H5N1禽流感病毒PB1-F2特异性单克隆抗体的制备与鉴定
发布时间：2022-05-08 13:15
以重组的H5N1亚型禽流感病毒（AIV）PB1-F2的C端蛋白（cPB1-F2）为免疫原制备单克隆抗体,并鉴定其特异性。构建cPB1-F2的pGEX-6p-1原核表达载体,进行蛋白表达与纯化;采用杂交瘤技术制备筛选抗重组cPB1-F2蛋白的杂交瘤细胞株,利用间接免疫荧光和酶联免疫吸附试验筛选鉴定阳性细胞株,并对单克隆抗体特异性进行鉴定。结果显示,纯化的重组cPB1-F2蛋白具有良好的免疫原性,筛选获得了3株稳定分泌抗cPB1-F2单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为6F4、2C5和4D3,经鉴定抗体均为IgG1亚类,且3株单克隆抗体均能特异性识别重组PB1-F2蛋白。结果表明成功制备了cPB1-F2特异性单克隆抗体,为研制针对流感病毒的抗体药物奠定了基础。
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
SDS-PAGE检测cPB1-F2融合蛋白的表达与纯化
表3 ELISA鉴定cPB1-F2特异性的单克隆抗体Table 3 Specificity detection of cPB1-F2 monoclonal antibodies by ELISA 项目Item cPB1-F2 GST 阴性对照Negative control 6F4 2C5 4D3 6F4 2C5 4D3 OD450 1.430±0.028 1.311±0.055 0.801±0.045 0.091±0.004 0.074±0.001 0.087±0.003 0.071±0.003 P/N 15.813±0.302 17.703±0.497 9.253±0.253 1 1 1图3 cPB1-F2单克隆抗体与cPB1-F2蛋白结合产生的特异性荧光
cPB1-F2单克隆抗体与cPB1-F2蛋白结合产生的特异性荧光
【参考文献】：
硕士论文
[1]甲型流感PB1-F2分子特征及与人IFITM3基因关联性的研究[D]. 颜文娟.东南大学 2017
[2]A型流感病毒PB1-F2与p58IPK相互作用及对PKR信号通路的调控[D]. 于洪敏.吉林大学 2017
[3]枯草芽孢杆菌作为细菌活载体递呈HA蛋白和PB1-F2蛋白及其免疫效果的研究[D]. 黄金凤.南京农业大学 2017
本文编号：3651731
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
SDS-PAGE检测cPB1-F2融合蛋白的表达与纯化
表3 ELISA鉴定cPB1-F2特异性的单克隆抗体Table 3 Specificity detection of cPB1-F2 monoclonal antibodies by ELISA 项目Item cPB1-F2 GST 阴性对照Negative control 6F4 2C5 4D3 6F4 2C5 4D3 OD450 1.430±0.028 1.311±0.055 0.801±0.045 0.091±0.004 0.074±0.001 0.087±0.003 0.071±0.003 P/N 15.813±0.302 17.703±0.497 9.253±0.253 1 1 1图3 cPB1-F2单克隆抗体与cPB1-F2蛋白结合产生的特异性荧光
cPB1-F2单克隆抗体与cPB1-F2蛋白结合产生的特异性荧光
【参考文献】：
硕士论文
[1]甲型流感PB1-F2分子特征及与人IFITM3基因关联性的研究[D]. 颜文娟.东南大学 2017
[2]A型流感病毒PB1-F2与p58IPK相互作用及对PKR信号通路的调控[D]. 于洪敏.吉林大学 2017
[3]枯草芽孢杆菌作为细菌活载体递呈HA蛋白和PB1-F2蛋白及其免疫效果的研究[D]. 黄金凤.南京农业大学 2017
本文编号：3651731
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