FMDV 3A蛋白与ANXA1互作对Ⅰ型干扰素通路的调控

发布时间：2022-02-16 14:19

　　口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus,FMDV）属于单股正链RNA病毒,感染牛、猪和不同的偶蹄动物引起口蹄疫疾病（Foot-and-mouth disease,FMD）。天然免疫系统的模式识别受体可以识别病毒感染时产生的病原相关分子。细胞溶质里RIG-I样模式识别受体（RIG-I-like receptors,RLRs）家族中视黄酸诱导基因I（retinoic acid-inducible gene I,RIG-I）和黑色素瘤分化基因5（melanoma differentiation-associated gene-5,MDA5）可识别FMDV的RNA。模式识别受体识别的病毒RNA后通过一系列的信号传导,诱导Ⅰ型干扰素（typeⅠinterferons,IFNs）的表达。Ⅰ型干扰素通过激活JAK（Janus kinase）-STAT（signal transducer and activator of transcription）信号通路,诱导干扰素下游多种抗病毒物质的产生,其随后发生天然免疫抗病毒应答。本文构建MycANXA1-pCAGGs重组质粒,... 

【文章来源】：甘肃农业大学甘肃省

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Summary
第一章 文献综述
    1.1 天然免疫与病毒识别
        1.1.1 天然免疫概述
        1.1.2 Ⅰ型干扰素调控的抗病毒信号传导
        1.1.3 TLRs介导的信号转导
        1.1.4 RLRs介导的信号转导
    1.2 ANXA1的研究进展
    1.3 口蹄疫病毒与天然免疫
    1.4 本项目研究意义与思路
第二章 FMDV 3A蛋白与ANXA1互作及ANXA1抑制FMDV的复制
    2.1 材料
        2.1.1 细胞
        2.1.2 病毒
        2.1.3 抗体
        2.1.4 载体
        2.1.5 主要试剂
        2.1.6 主要仪器
    2.2 方法
        2.2.1 ANXA1引物设计
        2.2.2 猪源ANXA1基因扩增
        2.2.3 ANXA1重组质粒的构建与鉴定
        2.2.4 Myc-ANXA1-pCAGGs在HEK-293T细胞中的表达
        2.2.5 FMDV3A蛋白与ANXA1相互作用的检测
        2.2.6 FMDV3A蛋白与ANXA1在细胞内的定位
        2.2.7 RNA病毒感染对内源ANXA1的影响
        2.2.8 过表达ANXA1对FMDV的复制的影响
        2.2.9 SiRNA干扰ANXA1对FMDV复制的影响
        2.2.10 数据分析
    2.3 结果与分析
        2.3.1 Myc-ANXA1-pCAGGs重组质粒的构建
        2.3.2 Myc-ANXA1-pCAGGs在HEK-293T细胞中的表达
        2.3.3 FMDV 3A蛋白与ANXA1相互作用
        2.3.4 FMDV 3A蛋白与ANXA1的共定位
        2.3.5 RNA病毒感染对内源ANXA1的影响
        2.3.6 过表达ANXA1蛋白对FMDV复制的影响
        2.3.7 ANXA1下调对FMDV复制的影响
    2.4 讨论
第三章 ANXA1抑制FMDV复制的分子机制
    3.1 材料
        3.1.1 细胞与病毒
        3.1.2 抗体
        3.1.3 表达载体
        3.1.4 试剂和仪器
    3.2 方法
        3.2.1 过表达ANXA1对Ⅰ型干扰素表达的影响
        3.2.2 FMDV 3A蛋白对ANXA1调控SeV诱导Ⅰ型干扰素表达的影响
        3.2.3 ANXA1对RLRs介导的IFN-β表达的影响
        3.2.4 ANXA1对TBK1和IRF3磷酸化的影响
        3.2.5 ANXA1对干扰素刺激基因(ISGs)的影响
        3.2.6 数据分析
    3.3 结果与分析
        3.3.1 过表达ANXA1促进Ⅰ型干扰素的表达
        3.3.2 3 A蛋白抑制ANXA1调控SeV诱导Ⅰ型干扰素的表达
        3.3.3 ANXA1促进RLRs介导的IFN-β表达
        3.3.4 ANXA1促进RNA病毒介导的TBK1和IRF3的磷酸化
        3.3.5 ANXA1增加了Ⅰ型干扰素刺激基因(ISGs)mRNA水平
    3.4 讨论
全文结论
参考文献
致谢
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导师简介



本文编号：3628119