梅花鹿感染犬新孢子虫双抗夹心Dot-ELISA检测方法的建立及应用
发布时间：2022-04-26 20:52
犬新孢子虫（Neospora caninum, N. caninum）于1984年在欧洲被首次发现，为细胞内寄生虫。新孢子虫的终末宿主为犬，中间宿主为奶牛、绵羊、山羊、牛、马、鹿等动物；虫体的寄生部位是宿主的中枢神经系统、肌肉、肝、脑及其他内脏组织；临床上可引起奶牛等孕畜流产及新生幼畜神经系统疾病等，给畜牧业造成严重的经济损失。然而目前尚无效果显著的药物来治疗该病，所以灵敏特异的临床诊断方法成为了防治该病的重点。据报道新孢子虫可感染特种经济动物—鹿，对鹿的健康和相关产品造成影响，目前没有针对鹿感染犬新孢子虫的诊断方法。因此，本研究利用新孢子虫MIC6蛋白制备单克隆抗体，建立检测梅花鹿感染犬新孢子虫的双抗夹心Dot-ELISA诊断方法；从而为深入研究梅花鹿感染犬新孢子虫防治奠定基础。1、新孢子虫MIC6单克隆抗体的制备：本研究的免疫抗原为新孢子虫的pGEX-MIC6重组蛋白，利用该抗原对BALB/c小鼠进行免疫，取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合，经克隆筛选获得两株杂交瘤细胞株，分别命名为1A1和1H11，染色体数目分别为90条和94条，经亚类鉴定1A1为IgG1，1H11为IgG2b。先后...
【文章页数】：86 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
英文缩写词表
引言
第一篇 文献综述
第1章 新孢子虫病研究进展
1.1 分类地位
1.2 生活史
1.3 新孢子虫病的传播
1.4 临床症状及病理变化
1.5 新孢子虫病的诊断
1.6 新孢子虫病的流行病学
1.7 新孢子虫病的防治
第2章 几种主要原虫诊断抗原及相关检测方法的研究进展
2.1. 虫体相关抗原
2.2. 分泌类抗原
2.3. 重组多表位抗原
第二篇 研究内容
第1章 新孢子虫MIC6单克隆抗体的制备及纯化
1.1 材料与方法
1.2 结果
1.3 讨论
1.4 小结
第2章 新孢子虫MIC6蛋白抗原定位
2.1 材料与方法
2.2 结果
2.3 讨论
2.4 小结
第3章 梅花鹿人工感染犬新孢子虫的试验
3.1 材料与方法
3.2 结果
3.3 讨论
3.4 小结
第4章 梅花鹿感染犬新孢子虫双抗夹心DoT-ELISA检测方法的建立及应用
4.1 材料与方法
4.2 结果
4.3 讨论
4.4 小结
结论
参考文献
导师简介
作者简介
学术论文发表情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]蓝氏贾第鞭毛虫诊断[J]. 高正琴,贺争鸣,岳秉飞. 中国比较医学杂志. 2015(01)
[2]弓形虫感染免疫诊断抗原研究进展[J]. 卢致民,张进顺. 中国血吸虫病防治杂志. 2011(05)
[3]β-酪蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 宋芳,周玉,卢士英,任洪林,李岩松,柳增善,刘文迪,郝亚明. 中国实验诊断学. 2011(08)
[4]新孢子虫病检测方法研究进展[J]. 徐晓芳,邢沈阳,李建华,张西臣. 中国病原生物学杂志. 2011(04)
[5]新孢子虫侵入宿主细胞的研究进展[J]. 武晓燕,黄晓红. 生命科学. 2010(09)
[6]PCR诊断牛新孢子虫病的初步应用[J]. 王春仁,翟延庆,赵兴存,谭秋菊,陈佳,陈爱华,王宇. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2009(02)
[7]表达弓形虫棒状体蛋白1的重组乳酸乳球菌诱导小鼠免疫应答的研究[J]. 杨秋林,许丽芳,陆惠民. 中国血吸虫病防治杂志. 2009(02)
[8]Balb/c小鼠新孢子虫病动物模型的建立及在其体内发育过程的研究[J]. 邓冲,张维,刘群,刘晶,丁隽. 中国农业科学. 2009(03)
[9]新孢子虫病研究进展[J]. 王常汉,巴音查汗,王振宝. 草食家畜. 2008(02)
[10]弓形虫主要表面抗原的研究进展[J]. 苑文英,季文琦,吴素焕. 河北职工医学院学报. 2008(01)
博士论文
[1]犬新孢子虫宿主细胞结合蛋白筛选及其免疫原性分析[D]. 吕强.吉林大学 2013
[2]弓形虫表面抗原SAG3单克隆抗体的制备及应用研究[D]. 马亮.吉林大学 2012
硕士论文
[1]新孢子虫P40和MIC6基因的免疫保护作用研究[D]. 杨滨僮.吉林农业大学 2014
[2]长春地区新孢子虫病流行病学调查[D]. 杜玲.吉林大学 2014
[3]β-酪蛋白单克隆抗体的制备及两种ELISA检测方法的建立[D]. 宋芳.吉林大学 2013
[4]新孢子虫ELISA检测方法建立及初步应用[D]. 李赫.吉林大学 2012
[5]双抗体夹心ELISA法检测弓形虫循环抗原的方法建立[D]. 王海礁.吉林大学 2011
本文编号：3648714
【文章页数】：86 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
英文缩写词表
引言
第一篇 文献综述
第1章 新孢子虫病研究进展
1.1 分类地位
1.2 生活史
1.3 新孢子虫病的传播
1.4 临床症状及病理变化
1.5 新孢子虫病的诊断
1.6 新孢子虫病的流行病学
1.7 新孢子虫病的防治
第2章 几种主要原虫诊断抗原及相关检测方法的研究进展
2.1. 虫体相关抗原
2.2. 分泌类抗原
2.3. 重组多表位抗原
第二篇 研究内容
第1章 新孢子虫MIC6单克隆抗体的制备及纯化
1.1 材料与方法
1.2 结果
1.3 讨论
1.4 小结
第2章 新孢子虫MIC6蛋白抗原定位
2.1 材料与方法
2.2 结果
2.3 讨论
2.4 小结
第3章 梅花鹿人工感染犬新孢子虫的试验
3.1 材料与方法
3.2 结果
3.3 讨论
3.4 小结
第4章 梅花鹿感染犬新孢子虫双抗夹心DoT-ELISA检测方法的建立及应用
4.1 材料与方法
4.2 结果
4.3 讨论
4.4 小结
结论
参考文献
导师简介
作者简介
学术论文发表情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]蓝氏贾第鞭毛虫诊断[J]. 高正琴,贺争鸣,岳秉飞. 中国比较医学杂志. 2015(01)
[2]弓形虫感染免疫诊断抗原研究进展[J]. 卢致民,张进顺. 中国血吸虫病防治杂志. 2011(05)
[3]β-酪蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 宋芳,周玉,卢士英,任洪林,李岩松,柳增善,刘文迪,郝亚明. 中国实验诊断学. 2011(08)
[4]新孢子虫病检测方法研究进展[J]. 徐晓芳,邢沈阳,李建华,张西臣. 中国病原生物学杂志. 2011(04)
[5]新孢子虫侵入宿主细胞的研究进展[J]. 武晓燕,黄晓红. 生命科学. 2010(09)
[6]PCR诊断牛新孢子虫病的初步应用[J]. 王春仁,翟延庆,赵兴存,谭秋菊,陈佳,陈爱华,王宇. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2009(02)
[7]表达弓形虫棒状体蛋白1的重组乳酸乳球菌诱导小鼠免疫应答的研究[J]. 杨秋林,许丽芳,陆惠民. 中国血吸虫病防治杂志. 2009(02)
[8]Balb/c小鼠新孢子虫病动物模型的建立及在其体内发育过程的研究[J]. 邓冲,张维,刘群,刘晶,丁隽. 中国农业科学. 2009(03)
[9]新孢子虫病研究进展[J]. 王常汉,巴音查汗,王振宝. 草食家畜. 2008(02)
[10]弓形虫主要表面抗原的研究进展[J]. 苑文英,季文琦,吴素焕. 河北职工医学院学报. 2008(01)
博士论文
[1]犬新孢子虫宿主细胞结合蛋白筛选及其免疫原性分析[D]. 吕强.吉林大学 2013
[2]弓形虫表面抗原SAG3单克隆抗体的制备及应用研究[D]. 马亮.吉林大学 2012
硕士论文
[1]新孢子虫P40和MIC6基因的免疫保护作用研究[D]. 杨滨僮.吉林农业大学 2014
[2]长春地区新孢子虫病流行病学调查[D]. 杜玲.吉林大学 2014
[3]β-酪蛋白单克隆抗体的制备及两种ELISA检测方法的建立[D]. 宋芳.吉林大学 2013
[4]新孢子虫ELISA检测方法建立及初步应用[D]. 李赫.吉林大学 2012
[5]双抗体夹心ELISA法检测弓形虫循环抗原的方法建立[D]. 王海礁.吉林大学 2011
本文编号：3648714
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