少孢节丛孢菌侵染性胞外丝氨酸蛋白酶的基因克

发布时间：2022-02-20 10:27

　　家畜消化道线虫病是一类严重危害动物养殖业持续健康发展的寄生虫疾病，每年给我国畜牧业造成巨大的经济损失。目前，对家畜消化道线虫病的防治主要依靠化学驱虫药物，但长期使用易使虫体产生抗药性，降低药效；同时，动物性食品中的药物残留不但影响人类的身体健康还会对生态环境造成污染。为了克服化学药物防控带来的弊端，国内外相继开展了家畜线虫病生物防控研究，通过线虫的天敌—捕食线虫性真菌及其侵染线虫过程中分泌的毒力因子（胞外蛋白酶）来控制线虫病已经显示出巨大的应用潜力，被认为是一种人-动物-环境友好型线虫病生物防控方法。因此，分离捕食线虫性真菌、研究其侵染线虫的胞外蛋白酶对于家畜消化道线虫病的科学防控具有重要意义。本研究以具有强捕食线虫活性的少孢节丛孢菌新疆分离株XJ-XAo1为研究对象，克隆了其侵染性丝氨酸蛋白酶XAoz1、P12和P186的基因，进行了生物信息学分析；将丝氨酸蛋白酶XAoz1基因克隆入酵母表达载体中，在毕赤酵母系统诱导表达，对表达的重组蛋白酶开展了杀线虫活性分析。该研究揭示了少孢节丛孢菌XJ-XAo1株在侵染线虫过程中分泌的毒力因子XAoz1的基因结构特征，分析了重组蛋白酶reXAoz... 

【文章来源】：石河子大学新疆维吾尔自治区211工程院校

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
英文缩略词表
前言
第一篇 文献综述
    1 捕食线虫性真菌的捕食器官
    2 捕食线虫性真菌对寄生线虫的作用
    3 捕食线虫性真菌侵染性胞外蛋白酶
    4 展望
第二篇 实验研究
    实验一 少孢节丛孢菌胞外丝氨酸类蛋白酶的基因克隆及序列分析
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 结果
            2.1 少孢节丛孢菌新疆分离株XJ-XAo1的形态特征
            2.2 丝氨酸类蛋白酶基因的PCR扩增结果
            2.3 丝氨酸类蛋白酶基因的生物信息学分析
            2.4 XAoz1丝氨酸蛋白酶的二/三级结构预测
            2.5 丝氨酸类蛋白酶基因的同源性及遗传进化分析
        3 讨论
    实验二 少孢节丛孢菌胞外丝氨酸蛋白酶XAoz1在毕赤酵母系统的表达
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 结果
            2.1 XAoz1成熟肽编码基因的PCR扩增结果
            2.2 重组表达载体的鉴定
            2.3 重组毕赤酵母的鉴定
            2.4 重组蛋白酶表达的鉴定
        3 讨论
    实验三 重组丝氨酸蛋白酶的纯化及杀线虫活性研究
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 结果
            2.1 纯化重组蛋白酶的特性
            2.2 重组丝氨酸蛋白酶的杀线虫活性研究
        3 讨论
全文总结
参考文献
附录
致谢
作者简介
导师评阅表


【参考文献】：
期刊论文
[1]食线虫真菌资源研究概况[J]. 张颖,李国红,张克勤.  菌物学报. 2011(06)
[2]少孢节丛孢菌的分离鉴定及捕食线虫活性研究[J]. 孟庆玲,王为升,王俊伟,才学鹏,罗建勋,陈创夫,乔军.  中国预防兽医学报. 2011(03)
[3]用嗜线虫真菌防治家畜胃肠道线虫病的研究进展[J]. 王琳.  中国兽药杂志. 2006(03)
[4]口服少孢节丛孢菌孢子对家畜粪便中线虫幼虫的杀灭研究[J]. 杨晓野,吴彩艳,杨莲茹,刘珍莲.  畜牧兽医学报. 2005(09)
[5]捕食线虫性真菌——少孢节丛孢菌体外杀寄生性线虫幼虫的研究[J]. 杨晓野,杨莲茹,刘珍莲,王燕,汪明,刘军.  畜牧兽医学报. 2004(03)
[6]捕食线虫性真菌的分离培养及分布规律[J]. 杨晓野,杨莲茹,刘珍莲,董世娟,考桂兰.  中国兽医学报. 2003(04)
[7]食线虫菌物胞外蛋白酶基因工程研究进展[J]. 赵明莲,廖昌珑,莫明和,张克勤.  中国生物工程杂志. 2002(05)
[8]云南省捕食线虫真菌资源调查[J]. 毕廷菊,张克勤,李文鹏.  云南大学学报(自然科学版). 2000(01)
[9]中国的捕食线虫真菌——Ⅴ.节丛孢属[J]. 张克勤,周薇,何世川,黄大飞.  真菌学报. 1994(02)
[10]捕食线虫真菌在我国的分布[J]. 刘杏忠,裘维蕃,缪作清.  真菌学报. 1993(03)

博士论文
[1]食线虫真菌侵染性胞外蛋白酶的基因克隆与表达[D]. 赵明莲.云南大学 2003



本文编号：3634854