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致病性维氏气单胞菌多重PCR检测方法的建立及初步应用

发布时间:2022-02-20 22:01
  维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)为气单胞菌属中近年来发现的新种。对人有一定的致病性,同时对感染水生动物并引发疾病的报道也逐渐增多,因此,A.veronii是一种人-兽-鱼共患病原菌,应当受到水产界与医学界的重视。而目前,国内有A. veronii的研究尚处于起步阶段,而有关检测方法更鲜有报道。因此,本研究以框镜鲤致病性A.veronii CY0806和A.v国际标准株ATCC35624等为实验材料,利用PCR技术对A. veronii16S rRNA基因、气溶素(Aer)基因、细胞毒性肠毒素(act)基因和核酸酶(exu)基因同时扩增,从而建立高效、快捷的A.veronii检测方法。参照GenBank收录的维氏气单胞菌16SrRNA基因、气溶素(Aer)基因、细胞毒性肠毒素(act)基因、核酸酶(exu)基因的序列,设计合成4对特异性引物,以A. veronii国际标准株ATCC35624DNA为模板,分别进行单一PCR,并优化退火温度,将优化的PCR产物经回收、连接、转化,并测序,测序结果提呈NCBI进行BLAST分析,结果显示所得的片段序列与维氏气单胞菌同源性在1... 

【文章来源】:吉林农业大学吉林省

【文章页数】:49 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
前言
第一篇 文献综述
    第一章 维氏气单胞菌的病原
        1.1 维氏气单胞菌的病原
        1.2 维氏气单胞菌的研究现状
    第二章 维氏气单胞菌的毒力因子及研究进展
        2.1 维氏气单胞菌的毒力因子
        2.2 维氏气单胞菌的流行病学
        2.3 维氏气单胞菌的疫苗研究
        2.4 维氏气单胞菌检测方法的研究进展
        2.5 多重PCR反应的原理及特点
        2.6 本研究的目的与意义
第二篇 研究内容
    第一章 维氏气单胞菌相关毒力基因的克隆与序列分析
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 结果
        1.4 讨论
        1.5 小结
    第二章 维氏气单胞菌多重PCR检测方法的建立
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 结果
        2.4 讨论
        2.5 小结
    第三章 维氏气单胞菌多重PCR技术的应用
        3.1 材料
        3.2 方法
        3.3 结果
        3.4 讨论
        3.5 小结
结论
参考文献
作者简介
致谢



本文编号:3635889

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