蛋鸡感染H9N2 AIV后输卵管组织CaBP-D28k基因表达及蛋壳质量变化研究
发布时间：2022-02-08 12:34
H9N2亚型禽流感病毒在全世界范围内均有分布，感染蛋鸡可引起鸡群产蛋量和鸡蛋质量下降，尤其是产蛋高峰期鸡群，鸡群感染后产蛋量下降很快，出现沙壳蛋、软壳蛋和畸形蛋。蛋壳质量的下降直接导致蛋品质的下降。鸡蛋蛋壳质量变差会造成较高的蛋壳破损率，同时蛋壳上的细小裂纹增加了细菌污染的风险，破裂的蛋壳，造成了食品质量和安全性问题，让鸡蛋的生产及销售面临着巨大的风险。目前有关H9N2亚型禽流感病毒感染蛋鸡后蛋壳质量的变化规律还不清楚。蛋壳形成主要在输卵管子宫部，当卵通过输卵管子宫部时，壳体的各层依次组装形成蛋壳。钙结合相关基因CaBP-D28k的表达调节蛋壳中钙的沉积，与蛋壳矿化有密切关系，影响蛋壳质量的好坏。采用H9N2亚型禽流感病毒人工感染30周龄非免疫健康产蛋高峰期蛋鸡，在感染后第1、2、3、5、7天，收集感染鸡所产鸡蛋检测蛋壳质量。采用原子分光光度法检测蛋壳中钙的含量，采用电子扫描显微镜观察鸡蛋蛋壳内外表面及横断面超微结构。另外，每天定时解剖部分感染鸡，无菌采集输卵管。将采集的输卵管按伞部、膨大部、峡部、子宫部和阴道部5个不同部位分别处理，采用Trizol法提取其总RNA，经反转录成cDNA...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省211工程院校985工程院校教育部直属院校
【文章页数】：41 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
鸡输卵管的剖检结构
.3 蛋壳的组成与结构蛋壳是一种高度精密有序的矿化结构，组成蛋壳的元素同样复杂而有壳主要成分是碳酸钙等无机物，占到蛋壳重量的 94%~97%，剩余的有机是作用却不容忽视。无机物中 CaCO3（约 93%）、MgCO3（约 1%）、以（约 2.8%）（李治学等 2009）。另外蛋壳中还含有许多微量元素，各自，如硒、铁、锌、钼、锰、铜、铝等（胡成西 2006）。有机物中大部分般分为三类：一般性蛋白、蛋清蛋白和蛋壳形成特异性蛋白（冯庆玲 2禽蛋壳钙化过程只需 24 h 左右就能完成，这是目前已知的速度最快的度有序的结构(Solomon 1991; Parsons 1982)，蛋壳由五个不同的结构层外分别是内、外壳膜(the inner and outer shell membranes)，乳突层(mamm栏层(palisade layer)，垂直晶体层(vertical crystal layer)和角质层(cuticle)如一层矿化层为乳突层，包含了任意取向的方解石晶体，没有规则的铺在层为栅栏层，占据了大部分钙化层，其方解石晶体生长方向基本固定，直关系(Parsons 1982)，之后栅栏层变薄，在角质层下方成为一层垂直晶
从图 2-2 中可以发现蛋壳横断面超微结构放大 260 倍后，结构清晰，感染前后对比明显。a~f 图横断面的左侧为蛋壳外表面，右侧为蛋壳内表面的纤维层。感染之后的 5天，蛋壳厚度逐渐变薄，到了第 5 天（e 图），其厚度只有正常蛋壳的四分之一，这个蛋壳取自第五天所产的一枚软壳蛋。到了第七天，蛋壳厚度有所回升。综合观察蛋壳栅栏层和垂直晶体层，其致密度和平整性在感染后 5 天，越来越差，乳突层和纤维层越来越松散，乳突层变得越来越窄，乳突结构受到破坏。到了第七天，乳突层略有恢复，栅栏层和垂直晶体层增厚。图 2-2.蛋壳横截面电镜图Fig.2-2 SEM images of cross-section of chicken eggshell扫描电子显微镜的电压为 15 kV，蛋壳横断面放大倍数为 260 倍Voltage of SEM is 15 kV, magnified 260 multiples of cross-section of chicken eggshell14
【参考文献】：
期刊论文
[1]规模化肉鸡场H9N2亚型禽流感与传染性支气管炎流行病学调查[J]. 刘东,刘红祥,王群义,于静,刘丰波,张翔,孔宪好,杜元钊,谭金山. 中国家禽. 2014(06)
[2]扫描电镜法观察鸡蛋壳超微结构形貌[J]. 王绍清,曹红,曹宝森. 食品科学. 2013(13)
[3]鸡蛋壳有机成分与蛋壳质量关系的研究[J]. 章玲玲,李琦章,姜涛,章世元,苏一军. 畜牧兽医学报. 2013(02)
[4]H9N2亚型禽流感流行现状[J]. 孙泉云,陈琦,夏炉明. 动物医学进展. 2011(10)
[5]蛋壳的钙化过程及蛋壳腺的钙代谢调控[J]. 陈杰,章世元. 畜牧与兽医. 2010(11)
[6]京海黄鸡蛋壳质量性状间的相关性及钙调素基因对蛋壳质量遗传效应的研究[J]. 俞亚波,刘大林,魏岳,王金玉. 中国畜牧杂志. 2009(11)
[7]营养素对蛋壳质量的影响[J]. 陈玉艳,李东全. 现代畜牧兽医. 2009(04)
[8]原子吸收光谱法测定实验豚鼠心脏等组织中的金属元素[J]. 黄建华,李超英,亓新华,刘爱琴. 光谱实验室. 2008(05)
[9]蛋壳质量与元素组成、超微结构关系的研究[J]. 章世元,俞路,王雅倩,王志跃,周卫东,杨海明. 动物营养学报. 2008(04)
[10]鸡蛋壳内部组成、构造及其质量的基因调控技术[J]. 俞路,王雅倩,章世元,潘志乐. 动物营养学报. 2008(03)
博士论文
[1]不同源性禽流感病毒株的分离鉴定及其主要基因信息的研究[D]. 王伟利.吉林农业大学 2006
硕士论文
[1]孕酮对蛋鸡蛋壳钙化过程的影响[D]. 赵海璇.石河子大学 2013
[2]鸡输卵管中SA受体的分布及其感染H9N2 AIV后的病变观察[D]. 李成山.西北农林科技大学 2012
[3]蛋壳形成过程中超微结构及钙沉积相关基因表达的研究[D]. 姚秀娟.石河子大学 2010
[4]肌注CaBP-D28k真核表达载体对老龄蛋鸡钙代谢和蛋壳质量的调控效应研究[D]. 俞路.扬州大学 2009
[5]鸡钙代谢调节物质基因真核表达质粒应用效果的研究[D]. 李治学.扬州大学 2007
[6]D28k钙结合蛋白基因真核表达质粒的构建及其表达效果的研究[D]. 李燕舞.扬州大学 2004
本文编号：3615075
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省211工程院校985工程院校教育部直属院校
【文章页数】：41 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
鸡输卵管的剖检结构
.3 蛋壳的组成与结构蛋壳是一种高度精密有序的矿化结构，组成蛋壳的元素同样复杂而有壳主要成分是碳酸钙等无机物，占到蛋壳重量的 94%~97%，剩余的有机是作用却不容忽视。无机物中 CaCO3（约 93%）、MgCO3（约 1%）、以（约 2.8%）（李治学等 2009）。另外蛋壳中还含有许多微量元素，各自，如硒、铁、锌、钼、锰、铜、铝等（胡成西 2006）。有机物中大部分般分为三类：一般性蛋白、蛋清蛋白和蛋壳形成特异性蛋白（冯庆玲 2禽蛋壳钙化过程只需 24 h 左右就能完成，这是目前已知的速度最快的度有序的结构(Solomon 1991; Parsons 1982)，蛋壳由五个不同的结构层外分别是内、外壳膜(the inner and outer shell membranes)，乳突层(mamm栏层(palisade layer)，垂直晶体层(vertical crystal layer)和角质层(cuticle)如一层矿化层为乳突层，包含了任意取向的方解石晶体，没有规则的铺在层为栅栏层，占据了大部分钙化层，其方解石晶体生长方向基本固定，直关系(Parsons 1982)，之后栅栏层变薄，在角质层下方成为一层垂直晶
从图 2-2 中可以发现蛋壳横断面超微结构放大 260 倍后，结构清晰，感染前后对比明显。a~f 图横断面的左侧为蛋壳外表面，右侧为蛋壳内表面的纤维层。感染之后的 5天，蛋壳厚度逐渐变薄，到了第 5 天（e 图），其厚度只有正常蛋壳的四分之一，这个蛋壳取自第五天所产的一枚软壳蛋。到了第七天，蛋壳厚度有所回升。综合观察蛋壳栅栏层和垂直晶体层，其致密度和平整性在感染后 5 天，越来越差，乳突层和纤维层越来越松散，乳突层变得越来越窄，乳突结构受到破坏。到了第七天，乳突层略有恢复，栅栏层和垂直晶体层增厚。图 2-2.蛋壳横截面电镜图Fig.2-2 SEM images of cross-section of chicken eggshell扫描电子显微镜的电压为 15 kV，蛋壳横断面放大倍数为 260 倍Voltage of SEM is 15 kV, magnified 260 multiples of cross-section of chicken eggshell14
【参考文献】：
期刊论文
[1]规模化肉鸡场H9N2亚型禽流感与传染性支气管炎流行病学调查[J]. 刘东,刘红祥,王群义,于静,刘丰波,张翔,孔宪好,杜元钊,谭金山. 中国家禽. 2014(06)
[2]扫描电镜法观察鸡蛋壳超微结构形貌[J]. 王绍清,曹红,曹宝森. 食品科学. 2013(13)
[3]鸡蛋壳有机成分与蛋壳质量关系的研究[J]. 章玲玲,李琦章,姜涛,章世元,苏一军. 畜牧兽医学报. 2013(02)
[4]H9N2亚型禽流感流行现状[J]. 孙泉云,陈琦,夏炉明. 动物医学进展. 2011(10)
[5]蛋壳的钙化过程及蛋壳腺的钙代谢调控[J]. 陈杰,章世元. 畜牧与兽医. 2010(11)
[6]京海黄鸡蛋壳质量性状间的相关性及钙调素基因对蛋壳质量遗传效应的研究[J]. 俞亚波,刘大林,魏岳,王金玉. 中国畜牧杂志. 2009(11)
[7]营养素对蛋壳质量的影响[J]. 陈玉艳,李东全. 现代畜牧兽医. 2009(04)
[8]原子吸收光谱法测定实验豚鼠心脏等组织中的金属元素[J]. 黄建华,李超英,亓新华,刘爱琴. 光谱实验室. 2008(05)
[9]蛋壳质量与元素组成、超微结构关系的研究[J]. 章世元,俞路,王雅倩,王志跃,周卫东,杨海明. 动物营养学报. 2008(04)
[10]鸡蛋壳内部组成、构造及其质量的基因调控技术[J]. 俞路,王雅倩,章世元,潘志乐. 动物营养学报. 2008(03)
博士论文
[1]不同源性禽流感病毒株的分离鉴定及其主要基因信息的研究[D]. 王伟利.吉林农业大学 2006
硕士论文
[1]孕酮对蛋鸡蛋壳钙化过程的影响[D]. 赵海璇.石河子大学 2013
[2]鸡输卵管中SA受体的分布及其感染H9N2 AIV后的病变观察[D]. 李成山.西北农林科技大学 2012
[3]蛋壳形成过程中超微结构及钙沉积相关基因表达的研究[D]. 姚秀娟.石河子大学 2010
[4]肌注CaBP-D28k真核表达载体对老龄蛋鸡钙代谢和蛋壳质量的调控效应研究[D]. 俞路.扬州大学 2009
[5]鸡钙代谢调节物质基因真核表达质粒应用效果的研究[D]. 李治学.扬州大学 2007
[6]D28k钙结合蛋白基因真核表达质粒的构建及其表达效果的研究[D]. 李燕舞.扬州大学 2004
本文编号：3615075
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