禽白血病病毒gp37基因生物信息学分析及克隆表达

发布时间：2022-02-09 03:23

　　为建立新的禽白血病诊断方法,以临床分离得到的JL-2株禽白血病前病毒cDNA为模板,用PCR技术扩增gp37基因,测序后进行序列分析,并构建原核表达质粒pET-gp37,在大肠杆菌BL21（DE3）中经IPTG诱导表达,SDS-PAGE及Western blot鉴定并纯化。结果显示:gp37基因全长591 bp,编码197个氨基酸,分子量22 kDa,无信号肽,为疏水性蛋白;PCR及双酶切鉴定表明,重组原核表达质粒pET-gp37构建成功;经SDS-PAGE及Western blot鉴定,表达蛋白分子质量与理论值一致,均为22 kDa,并以可溶形式表达,纯化后纯度达98%以上。结论:成功表达和纯化了gp37蛋白,为预防禽白血病病毒的感染及建立新的禽白血病诊断方法提供了参考。 

【文章来源】：畜牧与兽医. 2020,52(10)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

pET-gp37 PCR及酶切鉴定

Western blot鉴定结果

将PCR扩增产物,经1%琼脂糖凝胶电泳检测,在约591 bp处有1条清晰的条带,与预期目的条带大小一致,如图1。将获得的gp37目的基因连接至pMD-18-T载体,构建成克隆载体质粒pMD-gp37,通过PCR及双酶切鉴定,结果如图2 所示,在约591 bp处均有目的片段条带。2.2 序列分析

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3616282