中国流行的十二种血清型蓝舌病病毒一步法RT-PCR定型方法的建立与应用

发布时间：2022-02-16 14:29

　　为建立针对我国流行的12种蓝舌病病毒（bluetongue virus,BTV）血清型的特异性RT-PCR检测方法,本研究根据我国流行BTV毒株Seg-2的高度保守区域,设计出12对BTV血清型特异性扩增引物,建立了RT-PCR方法,并对该RT-PCR方法的反应条件、引物特异性与灵敏性进行了优化与验证;以我国分离的162株BTV为检测对象,对其血清型进行鉴定并构建系统发生树。结果显示,建立的BTV血清型RT-PCR具有良好的特异性与灵敏度:设计的12对引物仅与对应血清型BTV核酸模板产生特异性PCR扩增,与其余血清型毒株之间无交叉扩增现象;对不同血清型BTV核酸的检测灵敏度在1.28×102copies（BTV-2）至9.62×102copies（BTV-1）之间。对我国分离的BTV毒株的RT-PCR血清型鉴定与测序结果显示,162株BTV分属12种血清型（BTV-1、-2、-3、-4、-5、-7、-9、-12、-15、-16、-21与-24）,根据Seg-2序列构建的系统发生树显示,我国流行BTV血清型毒株的Seg-2序列与对应血清型的BTV标准参考毒聚为一簇,分属9个基因群（A、B... 

【文章来源】：中国兽医科学. 2020,50(12)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【参考文献】：
期刊论文
[1]蓝舌病病毒和流行性出血病病毒双重荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 杨振兴,朱建波,李占鸿,李卓然,何于雯,谢佳芮,李华春,廖德芳,杨恒.  中国兽医科学. 2019(09)
[2]蓝舌病病毒血清9型毒株在我国的首次分离[J]. 李占鸿,王金萍,杨恒,廖德芳,宋建领,高林,何于雯,李华春.  畜牧兽医学报. 2019(02)



本文编号：3628133