠离体培养条件优化及在饲料磷效价评定中的应用研究[D]. 徐运杰.湖南农业大学 2009
[6]猪小肠黏膜上皮细胞培养方法的建立[D]. 王静.西北农林科技大学 2009
[7]不同方法评定饲料磷生物学效价的比较研究[D]. 邹秀芸.湖南农业大学 2008
[8]山羊小肠上皮细胞系的建立及其对氮素的利用研究[D]. 王海霞.扬州大学 2008
本文编号：3601153
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3601153.html
