宁夏和青海羊源大肠杆菌的分离鉴定和耐药性及β-内酰胺类耐药基因的检测

发布时间：2022-02-04 23:20

　　大肠杆菌是一种人兽共患的条件性致病菌,在人或动物体内菌群失调或免疫力低下时,可引发机体感染大肠杆菌,造成大肠杆菌病。宁夏、青海两个地区是我国牛羊养殖业大省,对羊源大肠杆菌做耐药性及耐药基因的监测和流行病学调查研究,有助于了解大肠杆菌耐药性的流行及传播机制,为临床用药提供指导。通过麦康凯、伊红美蓝、生化鉴定及聚合酶链式反应（PCR）等方式分离、鉴定大肠杆菌;对320株大肠杆菌进行4种抗菌药物的MIC测定;使用纸片法药敏试验检测48株具有耐药表型的菌株对4种β-内酰胺类药物的耐药性;采用PCR方法检测β-内酰胺酶类耐药基因;选取耐药菌株做接合试验,初步探讨揭示大肠杆菌耐药基因的流行及传播机制,获得结果如下:（1）2018年4月-2018年12月期间采集宁夏、青海部分地区羊的组织、拭子和粪便,培养、分离、纯化大肠杆菌,通过分离、鉴定大肠杆菌320株,分离率达65.43%（320/489）,其中宁夏210株,青海110株;（2）MIC试验结果显示,对氨苄西林（AMP）、头孢他啶（CAZ）、庆大霉素（GEN）、壮观霉素（SPT）的耐药率分别为30.93%、4.37%、15.62%、9.68%;对... 

【文章来源】：西北农林科技大学陕西省211工程院校985工程院校教育部直属院校

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 大肠杆菌病原及耐药性研究进展
    1.1 大肠杆菌病原学
        1.1.1 形态特征
        1.1.2 抗原特征
        1.1.3 培养特征
        1.1.4 生化特征
    1.2 大肠杆菌致病性
    1.3 大肠杆菌的耐药现状与耐药机制
        1.3.1 大肠杆菌的耐药现状
        1.3.2 抗菌药物的作用机制
        1.3.3 大肠杆菌的耐药机制
    1.4 β-内酰胺类抗菌药物的研究现状
        1.4.1 大肠杆菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药现状
        1.4.2 大肠杆菌对β-内酰胺类抗菌药物的耐药机制
        1.4.3 产ESBLs和 AmpC酶动物源肠杆菌的流行情况
    1.5 研究的目的和意义
第二章 羊源大肠杆菌分离鉴定
    2.1 材料
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 主要仪器
        2.1.3 培养基和常用溶液配制
    2.2 方法
        2.2.1 样本采集
        2.2.2 大肠杆菌的分离纯化
        2.2.3 大肠杆菌的鉴定
            2.2.3.1 染色镜检
            2.2.3.2 生化鉴定
            2.2.3.3 16S rRNA PCR 鉴定
    2.3 结果
        2.3.1 分离情况
        2.3.2 菌落形态
        2.3.3 生化试验
        2.3.4 分子生物学鉴定
    2.4 讨论
    2.5 小结
第三章 大肠杆菌的耐药性及β-内酰胺类酶耐药基因检测
    3.1 材料
        3.1.1 试验材料
        3.1.2 主要仪器
        3.1.3 培养基和常用溶液配制
    3.2 试验方法
        3.2.1 菌液MIC测定
        3.2.2 纸片法药敏试验
        3.2.3 耐药基因的检测
    3.3 结果
        3.3.1 大肠杆菌的耐药情况
        3.3.2 纸片法药敏试验结果
        3.3.3 耐药基因的检测结果
    3.4 讨论
        3.4.1 大肠杆菌的耐药表型分析
        3.4.2 大肠杆菌的ESELs和 AmpC酶基因流行情况
    3.5 小结
第四章 大肠杆菌的耐药基因转移试验
    4.1 材料
        4.1.1 试验材料
            4.1.1.1 样品来源
            4.1.1.2 主要试剂和药品
        4.1.2 主要仪器
        4.1.3 培养基和常用溶液配制
    4.2 方法
        4.2.1 接合试验
        4.2.2 接合子的MIC测定
        4.2.3 接合子ESBLs和 AmpC基因的检测
    4.3 结果
        4.3.1 接合试验结果
        4.3.2 接合子的MIC测定
        4.3.3 接合子ESBLs和 AmpC基因的检测
    4.4 讨论
        4.4.1 接合子的MIC测定
        4.4.2 ESBLs和 AmpC基因的检测
    4.5 小结
第五章 结论
参考文献
致谢
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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硕士论文
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[4]肠出血性大肠杆菌O157:H7鞭毛蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备[D]. 吴超.扬州大学 2014
[5]鸡源性大肠杆菌耐药性检测及相关耐药基因的研究[D]. 张飞燕.河北农业大学 2013
[6]四川省动物源大肠杆菌质粒介导ESBLs和AmpC酶耐药基因的检测[D]. 钟钦卿.四川农业大学 2012
[7]猪源大肠杆菌和沙门氏菌耐药表型与基因型的研究[D]. 唐一鸣.浙江大学 2010
[8]鸭源大肠杆菌ESBLs的基因型检测[D]. 李凤娟.河南农业大学 2009



本文编号：3614130