绿脓杆菌协同PM2.5加重小鼠肺部炎症
发布时间：2022-07-27 17:02
研究背景与目的:洁净良好的禽舍环境是家禽健康生长的重要前提和保障。随着集约化、标准化程度的不断提高,现代家禽舍多采用自动上料清粪、自动控温控湿控风的层叠式笼养模式。但是,由于饲养密度高、笼器具密集,舍内温湿度和通风量不均匀,各类粉尘、有害气体、微生物及代谢产物等形成的气溶胶浓度随家禽日龄增加而增加,对家禽和饲养人员的健康造成极大的威胁。过高浓度的PM2.5损伤呼吸系统后引起的宿主免疫功能受损可能引起细菌性继发感染,使机体产生更强烈的炎症反应,加重肺部损伤。本研究主要探究不同养殖周期禽舍内PM2.5的微生物组成结构的差异,并进一步研究PM2.5与绿脓杆菌协同诱导呼吸系统炎症损伤及相关分子机制。研究方法:对肉鸡不同生长阶段（3日龄、22日龄和40日龄）禽舍中的颗粒物（PM2.5）样本进行采集,通过扫描电镜观察颗粒物的形态差异进行观察,并对禽舍微生物气溶胶利用16S r DNA序列分析技术,对样本中细菌的多样性和相对丰度进行表征。其次,分别通过体外实验和体内实验探究未灭活PM2.5、灭活PM2.5（PM2.5—）与绿脓杆菌的协同致炎效果。（1）PM2.5对RAW264....
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
致谢
摘要
Abstract
第1章 引言
1.1 大气颗粒物
1.2 PM2.5的成分
1.2.1 PM2.5的化学成分
1.2.2 PM2.5的生物成分
1.2.3禽舍PM2.5
1.3 PM2.5的危害
1.3.1 PM2.5对人体的危害
1.3.2 PM2.5对家禽的危害
1.3.3 PM2.5对呼吸系统的影响
1.4 PM2.5影响呼吸系统的作用机制
1.4.1 线粒体损伤
1.4.2 细胞内钙稳态失衡
1.4.3 氧化损伤与炎症损伤
1.4.4 细胞自噬与细胞凋亡
1.5 PM2.5对巨噬细胞的影响
1.6 绿脓杆菌的致病机制
1.6.1 绿脓杆菌的危害
1.6.2 绿脓杆菌的致病机制
1.7 NF-κB信号通路与炎症
1.7.1 NF-κB/Rel家族蛋白
1.7.2 NF-κB的生物学意义
1.7.3 NF-κB信号通路的激活
1.8 研究目的
第2章 材料和方法
2.1 实验材料
2.1.1 细胞
2.1.2 绿脓杆菌
2.1.3 实验动物
2.1.4 主要仪器
2.1.5 主要试剂
2.2 实验方法
2.2.1 样品采样地点与时间
2.2.2 样品采集及处理
2.2.3 扫描电镜观察颗粒物(PM2.5)的形态观察
2.2.4 微生物多样性分析
2.2.5 PM2.5颗粒物混悬液的制备
2.2.6 绿脓杆菌的培养
2.2.7 细胞培养
2.2.8 细胞增殖实验
2.2.9 NO检测
2.2.10 细胞中IL-6、IL-8及TNF-α的检测
2.2.11 细胞中NF-κB相关蛋白的检测
2.2.12 呼吸道模型的建立
2.2.13 小鼠肺组织病理学观察
2.2.14 小鼠血清中IL-6、IL-8及TNF-α的检测
2.2.15 小鼠肺组织中IL-6、IL-8、TNF-α的检测
2.2.16 肺组织中NF-κB相关蛋白的检测
2.2.17 分析方法
第3章 结果
3.1 禽舍PM2.5形态观察
3.2 禽舍PM2.5浓度变化及细菌微生物多样性
3.2.1 PM2.5的浓度变化
3.2.2 禽舍PM2.5细菌微生物多样性
3.3 绿脓杆菌协同PM2.5体外致炎实验
3.3.1 PM2.5 可抑制RAW264.7 细胞增殖并促进NO表达
3.3.2 PM2.5 协同绿脓杆菌促进RAW264.7 细胞中IL-6、IL-8和TNF-α表达
3.3.3 PM2.5 协同绿脓杆菌激活RAW264.7 细胞中的NF-κB途径
3.4 绿脓杆菌协同PM2.5体内致炎实验
3.4.1 小鼠状态观察
3.4.2 PM2.5协同绿脓杆菌刺激使小鼠体重持续下降
3.4.3 PM2.5协同绿脓杆菌刺激加重小鼠肺部损伤
3.4.4 PM2.5 协同绿脓杆菌促进小鼠血清和肺组织中IL-6、IL-8和TNF-α表达
3.4.5 PM2.5 协同绿脓杆菌激活小鼠肺组织中的NF-κB信号通路
第4章 讨论
4.1 颗粒物(PM2.5)的形态分析及细菌多样性分析
4.2 绿脓杆菌协同PM2.5对炎症的影响
第5章 结论
参考文献
作者简历
【参考文献】：
期刊论文
[1]The effects of autophagy on vascular endothelial cells induced by airborne PM2.5[J]. Zhixiang Zhou,Tong Shao,Mengnan Qin,Xiaoyan Miao,Yu Chang,Wang Sheng,Fengshang Wu,Yunjiang Yu. Journal of Environmental Sciences. 2018(04)
本文编号：3665838
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
致谢
摘要
Abstract
第1章 引言
1.1 大气颗粒物
1.2 PM2.5的成分
1.2.1 PM2.5的化学成分
1.2.2 PM2.5的生物成分
1.2.3禽舍PM2.5
1.3 PM2.5的危害
1.3.1 PM2.5对人体的危害
1.3.2 PM2.5对家禽的危害
1.3.3 PM2.5对呼吸系统的影响
1.4 PM2.5影响呼吸系统的作用机制
1.4.1 线粒体损伤
1.4.2 细胞内钙稳态失衡
1.4.3 氧化损伤与炎症损伤
1.4.4 细胞自噬与细胞凋亡
1.5 PM2.5对巨噬细胞的影响
1.6 绿脓杆菌的致病机制
1.6.1 绿脓杆菌的危害
1.6.2 绿脓杆菌的致病机制
1.7 NF-κB信号通路与炎症
1.7.1 NF-κB/Rel家族蛋白
1.7.2 NF-κB的生物学意义
1.7.3 NF-κB信号通路的激活
1.8 研究目的
第2章 材料和方法
2.1 实验材料
2.1.1 细胞
2.1.2 绿脓杆菌
2.1.3 实验动物
2.1.4 主要仪器
2.1.5 主要试剂
2.2 实验方法
2.2.1 样品采样地点与时间
2.2.2 样品采集及处理
2.2.3 扫描电镜观察颗粒物(PM2.5)的形态观察
2.2.4 微生物多样性分析
2.2.5 PM2.5颗粒物混悬液的制备
2.2.6 绿脓杆菌的培养
2.2.7 细胞培养
2.2.8 细胞增殖实验
2.2.9 NO检测
2.2.10 细胞中IL-6、IL-8及TNF-α的检测
2.2.11 细胞中NF-κB相关蛋白的检测
2.2.12 呼吸道模型的建立
2.2.13 小鼠肺组织病理学观察
2.2.14 小鼠血清中IL-6、IL-8及TNF-α的检测
2.2.15 小鼠肺组织中IL-6、IL-8、TNF-α的检测
2.2.16 肺组织中NF-κB相关蛋白的检测
2.2.17 分析方法
第3章 结果
3.1 禽舍PM2.5形态观察
3.2 禽舍PM2.5浓度变化及细菌微生物多样性
3.2.1 PM2.5的浓度变化
3.2.2 禽舍PM2.5细菌微生物多样性
3.3 绿脓杆菌协同PM2.5体外致炎实验
3.3.1 PM2.5 可抑制RAW264.7 细胞增殖并促进NO表达
3.3.2 PM2.5 协同绿脓杆菌促进RAW264.7 细胞中IL-6、IL-8和TNF-α表达
3.3.3 PM2.5 协同绿脓杆菌激活RAW264.7 细胞中的NF-κB途径
3.4 绿脓杆菌协同PM2.5体内致炎实验
3.4.1 小鼠状态观察
3.4.2 PM2.5协同绿脓杆菌刺激使小鼠体重持续下降
3.4.3 PM2.5协同绿脓杆菌刺激加重小鼠肺部损伤
3.4.4 PM2.5 协同绿脓杆菌促进小鼠血清和肺组织中IL-6、IL-8和TNF-α表达
3.4.5 PM2.5 协同绿脓杆菌激活小鼠肺组织中的NF-κB信号通路
第4章 讨论
4.1 颗粒物(PM2.5)的形态分析及细菌多样性分析
4.2 绿脓杆菌协同PM2.5对炎症的影响
第5章 结论
参考文献
作者简历
【参考文献】：
期刊论文
[1]The effects of autophagy on vascular endothelial cells induced by airborne PM2.5[J]. Zhixiang Zhou,Tong Shao,Mengnan Qin,Xiaoyan Miao,Yu Chang,Wang Sheng,Fengshang Wu,Yunjiang Yu. Journal of Environmental Sciences. 2018(04)
本文编号：3665838
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3665838.html
