牛结核外周血IFN-γ体外释放试验刺激原的筛选与鉴定

发布时间：2022-02-23 03:03

　　牛结核病（Bovine tuberculosis, bTB）是由牛分枝杆菌（Mycobacterium bovis, M. bovis）等感染引起的一种人兽共患慢性消耗性传染病,该病被世界动物卫生组织（OIE）列入需通报的动物疫病之一。M. bovis拥有广泛的宿主,而牛是最敏感的宿主之一,它不仅能在动物之间传播,还能从动物传染给人,牛结核病的流行直接影响了畜牧业的生产力及人类的生命健康。因此,简单、快速、准确的牛结核诊断方法对于该病的防控具有重要的意义。IFN-y试验是一种体外T细胞免疫检测试验。传统用于IFN-y试验的刺激原是结核菌素纯蛋白衍生物（PPD）,由于PPD成分复杂,包含很多广泛分布的分枝杆菌抗原,使诊断易存在假阳性的结果。由于PPD在生产过程中存在定性定量的困难,难以保证批次间的稳定性,所以使用PPD作为刺激原的IFN-y试验其特异性及稳定性有待进一步提高。结核分枝杆菌、牛分枝杆菌等致病性分枝杆菌特异性抗原蛋白,如ESAT6、CFP10和TB7.7（也称Rv2654c）等成分明确、制备简单、且易于质控,将其用于IFN-y检测时可以提高检测的特异性及重复实验的稳定性。本研... 

【文章来源】：扬州大学江苏省

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
符号说明
第一章 综述
    1 牛结核病概述
        1.1 牛结核病病原
        1.2 流行病学
        1.3 对人类健康的威胁
    2 牛结核诊断的研究进展
        2.1 细菌学检查
        2.2 分子生物学诊断
        2.3 免疫学方法
    3 诊断抗原研究进展
        3.1 RD区抗原
        3.2 其他抗原
    参考文献
第二章 结核分枝杆菌CFP10-ESAT6-TB7.7的融合表达、纯化和鉴定
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 结果
        2.1 目的基因扩增和重组质粒的鉴定
        2.2 融合蛋白的SDS-PAGE分析
        2.3 融合蛋白的Western blot分析
        2.4 夹心ELISA检测特异性IFN-γ和IL-4细胞因子
        2.5 淋巴细胞增殖实验
        2.6 间接ELISA检测免疫小鼠血清中特异性抗体水平
    3 讨论
    参考文献
第三章 牛结核外周血IFN-γ体外释放试验刺激原的筛选
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 结果
    3 讨论
    参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢



本文编号：3640738