绵羊肺炎支原体对人肺泡Ⅱ型上皮细胞活性及炎症反应的影响

发布时间：2022-02-08 22:25

　　为探究绵羊肺炎支原体（MO）是否对人体造成潜在影响,本研究以人肺泡Ⅱ型上皮细胞为细胞模型,将MO Y98株荧光染色后感染人肺泡Ⅱ型上皮细胞,于激光共聚焦显微镜下可见MO存在于细胞中;分别利用CCK-8及CellTiter-Lumi^TM试剂盒检测细胞的增殖及活力,结果显示MO对人肺泡Ⅱ型上皮细胞的增殖及活性均无显著影响;扫描电镜检测细胞形态,结果显示肺泡上皮细胞伪足明显增多;基因芯片分析筛选出3个mRNA及5个lncRNA,荧光定量PCR验证后确定SCNN1G、LOX、ST6GALNAC1及lncRNA RP11-29G8.3-001在MO感染后的转录水平发生显著变化;荧光定量PCR检测肺泡上皮细胞中IL-1β、TNF-α、IFN、IRF7等炎症因子,结果显示这些因子基因的转录水平无明显变化;采用将lncRNA RP11-29G8.3-001过表达的方法对其功能进行研究,结果显示少量lncRNA RP11-29G8.3-001表达增高不会调控细胞免疫相关基因的表达。本研究结果表明MO并不降低人肺泡Ⅱ型上皮细胞的增殖及活性,且MO对人肺泡Ⅱ型上皮细胞炎症因子的表达无显... 

【文章来源】：中国预防兽医学报. 2020,42(10)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

MO感染人肺泡II型上皮细胞模型的建立

为了观察MO感染人肺泡II型上皮细胞后的形态变化，本实验采用扫描电镜进行观察，结果显示：人肺泡II型上皮细胞在感染MO后会伸出很多伪足（图3），推测MO刺激细胞后伸出的伪足可能是MO进入细胞质基质的原因。2.4 MO感染人肺泡II型上皮细胞中相关基因表达及转录水平的检测

以往研究显示，肺炎支原体可以通过对宿主细胞的黏附、膜融合、营养剥夺、侵入、毒力因子等作用直接损伤宿主细胞[7]。但本实验通过CCK-8及细胞ATP水平检测等手段，发现MO感染人肺泡II型上皮细胞48 h后，感染组及对照组细胞数量及细胞活性并无明显改变，推测MO感染可能不会引起人肺泡II型上皮细胞增殖能力降低甚至死亡。利用DIO荧光染色的MO感染人肺泡II型上皮细胞，发现MO可以进入细胞质基质中，而且扫描电镜结果发现MO感染会促进人肺泡II型上皮细胞伸出伪足，推测MO可能利用胞饮进入细胞。而支原体和细胞膜成分相似，这可能也是MO进入细胞的一个途径。图5 lnc RNA RP11-29G8.3-001在人肺泡II型上皮细胞中的表达量变化

【参考文献】：
期刊论文
[1]重组甲型流感病毒基质蛋白1和2通过ERK信号因子诱导小鼠气管上皮细胞产生IFN-γ[J]. 祝洁,朱颜鑫,曹慧军,罗红,兰露莎,江滟.  病毒学报. 2018(05)
[2]高氧环境下ROS对肠上皮细胞表达TNF-α和HIF-1-α的影响[J]. 赵敏,唐诗邈,刘冬妍.  实用药物与临床. 2017(02)
[3]从湖羊肺脏中分离绵羊肺炎支原体的鉴定[J]. 李媛,陶岳,阿依吐拉·肉孜,高玉龙,尹训南,李新萍,张孝恩,王砚范,辛九庆.  中国预防兽医学报. 2006(04)



本文编号：3615864