表达狂犬病毒糖蛋白乳酸菌工程菌株的构建及口服免疫的研究

发布时间：2022-07-03 13:41

　　狂犬病是由狂犬病毒（Rabies virus,RABV）引起的一种急性传染病,人兽共患,一旦发病,病死率几乎为100%。控制人间狂犬病传播最有效的手段是切断传染源头,控制动物间狂犬病的传播,其防控难点在于流浪动物和野生动物的免疫。因此,急需研发不依赖于注射接种,适用于大规模免疫的口服疫苗。乳酸菌是公认安全的益生菌,对肠道的不利环境具有良好的耐受性,并且重组乳酸菌表达的蛋白无需进行纯化可大规模生产。本研究以乳酸菌为表达载体,狂犬病毒糖蛋白（GP）为候选抗原,构建表达狂犬病毒糖蛋白的重组乳酸菌作为新型口服疫苗,通过体内外试验评价其作为新型口服疫苗的潜力,以期为狂犬病口服疫苗的研制提供一种新的策略。1、根据Genbank载入的狂犬病毒基因序列,合成狂犬病病毒糖蛋白主要抗原表位区基因RVG,通过PCR方法在其C’端融合特异性树突状细胞靶向肽（DCpep）编码基因后插入到乳酸菌表达载体中,以融合无关肽（ctrl）编码基因为对照,分别构建表达RVG基因的重组乳酸菌NC8-pgsA’-RVG-DCpep和NC8-pgsA’-RVG-ctrl。通过Western-blot和免疫荧光进行蛋白水平检测,结... 

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

狂犬病病毒模式图（therabiesvirusvirion，来源Matthias等）

基于使用乳酸菌（LAB）作为蛋白质抗原或胃肠道中的DNA的递送载体的四种方法

目的基因的PCR扩增结果及目的基因的双酶切鉴定结果

【参考文献】：
期刊论文
[1]新时代迈向狂犬病消除新征程——记2018年中国狂犬病年会[J]. 李刚,郭守堂,熊鹰.  中国工作犬业. 2018(05)
[2]巴斯德开启预防医学的大门——纪念路易斯·巴斯德发明狂犬病疫苗130周年[J]. 杨正时,房海.  河北科技师范学院学报. 2015(04)
[3]H9N2亚型禽流感病毒HA-DCpep融合基因重组乳杆菌的构建及免疫原性分析[J]. 石少华,杨文涛,叶丽萍,黄海斌,蔡若鹏,李雨宸,闫晓月,王春凤,杨桂连.  中国兽医科学. 2014(02)
[4]不同疫区家犬携带狂犬病毒的比较研究[J]. 熊成龙,邵中军,郝宗宇,常文辉,孙建伟,张爱梅,张彦平,姜庆五.  中国热带医学. 2008(03)
[5]乳酸乳球菌作为黏膜免疫活载体疫苗传递抗原的研究进展[J]. 史达,宋岩,李一经.  微生物学报. 2006(04)

博士论文
[1]中国狂犬病毒的遗传学特征[D]. 熊成龙.中国人民解放军军事医学科学院 2006

硕士论文
[1]上海地区家犬中狂犬病的血清抗体检测与感染状况调查[D]. 沈悦.南京农业大学 2006



本文编号：3654963