miRNA-206对牛乳腺上皮细胞脂质合成相关基因表达及脂肪酸组成的影响
发布时间：2022-01-24 11:11
牛奶中的脂肪酸含量及成分决定着牛奶的品质,而miRNA能够调控哺乳动物乳腺中脂质代谢途径,进而影响脂质含量及其成分。本研究旨在通过miRNA转染技术揭示miR-206对牛（Bos taurus）乳腺上皮细胞（bovine mammary epithelial cells, BMECs）中脂质合成相关基因表达、甘油三酯含量及脂肪酸组成的影响。在牛乳腺上皮细胞中转染60 nmol/L miR-206模拟物和抑制物,应用qRT-PCR技术和生化方法分别检测脂质合成相关基因的表达和细胞内甘油三酯含量,使用气相色谱检测脂肪酸组成的变化。结果表明,miR-206模拟物抑制甘油三酯合成相关基因线粒体甘油-3-磷酸酰基转移酶（glycerol-3-phosphate acyltransferase mitochondrial, GPAM）、磷酸甘油酰基转移酶6 （1-acylglycerol-3-phosphate O-acyltransferase6, AGPAT6）、二酰甘油酰基转移酶1 （diacylglycerol O-acyltransferase 1, DGAT1）、脂素1 （lipin ...
【文章来源】：农业生物技术学报. 2020,28(11)北大核心CSCD
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
mi R-206模拟物(A)和抑制物(B)对牛乳腺上皮细胞脂质合成相关基因表达的影响
mi R-206对牛乳腺上皮细胞中甘油三酯含量的影响
乳腺上皮细胞中的甘油三酯主要在内质网合成。脂肪酸从头合成过程中产生的脂酰辅酶A及外源摄取的脂肪酸被酯化后形成3-磷酸甘油骨架，然后经GPAM作用而生成溶血磷脂酸(lysobisphosphatidic acids,LPA);LPA经AGPAT家族催化生成磷脂酸，进而在磷脂酸酶作用下发生去磷酸化反应生成甘油二酯，通过DGAT家族催化生成甘油三酯。本研究结果显示，在牛乳腺上皮细胞中，过表达mi R-206使甘油三酯合成相关酶的基因表达均显著下调，抑制mi R-206则显著上调。GPAM是合成甘油三酯第一步反应的限速酶，细胞内甘油三酯水平受到GPAM酶含量的调控(Roy et al.,2002;Roy et al.,2006)，敲除GPAM可显著降低牛胚胎成纤维细胞中甘油三酯合成和脂质代谢相关基因的表达(Yu et al.,2017)。AGPAT6作为AGPAT家族亚型之一，是小鼠、牛、羊等哺乳动物组织中甘油三酯和三酰基甘油生物合成的关键酶，AGPAT6在哺乳期的表达显著上调(Bionaz,Loor,2008a)。DGAT1催化三酰基甘油合成中的末端，是甘油三酯合成的关键酶，存在于所有细胞类型中，在甘油三酯合成最活跃的组织和器官中表达最高(Yen et al.,2008)。多个研究结果表明，DGAT1与乳脂含量显著相关(Tabaran et al.,2015;Pacheco-Pappenheim et al.,2019;Tzompasosa et al.,2016)，在牛肌肉细胞中过表达DGAT1可以使三酰基甘油含量升高(Liu et al.,2007)。此外LPIN1属于LPIN家族，主要有两方面的功能：一是编码Mg2+依赖性的磷脂酶，促进甘油三酯和磷脂合成；二是作为转录协同刺激因子调控过氧化物酶体活化过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptors,PPARγ)和PPARα等，进而调控脂肪酸细胞分化和脂类代谢，对动物脂肪沉积有重要影响。LPIN1具有促进甘油二酯和甘油三酯生物合成的作用(Bionaz et al.,2012)。本研究中，过表达mi R-206使上述与甘油三酯合成相关的基因表达下调，同时细胞内甘油三酯含量降低。图2 mi R-206模拟物(A)和抑制物(B)对牛乳腺上皮细胞脂质合成相关基因表达的影响
本文编号：3606468
【文章来源】：农业生物技术学报. 2020,28(11)北大核心CSCD
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
mi R-206模拟物(A)和抑制物(B)对牛乳腺上皮细胞脂质合成相关基因表达的影响
mi R-206对牛乳腺上皮细胞中甘油三酯含量的影响
乳腺上皮细胞中的甘油三酯主要在内质网合成。脂肪酸从头合成过程中产生的脂酰辅酶A及外源摄取的脂肪酸被酯化后形成3-磷酸甘油骨架，然后经GPAM作用而生成溶血磷脂酸(lysobisphosphatidic acids,LPA);LPA经AGPAT家族催化生成磷脂酸，进而在磷脂酸酶作用下发生去磷酸化反应生成甘油二酯，通过DGAT家族催化生成甘油三酯。本研究结果显示，在牛乳腺上皮细胞中，过表达mi R-206使甘油三酯合成相关酶的基因表达均显著下调，抑制mi R-206则显著上调。GPAM是合成甘油三酯第一步反应的限速酶，细胞内甘油三酯水平受到GPAM酶含量的调控(Roy et al.,2002;Roy et al.,2006)，敲除GPAM可显著降低牛胚胎成纤维细胞中甘油三酯合成和脂质代谢相关基因的表达(Yu et al.,2017)。AGPAT6作为AGPAT家族亚型之一，是小鼠、牛、羊等哺乳动物组织中甘油三酯和三酰基甘油生物合成的关键酶，AGPAT6在哺乳期的表达显著上调(Bionaz,Loor,2008a)。DGAT1催化三酰基甘油合成中的末端，是甘油三酯合成的关键酶，存在于所有细胞类型中，在甘油三酯合成最活跃的组织和器官中表达最高(Yen et al.,2008)。多个研究结果表明，DGAT1与乳脂含量显著相关(Tabaran et al.,2015;Pacheco-Pappenheim et al.,2019;Tzompasosa et al.,2016)，在牛肌肉细胞中过表达DGAT1可以使三酰基甘油含量升高(Liu et al.,2007)。此外LPIN1属于LPIN家族，主要有两方面的功能：一是编码Mg2+依赖性的磷脂酶，促进甘油三酯和磷脂合成；二是作为转录协同刺激因子调控过氧化物酶体活化过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptors,PPARγ)和PPARα等，进而调控脂肪酸细胞分化和脂类代谢，对动物脂肪沉积有重要影响。LPIN1具有促进甘油二酯和甘油三酯生物合成的作用(Bionaz et al.,2012)。本研究中，过表达mi R-206使上述与甘油三酯合成相关的基因表达下调，同时细胞内甘油三酯含量降低。图2 mi R-206模拟物(A)和抑制物(B)对牛乳腺上皮细胞脂质合成相关基因表达的影响
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