猪伪狂犬病毒YZ株的分离鉴定及遗传进化分析

发布时间：2022-02-20 18:08

　　为了解猪伪狂犬病毒（PRV）流行变异株的病原学特性及分子遗传变异特点,从江苏扬州市某发病猪场采集病料,经无菌处理后接种BHK-21细胞并连续传代,分离获得1株病毒。通过细胞病变观察、PCR鉴定、电镜观察和动物感染试验,证明该毒株为伪狂犬病毒,将其命名为YZ株。利用PCR扩增、测序,获得YZ株的gB与gE基因序列,基因同源性分析与遗传进化分析表明:YZ株gB与gE基因与我国猪伪狂犬变异毒株同源性均在99.2%以上,且位于同一进化分支,提示该毒株与流行于我国的猪伪狂犬变异毒株亲缘关系较近。进一步研究YZ株的致病性,将该毒株P5代细胞培养液人工感染60日龄PRV阴性健康猪。结果表明:试验猪在感染病毒后出现发热、呕吐、腹泻、咳嗽、呼吸困难和神经症状,发病率达100%。感染猪剖检病变为脑组织水肿出血、肝脏组织表面出现灰白色坏死灶。综上, PRV-YZ株遗传进化分析与致病性研究表明该毒株为猪伪狂犬变异毒株。这一研究可为江苏省PRV的流行病学、遗传进化分析以及免疫防控提供参考。 

【文章来源】：扬州大学学报(农业与生命科学版). 2020,41(05)北大核心

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 病料、细胞及试验动物
    1.2 试剂
    1.3 方法
        1.3.1 病毒分离鉴定
            1) 病料处理:
            2) 病毒分离纯化:
        1.3.2 病毒鉴定
            1) PCR鉴定:
            2) 病毒粒子透射电镜(TEM)观察:
        1.3.3 动物感染试验
            1) 小鼠与家兔接种试验:
            2) 60日龄仔猪接种试验与病理学观察:
        1.3.4 基因进化分析
            1) gE与gB基因的PCR扩增、克隆与基因测序:
            2) 基因遗传进化树分析:
2 结果与分析
    2.1 病毒分离结果
    2.2 动物感染试验结果
    2.3 基因进化分析结果
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]2012年—2013年我国集约化猪场猪伪狂犬病病毒感染情况的调查[J]. 张显浩,陈瑞爱,李冰,蔡佳跃,裴仉福,刘好朋,贺东生.  动物医学进展. 2015(03)
[2]伪狂犬病毒流行毒株的抗原性和血清中和特性分析[J]. 杨文萍,顾真庆,孙海凤,董静,侯成才,白娟,姜平.  畜牧与兽医. 2014(10)
[3]免疫后发病仔猪中伪狂犬病毒的分离和鉴定[J]. 童武,张青占,郑浩,刘飞,姜一峰,单同领,周艳君,童光志.  中国动物传染病学报. 2013(03)
[4]猪伪狂犬病病毒鲁A株的分离鉴定[J]. 范伟兴,胡敬东,吴加强,袁秀芳,张志,刘文强,陈溥言,赵宏坤.  中国兽医学报. 2003(06)
[5]猪伪狂犬病病毒鄂A株的分离鉴定[J]. 陈焕春,方六荣,何启盖,金梅林,索绪峰,吴美洲.  畜牧兽医学报. 1998(02)

博士论文
[1]猪源多杀性巴氏杆菌的分子流行病学与致病性研究[D]. 汤细彪.华中农业大学 2010

硕士论文
[1]2005年、2006年江苏地区猪高热病病例中PCV2、PPV、PRV、PRRSV和CSFV感染的多重PCR检测及PRRSV分离株部分基因序列分析[D]. 叶俊平.扬州大学 2007



本文编号：3635563