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Ⅱ型猪细环病毒及Ⅱ型猪圆环病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立

发布时间:2022-02-15 16:54
  为了在临床上能够同时、快速、准确的检测Ⅱ型猪细环病毒(TTSuV2)和Ⅱ型猪圆环病毒(PCV2),本试验根据GenBank上公布的TTSuV2和PCV2序列中的高度保守片段设计引物,并分别合成标记羧基荧光素试剂(FAM)和六氯荧光素(HEX)报告基团的探针,建立双重荧光定量PCR检测方法,并对该方法的灵敏度、稳定性和特异性进行评价。结果显示,建立的双重荧光定量PCR检测方法对TTSuV2和PCV2的最低检测浓度均为1×102拷贝/μL,与猪源的其他病毒性病原体无交叉反应。应用建立的检测方法对采集的300份病料样品进行检测。结果显示,PCV2单独感染率为36.0%,TTSuV2单独感染率为60.0%,2种病毒混合感染率为14.8%。表明本试验建立的双重荧光定量PCR检测方法比普通PCR更加敏感,可应用于临床检测TTSuV2和PCV2,并可分析TTSuV2和PCV2的载量与相关疾病的关系。 

【文章来源】:中国兽医杂志. 2020,56(04)北大核心

【文章页数】:5 页

【部分图文】:

Ⅱ型猪细环病毒及Ⅱ型猪圆环病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立


PCV2 与 TTSuV2重组质粒PCR结果

扩增曲线,荧光定量PCR,交叉反应,基因组


分别以PEDV、PRRSV、PRV、SFV、PCV1、TTSuV1基因组为模板,对双重荧光定量PCR进行特异性鉴定,结果如图2、3所示。结果表明,本试验所建立的双重荧光定量PCR对PCV2及TTSuV2有很好的特异性,与其他猪病毒无交叉反应。图3 TTSuV2的特异性扩增曲线

扩增曲线,荧光定量PCR,敏感性


TTSuV2的特异性扩增曲线

【参考文献】:
硕士论文
[1]猪细环病毒2型感染与猪断奶后多系统哀竭综合征的相关性分析[D]. 王园.北京农学院 2016



本文编号:3626986

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