Wnt10b基因在褪黑素调控绒毛周期生长中作用机制的研究
发布时间：2022-01-25 16:52
Wnt信号通路能影响毛囊细胞的生成、发育、增殖与分化等作用,进而影响绒毛生长周期以及毛乳头细胞增殖,Wnt10b基因为Wnt/β-catenin信号通路中重要信号因子之一,对绒毛生长调控的研究具有重要意义;大量研究表明,褪黑素能够调控毛囊周期性生长,但其调控机理尚不清楚。本研究是在课题前期组转录组测序的基础上,筛选出受褪黑素影响的毛囊生长相关的β-catenin、FGF21、Lef1、SFRP1基因,研究通过绒山羊皮肤上皮细胞培养、Wnt10b基因干扰、qRT-PCR以及western-blot等技术检测Wnt10b基因在褪黑素调控绒毛周期生长中的作用机制。研究结果如下:（1）本研究根据添加褪黑激素浓度不同设置四个试验组,分别为对照组（0 pg/mL）、100pg/mL、300pg/mL、600pg/mL 以及 900pg/mL 处理绒山羊上皮细胞,利用cck-8法检测各组皮肤上皮细胞增殖情况。结果表明:300pg/mL褪黑素浓度对皮肤上皮细胞增殖效应最佳（P<0.05）。（2）根据山羊Wnt10b基因序列,构建三种干扰质粒片段并融入质粒载体,shRNA-Wnt10b-CDS1、...
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
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【参考文献】：
期刊论文
[1]过表达FGF10促进山羊皮下前体脂肪细胞分化[J]. 许晴,李倩,王永,朱江江,张亚楠,林亚秋. 畜牧兽医学报. 2019(10)
[2]Wnt10b与骨形态发生蛋白9诱导间充质干细胞成骨分化的关系[J]. 胡莹,廖云鹏,李福书,周娅,李沁,孙文娟,何百成. 中国药理学通报. 2019(10)
[3]脂质体和慢病毒介导P75神经生长因子受体及神经生长因子转染骨髓间充质干细胞的效果比较[J]. 朱伦井,贝朝涌,段江涛,彭称飞,马跃刚,王宁,陈俊毅. 中国组织工程研究. 2019(21)
[4]绒山羊非长绒期埋植褪黑激素对其产绒性能和血浆褪黑激素浓度的影响[J]. 刘影,张欢,段涛,武子元,李炎,张微. 中国农业大学学报. 2019(03)
[5]褪黑素对毛皮动物生产性能及皮肤毛囊相关基因表达影响研究进展[J]. 郭跃跃,宋兴超,王海军,邢秀梅,张宇飞,徐超,赵家平. 动物医学进展. 2018(11)
[6]Wnt10b在乾华肉用美利奴羊毛囊周期中的表达规律[J]. 程晓印,姜怀志. 中国兽医学报. 2018(07)
[7]山羊Wnt10b基因生物学特征及组织细胞表达模式分析[J]. 林森,林亚秋,朱江江,李倩,王永. 基因组学与应用生物学. 2017(10)
[8]Wnt10b对体外培养小鼠触须毛囊生长的作用研究[J]. 卿尚兰,徐诣芝,杨芳. 重庆医科大学学报. 2017(12)
[9]褪黑激素对内蒙古绒山羊初级毛囊体外培养影响的研究[J]. 张铁佳,王岩,王琳,吴静,史振丹,赵艳红. 中国农业大学学报. 2016(11)
[10]山羊FGF10基因的克隆及其表达分析[J]. 李倩,林亚秋,朱江江,林森,张小玉,王永. 农业生物技术学报. 2016(11)
博士论文
[1]绒山羊毛乳头细胞全转录组学分析及与毛母质细胞分子互作机制的研究[D]. 马森.西北农林科技大学 2019
[2]褪黑素和CNP对绵羊卵母细胞体外成熟的影响及过表达AANAT的研究[D]. 田秀芝.中国农业大学 2017
[3]山羊诱导性多能干细胞的研究[D]. 宋辉.南京农业大学 2013
[4]褪黑激素影响山羊绒生长的分子机理[D]. 丽春.内蒙古农业大学 2012
[5]Wnt10b在毛囊周期调控中的作用及机制研究[D]. 李玉红.第三军医大学 2011
[6]持续埋植褪黑素对绒山羊绒毛生长特性和相关基因影响的研究[D]. 常子丽.内蒙古农业大学 2010
[7]Wnt10b与毛囊发育启动中基板形成及其分布的关系[D]. 纪影畅.南方医科大学 2010
[8]褪黑激素受体基因在内蒙古绒山羊皮肤毛囊中的表达[D]. 赵艳红.内蒙古农业大学 2009
[9]山羊毛囊干细胞及组织工程皮肤构建研究[D]. 史明艳.西北农林科技大学 2006
硕士论文
[1]TNFRSF1A影响内蒙古绒山羊毛囊发育周期的研究[D]. 马丽娜.内蒙古农业大学 2019
[2]褪黑激素对绒山羊皮肤let-7家族及其靶基因表达的影响[D]. 王建蒙.内蒙古农业大学 2019
[3]腺病毒介导SpCas9对鸡AMH基因高效敲除系统的构建[D]. 梁传堉.西北农林科技大学 2019
[4]SPP1和HGF基因对阿尔巴斯绒山羊毛乳头细胞增殖调控作用的研究[D]. 王瑛敏.内蒙古大学 2019
[5]山羊ATF6干扰慢病毒载体构建及其对胎盘滋养层细胞凋亡的影响[D]. 付饶.西北农林科技大学 2018
[6]褪黑激素调节动物毛皮发育的作用及其机制[D]. 马文杰.山东农业大学 2018
[7]基于RNA-seq分析褪黑素对内蒙古绒山羊毛囊发育相关基因表达的影响[D]. 王岩.内蒙古农业大学 2017
[8]褪黑素刺激对内蒙古绒山羊毛囊干细胞增殖和分化的影响及机理研究[D]. 曹春花.内蒙古农业大学 2016
[9]利用RNA干扰技术研究RORα对褪黑激素促进绒毛生长相关基因表达的影响[D]. 张铁佳.内蒙古农业大学 2016
[10]山羊Grp78基因过表达和shRNA干扰慢病毒载体的构建及鉴定[D]. 张喆.西北农林科技大学 2015
本文编号：3608898
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１内蒙古绒山羊皮肤上皮细胞??Ｆｉｇ?．１?Ｉｎｎｅｒ?Ｍｏｎｇｏｌｉａ?Ｃａｓｈｍｅｒｅ?Ｇｏａｔ?Ｓｋｉｎ?Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ?Ｃｅｌｌｓ??
Ｍ?ＷｎｔｌＯｂ基因在褪黑素调控绒毛周期生长中作用机制的研究???图１内蒙古绒山羊皮肤上皮细胞??Ｆｉｇ?．１?Ｉｎｎｅｒ?Ｍｏｎｇｏｌｉａ?Ｃａｓｈｍｅｒｅ?Ｇｏａｔ?Ｓｋｉｎ?Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ?Ｃｅｌｌｓ??２．３．２细胞生长曲线??图２可见细胞生长曲线“Ｓ”型明显，１－４天为潜伏期，５－７天呈指数型生长，??第８天后达到平台期，说明细胞生长状态良好，可用于传达培养使用。??上皮细胞生长曲线??１．４?「－?－?－?－?－?；?－??—?—?？?－?．??１－２?ｊ?＊??０－８?Ｉ?／??ｇ?０．６?！?／??〇．４?丨■?ｒ??０２〇?！?＾?；＿??０?２?４?６?８??天数??图２内蒙古绒山羊皮肤上皮细胞生长曲线??Ｆｉｇ．２?Ｇｒｏｗｔｈ?Ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?Ｉｎｎｅｒ?Ｍｏｎｇｏｌｉａ?Ｃａｓｈｍｅｒｅ?Ｇｏａｔ?Ｓｋｉｎ?Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ?Ｃｅｌｌｓ??２．３．３细胞复苏??原代细胞大量增殖后，一部分用于试验，一部分冻存保留用于后续试验补充，??图３为冻存细胞复苏后状态，细胞复苏后因小部分细胞结构受损无法贴壁，剩余??细胞正常贴壁后继续増殖，复苏后贴壁２４小时后弃去就培养液和悬浮未贴壁细??胞，添加新培养液继续生长，待细胞生长密集后传代，传代１－２代后，细胞生长??状态回复正常细胞状态。??
图３复苏的内蒙古域山羊皮肤上皮细胞??Ｆｉｇ．３?Ｒｅｓｕｓｃｉｔａｔｅｄ?Ｉｎｎｅｒ?Ｍｏｎｇｏｌｉａ?Ｃａｓｈｍｅｒｅ?Ｇｏａｔ?Ｓｋｉｎ?Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ?Ｃｅｌｌｓ??
【参考文献】：
期刊论文
[1]过表达FGF10促进山羊皮下前体脂肪细胞分化[J]. 许晴,李倩,王永,朱江江,张亚楠,林亚秋. 畜牧兽医学报. 2019(10)
[2]Wnt10b与骨形态发生蛋白9诱导间充质干细胞成骨分化的关系[J]. 胡莹,廖云鹏,李福书,周娅,李沁,孙文娟,何百成. 中国药理学通报. 2019(10)
[3]脂质体和慢病毒介导P75神经生长因子受体及神经生长因子转染骨髓间充质干细胞的效果比较[J]. 朱伦井,贝朝涌,段江涛,彭称飞,马跃刚,王宁,陈俊毅. 中国组织工程研究. 2019(21)
[4]绒山羊非长绒期埋植褪黑激素对其产绒性能和血浆褪黑激素浓度的影响[J]. 刘影,张欢,段涛,武子元,李炎,张微. 中国农业大学学报. 2019(03)
[5]褪黑素对毛皮动物生产性能及皮肤毛囊相关基因表达影响研究进展[J]. 郭跃跃,宋兴超,王海军,邢秀梅,张宇飞,徐超,赵家平. 动物医学进展. 2018(11)
[6]Wnt10b在乾华肉用美利奴羊毛囊周期中的表达规律[J]. 程晓印,姜怀志. 中国兽医学报. 2018(07)
[7]山羊Wnt10b基因生物学特征及组织细胞表达模式分析[J]. 林森,林亚秋,朱江江,李倩,王永. 基因组学与应用生物学. 2017(10)
[8]Wnt10b对体外培养小鼠触须毛囊生长的作用研究[J]. 卿尚兰,徐诣芝,杨芳. 重庆医科大学学报. 2017(12)
[9]褪黑激素对内蒙古绒山羊初级毛囊体外培养影响的研究[J]. 张铁佳,王岩,王琳,吴静,史振丹,赵艳红. 中国农业大学学报. 2016(11)
[10]山羊FGF10基因的克隆及其表达分析[J]. 李倩,林亚秋,朱江江,林森,张小玉,王永. 农业生物技术学报. 2016(11)
博士论文
[1]绒山羊毛乳头细胞全转录组学分析及与毛母质细胞分子互作机制的研究[D]. 马森.西北农林科技大学 2019
[2]褪黑素和CNP对绵羊卵母细胞体外成熟的影响及过表达AANAT的研究[D]. 田秀芝.中国农业大学 2017
[3]山羊诱导性多能干细胞的研究[D]. 宋辉.南京农业大学 2013
[4]褪黑激素影响山羊绒生长的分子机理[D]. 丽春.内蒙古农业大学 2012
[5]Wnt10b在毛囊周期调控中的作用及机制研究[D]. 李玉红.第三军医大学 2011
[6]持续埋植褪黑素对绒山羊绒毛生长特性和相关基因影响的研究[D]. 常子丽.内蒙古农业大学 2010
[7]Wnt10b与毛囊发育启动中基板形成及其分布的关系[D]. 纪影畅.南方医科大学 2010
[8]褪黑激素受体基因在内蒙古绒山羊皮肤毛囊中的表达[D]. 赵艳红.内蒙古农业大学 2009
[9]山羊毛囊干细胞及组织工程皮肤构建研究[D]. 史明艳.西北农林科技大学 2006
硕士论文
[1]TNFRSF1A影响内蒙古绒山羊毛囊发育周期的研究[D]. 马丽娜.内蒙古农业大学 2019
[2]褪黑激素对绒山羊皮肤let-7家族及其靶基因表达的影响[D]. 王建蒙.内蒙古农业大学 2019
[3]腺病毒介导SpCas9对鸡AMH基因高效敲除系统的构建[D]. 梁传堉.西北农林科技大学 2019
[4]SPP1和HGF基因对阿尔巴斯绒山羊毛乳头细胞增殖调控作用的研究[D]. 王瑛敏.内蒙古大学 2019
[5]山羊ATF6干扰慢病毒载体构建及其对胎盘滋养层细胞凋亡的影响[D]. 付饶.西北农林科技大学 2018
[6]褪黑激素调节动物毛皮发育的作用及其机制[D]. 马文杰.山东农业大学 2018
[7]基于RNA-seq分析褪黑素对内蒙古绒山羊毛囊发育相关基因表达的影响[D]. 王岩.内蒙古农业大学 2017
[8]褪黑素刺激对内蒙古绒山羊毛囊干细胞增殖和分化的影响及机理研究[D]. 曹春花.内蒙古农业大学 2016
[9]利用RNA干扰技术研究RORα对褪黑激素促进绒毛生长相关基因表达的影响[D]. 张铁佳.内蒙古农业大学 2016
[10]山羊Grp78基因过表达和shRNA干扰慢病毒载体的构建及鉴定[D]. 张喆.西北农林科技大学 2015
本文编号：3608898
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