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SS2、SS7、SS9表面结合多肽筛选及在鉴定分型抑菌方面的研究

发布时间:2022-02-19 01:01
  猪链球菌Streptococcus suis, SS)属于革兰氏阳性菌,是危害养猪行业的一个重要传染性病原菌。近年来,此病在我国造成的危害日益加大,不仅给养殖业造成重大损失,同时给公共卫生安全带来了严重威胁。目前,对于SS的预防与治疗主要是采用抗生素疗法,但由于长期滥用抗生素,导致耐药菌株出现的比例越来越大,同时对于该病的有效防控形势也越来越严峻。而要全面控制该病,前提需要对SS分离菌做出准确的鉴定。本试验以SS2、SS7、SS9为研究对象,应用噬菌体展示技术对其表面分子结合多肽(Surface molecule binding peptide, SMBP)进行研究,为SS分型鉴定新方法的研究提供平台,同时为开发防治SS病的新型药物提供理论基础。主要试验如下:试验一通过噬菌体展示技术对SS2、SS7口SS9三者共同的SMBP或两者(SS2和SS7、SS2和SS9、SS7和SS9)共同的SMBP进行筛选,经过两轮特异性的筛选后,共挑取144个噬菌体克隆进行ELISA方法验证,结果得到对应3种类型的共同SMBP的5个阳性噬菌体克隆,其中SS2与SS7共同SMBP和SS2与SS9共同SMBP... 

【文章来源】:湖南农业大学湖南省

【文章页数】:66 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1.1 猪链球菌分型鉴定方法的研究进展
        1.1.1 微生物学诊断
        1.1.2 清学诊断
        1.1.3 分子生物学方法
    1.2 噬菌体展示技术及其在细菌学的应用
        1.2.1 噬菌体展示技术介绍
        1.2.2 噬菌体展示肽库技术在病原细菌学中的应用
        1.2.3 研究目的与意义
第二章 噬菌体展示技术筛选SS2、SS7、SS9共同SMBP
    2.1 材料与方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 筛选结果
        2.2.2 ELISA初步验证阳性克隆
        2.2.3 琼脂糖凝胶电泳结果
        2.2.4 测序结果以及序列分析
    2.3 讨论
第三章 噬菌体展示技术筛选SS2、SS7、SS9特异SMBP
    3.1 材料与方法
        3.1.1 主要试剂和材料
        3.1.2 方法
    3.2 结果与分析
        3.2.1 筛选结果
        3.2.2 结合活性鉴定
        3.2.3 特异性检测
        3.2.4 多肽的生物信息学分析
    3.3 讨论
第四章 噬菌体展示技术筛选SS2抑菌多肽
    4.1 材料与方法
        4.1.1 主要试剂和材料
        4.1.2 方法
    4.2 结果与分析
        4.2.1 筛选结果
        4.2.2 抗生素筛选结果
        4.2.3 对SS2有抑菌作用的多肽筛选结果
        4.2.4 多肽的序列分析结果
        4.2.5 抑菌多肽与SS2结合力检测结果
    4.3 讨论
结论
参考文献
符号说明
致谢
个人简历
攻读硕士研究生期间发表的学术论文


【参考文献】:
期刊论文
[1]TetR家族调控链霉菌次级代谢的机制[J]. 韩晓伟,沈月毛.  微生物学通报. 2013(10)
[2]猪链球菌2型89K毒力岛研究进展[J]. 朱静,王长军.  微生物学通报. 2013(08)
[3]抗菌肽的抗菌机理及构效关系研究进展[J]. 尚田田,徐彦召,杭柏林,王青,赵志雨,胡建和.  黑龙江畜牧兽医. 2013(09)
[4]猪链球菌疫苗研究进展[J]. 杨卫军,张珍珍.  兽医导刊. 2013(01)
[5]猪链球菌2型分子生物学研究进展[J]. 刘玲玲,李文刚,张永涛,吕玉金,饶宝,程亚楼.  黑龙江畜牧兽医. 2012(05)
[6]猪2型链球菌病疫苗的研究进展[J]. 王斌,聂建,李旭廷.  今日养猪业. 2012(01)
[7]抗菌肽的研究现状及应用前景[J]. 潘秋冬,夏明.  农产品加工(学刊). 2011(02)
[8]猪链球菌分子生物学分型方法研究进展[J]. 林荣高,黎满香,蒋伟,陈滔.  动物医学进展. 2010(10)
[9]乳酸杆菌的研究进展[J]. 刘墨,王长文,周海柱,娄玉杰.  吉林医药学院学报. 2010(04)
[10]革兰阳性菌青霉素结合蛋白研究进展[J]. 朱竟赫,郭文洁,刘耀川,赵敬翠,庞杰,刘明春.  动物医学进展. 2010(01)

硕士论文
[1]猪链球菌主要毒力基因的多重PCR检测及其核糖体基因多态性研究[D]. 聂小想.山东农业大学 2008



本文编号:3631890

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