氟对小鼠睾丸免疫毒性的研究及精子双向电泳图谱的构建
发布时间：2022-02-14 18:52
[目的]本论文通过研究氟暴露下炎症和氧化应激对小鼠睾丸的影响及精子双向电泳图谱的构建,以期深入探究氟的生殖毒性机制,为进一步实施科学诊断和靶标药物设计提供理论依据。[方法]8周龄雄性昆明小鼠240只,随机分成4组,即对照组、低氟组、中氟组、高氟组,对照组供给去离子水,染氟组分别供给含25、50、100mg/LNaF的去离子水。每组60只。染氟期间动态观察小鼠的生长状况及生长性能。分别于45、90、180天后处死,取精子进行透射电子显微镜及双向电泳的研究；取180天小鼠睾丸组织进行组织病理学,QRT-PCR, ELISA以及一氧化氮（NO）含量的测定。[结果]1与对照组相比,180天氟化钠暴露组小鼠精子畸形率成上升趋势,中氟组和高氟组差异显著。相反,精子密度有所下降,且中氟组差异显著。各攻氟组体重和睾丸重无显著影响。2.睾丸HE染色后显微镜下观察发现,对照组小鼠睾丸的曲细精管结构正常,各级生精细胞完整,整齐排列,层次清晰。管腔内可见到大量的成熟精子。低氟组各级生精细胞受到不同程度的损伤,排列不规则；中氟组曲精细管和生精细胞肿胀,产生大量的空泡；高氟组大量精子细胞落入管腔,精子减少。3.应...
【文章来源】：山西农业大学山西省
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各组小鼠平均体重变化曲线
5睾丸组织形态学检测结果各组实验小鼠睾丸组织HE染色结果见图1-2。从图中可见：对照组小鼠睾丸曲细精管结构正常，各级生精细胞整齐排列，层次清晰。精原细胞和支持细胞靠近基膜，由基膜向管腔依次排列为不同发育时期的生精细胞：精原细胞、初级精母细胞、球形精子细胞和延长的精子细胞。管腔内可见到大量的成熟精子。低氟组各级生精细胞损伤，排列不规则；中氟组曲精细管和生精细胞肿胀，产生大量的空泡；高氟组精子细胞落入管腔，精子减少。?喊： -?‘ W 鄉？1 ^ ：：-化、鄉：f 參‘口'?/. ,' ‘ M：：'：. i h -?%. --^M'■魏⑶黑谬msftJNaF ‘广 二： lOOmg/LNaF > “：_尊麗■轉。J誠?》‘■'. , ‘’ ‘ 、\ ‘ ’ ’ ； * “ '*■" 、 . f .1第“；十‘‘ -- >.i ：，r ■ i 翻? : i图1-2各组小鼠睾丸HE染色结果Figure 1-2 Results of HE staining of testis in different groups2.6小鼠睾丸免疫毒性相关基因mRNA表达的影响2.6.1 RNA的完整性和纯度各实验组每组随机选取五个提取的RNA样品琼脂凝胶电泳。5S、18S、28S三条带清晰可见，28S比18SRNA条带亮度接近2: 1，各条带间无显著的拖尾说明RNA没降解也没受到DNA污染。用核酸蛋白浓度测定仪检测所有样品的浓度及纯度，结果显示A260/280的比值在正常范围之内
2.6.5小鼠睾丸免疫毒性相关基因旳定量分析结果与睾丸免疫毒性相关基因的定量结果如图1-3所示。总体来看，各组小鼠睾丸中IL-17、TNFa、IL-6、IL-1 P > IL-21和TGF-P的mRNA的表达量与对照组相比，有所升高。其中IL-17中氟组与对照组相比差异非常显著，高氟组呈极显著；TNFa高氟组呈非常显著；IL-6中氟组显著，高氟组极显著。15-1 0.8-1 1.&1C C C.2 ** .2 .9 嫩?0 ,,, ? (0 ***(0 *** cfl - _ <0① ~r 0) 0.6* -p 0)|L i rh M _■ i! 0.4- Fi . i! ■2-= 5- ■：兰 ■ J- _J. m養1
【参考文献】：
期刊论文
[1]IL-17的信号传导及功能研究[J]. 施沛青,朱书,钱友存. 中国细胞生物学学报. 2011(04)
[2]镉对小鼠精母细胞凋亡及附睾内精子质量的影响[J]. 李新红,翁芝莹,黎琴,陈振亮,徐韵. 应用生态学报. 2010(04)
[3]iNOS基因和VEGF基因在氟致甲状腺肿大鼠甲状腺组织中的表达[J]. 张维东,柴春彦,张勇,江鹏,刘国艳. 中国兽医科学. 2008(03)
[4]蛋白质组技术在脑胶质瘤研究中的应用进展[J]. 李飞,冯华. 中国神经肿瘤杂志. 2008(01)
[5]蛋白质组技术在脑胶质瘤研究中的应用进展[J]. 李飞,冯华. 中国神经肿瘤杂志. 2008 (01)
[6]慢性氟中毒对雄性大鼠睾丸损伤及牛磺酸锌保护作用的观察[J]. 陈树君,孙玉敏,孙秀义,李志红,李积胜. 环境与健康杂志. 2008(01)
[7]镉对小鼠精子和生精细胞超微结构及生精细胞bcl-2、bax基因表达的影响[J]. 金龙金,方周溪,楼哲丰,张婵,陈锡文. 细胞生物学杂志. 2006(03)
[8]不同氟水平对生长育肥猪毒性的研究[J]. 陶新,许梓荣,汪以真. 中国兽医学报. 2006(01)
[9]染氟大鼠生精细胞端粒酶逆转录酶表达的测定[J]. 江琴,程学敏,张慧珍,巴月,庄东刚,朱静媛,崔留欣. 郑州大学学报(医学版). 2005(04)
[10]高压电脉冲处理对小鼠精子超微结构及体外受精的影响[J]. 徐营,郭旭东,李霞,其木格,旭日干. 内蒙古大学学报(自然科学版). 2001(04)
硕士论文
[1]氟对小鼠精子趋化性的影响及其机制研究[D]. 陆兆静.山西农业大学 2013
本文编号：3625085
【文章来源】：山西农业大学山西省
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各组小鼠平均体重变化曲线
5睾丸组织形态学检测结果各组实验小鼠睾丸组织HE染色结果见图1-2。从图中可见：对照组小鼠睾丸曲细精管结构正常，各级生精细胞整齐排列，层次清晰。精原细胞和支持细胞靠近基膜，由基膜向管腔依次排列为不同发育时期的生精细胞：精原细胞、初级精母细胞、球形精子细胞和延长的精子细胞。管腔内可见到大量的成熟精子。低氟组各级生精细胞损伤，排列不规则；中氟组曲精细管和生精细胞肿胀，产生大量的空泡；高氟组精子细胞落入管腔，精子减少。?喊： -?‘ W 鄉？1 ^ ：：-化、鄉：f 參‘口'?/. ,' ‘ M：：'：. i h -?%. --^M'■魏⑶黑谬msftJNaF ‘广 二： lOOmg/LNaF > “：_尊麗■轉。J誠?》‘■'. , ‘’ ‘ 、\ ‘ ’ ’ ； * “ '*■" 、 . f .1第“；十‘‘ -- >.i ：，r ■ i 翻? : i图1-2各组小鼠睾丸HE染色结果Figure 1-2 Results of HE staining of testis in different groups2.6小鼠睾丸免疫毒性相关基因mRNA表达的影响2.6.1 RNA的完整性和纯度各实验组每组随机选取五个提取的RNA样品琼脂凝胶电泳。5S、18S、28S三条带清晰可见，28S比18SRNA条带亮度接近2: 1，各条带间无显著的拖尾说明RNA没降解也没受到DNA污染。用核酸蛋白浓度测定仪检测所有样品的浓度及纯度，结果显示A260/280的比值在正常范围之内
2.6.5小鼠睾丸免疫毒性相关基因旳定量分析结果与睾丸免疫毒性相关基因的定量结果如图1-3所示。总体来看，各组小鼠睾丸中IL-17、TNFa、IL-6、IL-1 P > IL-21和TGF-P的mRNA的表达量与对照组相比，有所升高。其中IL-17中氟组与对照组相比差异非常显著，高氟组呈极显著；TNFa高氟组呈非常显著；IL-6中氟组显著，高氟组极显著。15-1 0.8-1 1.&1C C C.2 ** .2 .9 嫩?0 ,,, ? (0 ***(0 *** cfl - _ <0① ~r 0) 0.6* -p 0)|L i rh M _■ i! 0.4- Fi . i! ■2-= 5- ■：兰 ■ J- _J. m養1
【参考文献】：
期刊论文
[1]IL-17的信号传导及功能研究[J]. 施沛青,朱书,钱友存. 中国细胞生物学学报. 2011(04)
[2]镉对小鼠精母细胞凋亡及附睾内精子质量的影响[J]. 李新红,翁芝莹,黎琴,陈振亮,徐韵. 应用生态学报. 2010(04)
[3]iNOS基因和VEGF基因在氟致甲状腺肿大鼠甲状腺组织中的表达[J]. 张维东,柴春彦,张勇,江鹏,刘国艳. 中国兽医科学. 2008(03)
[4]蛋白质组技术在脑胶质瘤研究中的应用进展[J]. 李飞,冯华. 中国神经肿瘤杂志. 2008(01)
[5]蛋白质组技术在脑胶质瘤研究中的应用进展[J]. 李飞,冯华. 中国神经肿瘤杂志. 2008 (01)
[6]慢性氟中毒对雄性大鼠睾丸损伤及牛磺酸锌保护作用的观察[J]. 陈树君,孙玉敏,孙秀义,李志红,李积胜. 环境与健康杂志. 2008(01)
[7]镉对小鼠精子和生精细胞超微结构及生精细胞bcl-2、bax基因表达的影响[J]. 金龙金,方周溪,楼哲丰,张婵,陈锡文. 细胞生物学杂志. 2006(03)
[8]不同氟水平对生长育肥猪毒性的研究[J]. 陶新,许梓荣,汪以真. 中国兽医学报. 2006(01)
[9]染氟大鼠生精细胞端粒酶逆转录酶表达的测定[J]. 江琴,程学敏,张慧珍,巴月,庄东刚,朱静媛,崔留欣. 郑州大学学报(医学版). 2005(04)
[10]高压电脉冲处理对小鼠精子超微结构及体外受精的影响[J]. 徐营,郭旭东,李霞,其木格,旭日干. 内蒙古大学学报(自然科学版). 2001(04)
硕士论文
[1]氟对小鼠精子趋化性的影响及其机制研究[D]. 陆兆静.山西农业大学 2013
本文编号：3625085
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3625085.html
