厚垣普可尼亚菌（Pochonia chlamydosporia）ARSEF3539生物学特性及发酵液研究

发布时间：2022-02-20 12:16

　　厚垣普可尼亚菌（Pochonia chlamvdosporia）是一种重要的线虫生防菌。该菌不仅可用于植物性线虫的防制,也可作用于动物寄生性线虫,具有很好的研究及应用前景。为了解该菌的生长特性和食线虫卵机理,本文对厚垣普可尼亚菌ARSEF3 5 3 9的形态学特性、对动物寄生性线虫与虫卵的作用及其发酵液的生化性质等方面进行了研究。结果如下:厚垣普可尼亚菌ARSEF3539在两种培养基（CMA、SDA）上菌落形态略有不同,生长速度也不尽相同:在23 ℃下培养15d时,CM A培养基上菌落半径约为2.4cm,SDA上则为3.Ocm;两种培养基上菌丝皆呈放射状生长,菌丝体致密,气生菌丝发达,分生孢子梗单个或轮生于菌丝,每个孢子梗有4～5分支,每个分支顶端分生孢子聚生,孢子透明,呈卵圆形或圆形。老的气生菌丝膨大处形成外壁厚、砖格状、多室的厚垣孢子。在厚垣普可尼亚菌ARSEF3539生长良好的CMA培养基表面分别加入秀丽新杆线虫和虫卵、马圆线虫幼虫和卵及猪蛔虫卵。一周后观察,发现该菌对秀丽新杆线虫卵与马圆线虫卵侵染率较低,约为2%;对猪蛔虫卵在发生侵染的同时,又可破坏其卵壳结构,其侵染率为29.... 

【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
研究项目资助说明
摘要
Abstract
缩略词表
引言
    1 家畜线虫病概述
    2 家畜线虫病的防控
    3 普可尼亚菌
        3.1 普可尼亚菌的分类
        3.2 厚垣普可尼亚菌的形态学特征
        3.3 厚垣普可尼亚菌的生物学特性
        3.4 厚垣普可尼亚菌的生防应用
    4 普可尼亚菌发酵工艺的现状
    5 MTT染色法的应用
    6 研究的目的及意义
实验一 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539的形态学及杀家畜寄生性线虫研究
    1 材料与方法
        1.1 材料
            1.1.1 仪器与设备
            1.1.2 药品与试剂
            1.1.3 菌种
            1.1.4 虫种
            1.1.5 主要溶液
            1.1.6 培养基
        1.2 方法
            1.2.1 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539生长特性的观测
            1.2.2 秀丽新杆线虫培养与虫卵及虫体的收集
            1.2.3 马圆线虫的培养及虫卵与虫体的收集
            1.2.4 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539对线虫卵及幼虫的作用研究
    2 结果
        2.1 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539的培养性状
        2.2 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539生长速度的测定结果
        2.3 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539的产孢情况
        2.4 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539对家畜寄生性线虫虫卵的作用结果
        2.5 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539对家畜寄生性线虫幼虫的作用
    3 讨论与小结
        3.1 讨论
        3.2 小结
实验二 利用MTT法检测线虫活力的研究
    1 材料与方法
        1.1 材料
            1.1.1 仪器与设备
            1.1.2 药品与试剂
            1.1.3 虫种
            1.1.4 主要溶液
            1.1.5 培养基
        1.2 方法
            1.2.1 秀丽新杆线虫的培养与收集
            1.2.2 MTT比色法检测波长的确定
            1.2.3 MTT的用量
            1.2.4 DMSO的用量
            1.2.5 药物的作用时间
    2 结果
        2.1 最佳检测波长的测定结果
        2.2 MTT浓度的测定结果
        2.3 DMSO体积的测定结果
        2.4 药物作用时间的测定结果
    3 讨论与小结
        3.1 讨论
        3.2 小结
实验三 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539胞外蛋白酶的诱导及发酵液生化性质研究
    1 材料与方法
        1.1 材料
            1.1.1 仪器与设备
            1.1.2 药品与试剂
            1.1.3 菌种及虫种
            1.1.4 主要溶液
            1.1.5 培养基
        1.2 方法
            1.2.1 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539发酵液的制备
            1.2.2 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539发酵液的收集
            1.2.3 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539发酵液SDS-PAGE分析
            1.2.4 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539发酵液中蛋白质含量的的测定
            1.2.5 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539发酵液蛋白酶活性的测定
            1.2.6 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539发酵液磷酸酶活性的测定
            1.2.7 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539发酵液杀线虫毒性试验
        1.3 数据统计与分析
    2 结果
        2.1 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539发酵液的SDS-PAGE分析结果
        2.2 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539发酵液蛋白质含量的测定结果
        2.3 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539发酵液蛋白酶活性的测定结果
        2.4 厚垣普可尼亚菌RRSEF3539发酵液磷酸酶活性测定结果
        2.5 厚垣普可尼亚菌ARSEF3539发酵液杀线虫毒性的试验结果
    3 讨论与小结
        3.1 讨论
        3.2 小结
结论
致谢
参考文献
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]捕食性真菌Duddingtonia flagrans胞外蛋白质的生化性质研究[J]. 王瑞,孙晓燕,马亚囡,杨晓野,杨莲茹,赵晓慧,李军燕,牛广胜,张磊.  中国兽医科学. 2015(08)
[2]捕食性真菌Duddingtonia flagrans原生质体的快速制备与再生[J]. 李军燕,杨晓野,王瑞,杨莲茹,张伟,罗晓平,范永生.  中国兽医学报. 2014(07)
[3]MTT法测定大肠杆菌活菌数实验研究[J]. 汪志荣,高琼,马传鑫,李燕妮.  环境科学学报. 2011(12)
[4]食线虫真菌资源研究概况[J]. 张颖,李国红,张克勤.  菌物学报. 2011(06)
[5]新鲜鹿粪便中捕食线虫真菌的分离和鉴定[J]. 杨琳,杨晓燕,李云霞,苏鸿雁.  大理学院学报. 2010(10)
[6]萨克拉普奇尼亚菌串孢变种对南方根结线虫卵和雌虫的致病性[J]. 周艳,兰木佐,张成敏,武侠.  青岛农业大学学报(自然科学版). 2010(01)
[7]厚垣普奇尼亚菌Pochonia chlamydosporia产生的几丁质酶对南方根结线虫卵孵化的影响[J]. 张成敏,武侠,才秀华.  中国农业科学. 2009(10)
[8]MTT法测定乳酸菌活菌数的研究[J]. 黄立坤,杜鹏,霍贵成.  食品工业. 2008(03)
[9]动物线虫抗药机制研究进展[J]. 姜波,杨光友,邓家波.  安徽农业科学. 2007(29)
[10]MTT-四氯化碳萃取吸光光度法测定活菌数[J]. 任娇蓉,李璐,郜洪文,徐亚同.  环境科学与技术. 2007(02)

博士论文
[1]针对小菜蛾的球孢白僵菌孢子可湿性粉剂研制的技术探索[D]. 田丽.浙江大学 2005

硕士论文
[1]厚垣孢普可尼亚菌PC152菌株生物学及制剂工艺研究[D]. 石妍.福建农林大学 2011



本文编号：3635027