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扬州鹅繁殖的光照调控及下丘脑基因差异表达研究

发布时间:2022-08-08 11:16
  作为季节性繁殖家禽,鹅的繁殖性能受季节影响较大。扬州鹅是我国培育的第一个鹅品种,其繁殖具有典型的部分长日照型特点,因此对扬州鹅的繁殖进行光照调控具有重大生产意义。本文通过光照调节来研究光照对扬州鹅繁殖性能和繁殖生理等方面的影响,并采用抑制性消减杂交技术,筛选影响种鹅季节性繁殖的相关基因,为种鹅稳产、高产的环境控制和高产品种鹅的选育提供参考依据。一、自然光照条件下种鹅产蛋规律及血清生化指标、生殖激素水平的变化规律试验鹅全程采用自然光照,公母鹅混群饲养,每月统计鹅群的产蛋率,并于每月11-15日上午9:00-10:30随机取15只母鹅、10只公鹅,进行翅静脉采血,离心收集血清,用于相关血液指标的测定。同时随机取6只种母鹅和3只种公鹅屠宰,取下丘脑和垂体,用于测定相关基因的表达量;分离心脏、肝脏等内脏器官、称重,分离生殖系统的组织、器官,进行重量或长度测定;取输卵管放入福尔马林溶液,用于组织切片制作。结果表明:1、种鹅2月份的产蛋率最高,随后逐渐下降,7-10月份停产,11月份又重新产蛋,且产蛋率逐渐上升。2、光照延长或缩短所引起的公母鹅血清总蛋白和白蛋白含量的变化规律是一致的。光照延长时母... 

【文章页数】:143 页

【学位级别】:博士

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摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1 鹅的生产现状及其繁殖特点
        1.1 我国鹅的生产现状
        1.2 鹅的繁殖特点
            1.2.1 鹅的季节性繁殖
            1.2.2 鹅的就巢性
    2 影响鹅繁殖性能的生殖生理因子
        2.1 促性腺激素释放激素
            2.1.1 促性腺激素释放激素的原来
            2.1.2 促性腺激素释放激素的释放
        2.2 催乳素
        2.3 促卵泡素
        2.4 促黄体素
        2.5 雌激素
        2.6 多巴胺
        2.7 血管活性肠肽
        2.8 各类激素类似物及其作用
    3 影响鹅繁殖性能的候选基因
        3.1 促性腺激素释放激素基因
        3.2 催乳素基因
        3.3 促卵泡素基因
        3.4 促黄体素基因
        3.5 褪黑素基因
    4 光照对禽类繁殖性能的影响
        4.1 光照对禽类生殖的作用机理
            4.1.1 光照的接受
            4.1.2 光照的作用特点
        4.2 光照时间对禽类繁殖机能的影响
        4.3 光照特性对禽类繁殖机能的影响
        4.4 光照在家禽生产上其他方面的应用
        4.5 光照在鹅的反季节生产中应用
    5 本研究的内容、目的和意义
    参考文献
第二章 自然光照条件下种鹅产蛋规律及血清生化指标、生殖激素水平的变化规律
    1 材料和方法
        1.1 试验动物
        1.2 试验设计
        1.3 血液指标的测定和方法
        1.4 组织总RNA提取和反转录
        1.5 引物设计
        1.6 PCR扩增
        1.7 实时荧光定量PCR
        1.8 组织切片制作
        1.9 光照变化特点的定义
        1.10 数据处理与统计分析
    2 结果与分析
        2.1 自然光照下种鹅产蛋率的变化
        2.2 不同光照变化特点下种鹅血清生化指标的变化情况
            2.2.1 种鹅血清总蛋白水平随光照的变化情况
            2.2.2 种鹅血清白蛋白水平随光照的变化情况
            2.2.3 种鹅血清碱性磷酸酶水平随光照的变化
            2.2.4 种鹅血清尿素氮水平随光照的变化
        2.3 不同光照变化特点下种鹅血清激素指标的变化情况
            2.3.1 种鹅血清促卵泡素水平随光照的变化
            2.3.2 种鹅血清促黄体素水平随光照的变化
            2.3.3 种鹅血清催乳素水平随光照的变化
            2.3.4 种鹅血清雌二醇水平随光照的变化
        2.4 不同光照变化特点下种鹅器官指数的变化情况
            2.4.1 种鹅心脏指数随光照的变化
            2.4.2 种鹅肝脏指数随光照的变化
            2.4.3 种鹅脾脏指数随光照的变化
        2.5 不同光照变化特点下种鹅生殖系统的变化情况
            2.5.1 种鹅卵巢指数随光照的变化
            2.5.2 种鹅睾丸指数随光照的变化
            2.5.3 种鹅输卵管指数随光照的变化
            2.5.4 种鹅输卵管长随光照的变化
            2.5.5 种鹅卵泡指数和卵泡数随光照的变化
        2.6 不同光照变化特点下种鹅输卵管组织的变化情况
            2.6.1 不同光照变化特点下种鹅输卵管膨大部结构的影响
            2.6.2 不同光照变化特点下种鹅输卵管峡部结构的影响
            2.6.3 不同光照变化特点下种鹅输卵管子宫部结构的影响
        2.7 不同光照变化特点下种鹅睾丸组织的变化情况
        2.8 种鹅GnRH基因、FSH基因表达量检测
            2.8.1 RNA质量检测
            2.8.2 GnRH基因、FSH基因、内参基因的PCR扩增
            2.8.3 GnRH基因、FSH基因在组织中的表达量检测
        2.9 不同光照变化特点下种鹅GnRH、FSH基因表达情况
    3 讨论
        3.1 试验时间的界定点
        3.2 种鹅的产蛋规律
        3.3 自然光周期下血清生化水平和激素水平
            3.3.1 自然光周期下血清生化水平
            3.3.2 自然光周期下血清生殖激素水平
        3.4 不同光周期对种鹅内脏器官的影响
        3.5 不同光周期对种鹅生殖系统的影响
        3.6 光照变化对GnRH、FSH基因表达的影响
        3.7 不同光周期对种鹅输卵管形态学的影响
        3.8 不同光周期对种鹅睾丸形态学的影响
    参考文献
第三章 不同光照和温度处理对鹅血清生化指标、生殖激素水平、繁殖机能的影响
    1 材料和方法
        1.1 试验动物
        1.2 试验设计
        1.3 测定指标和方法
        1.4 数据处理与统计分析
    2 结果与分析
        2.1 不同光照和温度处理对鹅血清生化指标和激素指标的影响
            2.1.1 不同光照和温度处理对鹅血清总蛋白含量的影响
            2.1.2 不同光照和温度处理对鹅血清白蛋白含量的影响
            2.1.3 不同光照和温度处理对鹅血清碱性磷酸酶含量的影响
            2.1.4 不同光照和温度处理对鹅血清尿素氮含量的影响
            2.1.5 不同光照和温度处理对鹅血清促黄体素浓度的影响
            2.1.6 不同光照和温度处理对鹅血清促卵泡素浓度的影响
            2.1.7 不同光照和温度处理对鹅血清催乳素浓度的影响
            2.1.8 不同光照和温度处理对鹅血清雌二醇浓度的影响
        2.2 不同光照和温度处理对鹅内脏器官的影响
            2.2.1 不同光照和温度处理对鹅心脏指数的影响
            2.2.2 不同光照和温度处理对鹅肝脏指数的影响
            2.2.3 不同光照和温度处理对鹅脾脏指数的影响
            2.2.4 不同光照和温度处理对鹅卵巢指数的影响
            2.2.5 不同光照和温度处理对鹅卵泡指数的影响
            2.2.6 不同光照和温度处理对鹅卵泡数的影响
            2.2.7 不同光照和温度处理对鹅输卵管指数的影响
            2.2.8 不同光照和温度处理对鹅输卵管长度的影响
        2.3 不同光照和温度处理对处理30天鹅血清生化指标和激素指标的影响
            2.3.1 不同光照和温度处理对处理30天鹅血清生化指标的影响
            2.3.2 不同光照和温度处理对处理30天鹅血清激素指标的影响
        2.4 不同光照和温度处理对处理30天鹅内脏器官的影响
        2.5 不同光照和温度处理对处理30天鹅繁殖系统的影响
            2.5.1 不同光照和温度处理对处理30天鹅繁殖性状的影响
            2.5.2 不同光照和温度处理对处理30天鹅输卵管膨大部组织结构的影响
        2.6 不同光照和温度处理对处理30天鹅相关基因表达的影响
    3 讨论
        3.1 不同光照和温度处理对鹅血清生化指标和激素指标的影响
        3.2 不同光照和温度处理对鹅内脏器官和繁殖系统的影响
        3.3 不同光照和温度处理对处理30天鹅生化指标和激素指标的影响
        3.4 不同光照和温度处理对处理30天鹅内脏器官和繁殖系统的影响
        3.5 不同光照和温度处理对处理30天鹅膨大部组织结构的影响
        3.6 不同光照和温度处理对处理30天鹅相关基因表达的影响
    参考文献
第四章 恒定光照对种鹅血清生化指标、生殖激素水平、繁殖机能的影响
    1 材料和方法
        1.1 试验动物
        1.2 试验设计
        1.3 测定指标和方法
        1.4 免疫组化检测
            1.4.1 主要试剂
            1.4.2 主要溶液的配制
            1.4.3 GnRH抗体、褪黑激素受体在生殖轴中的免疫组化定位
        1.5 GnRH、Mel基因定量测定
        1.6 数据处理与统计分析
    2 结果与分析
        2.1 恒定光照处理对种鹅血清生化指标和激素指标的影响
            2.1.1 恒定光照处理对种鹅血清总蛋白、白蛋白浓度的影响
            2.1.2 恒定光照处理对种鹅血清胆固醇浓度的影响
            2.1.3 恒定光照处理对种鹅血清雌二醇浓度的影响
            2.1.4 恒定光照处理对种鹅血清孕酮浓度的影响
        2.2 恒定光照处理6个月对种鹅血清生化指标和激素指标的影响
            2.2.1 恒定光照处理6个月对种鹅血清生化指标的影响
            2.2.2 恒定光照处理6个月对种鹅血清激素指标的影响
        2.3 恒定光照处理6个月对种鹅内脏器官和繁殖系统的影响
            2.3.1 恒定光照处理6个月对种鹅体重和内脏器官的影响
            2.3.2 恒定光照处理6个月对种鹅繁殖系统的影响
            2.3.3 恒定光照处理6个月对种鹅输卵管组织形态的影响
        2.4 恒定光照处理6个月对种鹅下丘脑基因表达的影响
        2.5 恒定光照处理6个月对种鹅GnRH、Mel免疫组化检测结果
    3 讨论
        3.1 恒定光照处理对种鹅血清生化指标和激素指标的影响
        3.2 恒定光照处理6个月对种鹅血清生化指标和激素指标的影响
            3.2.1 恒定光照处理6个月对种鹅血清生化指标的影响
            3.2.2 恒定光照处理6个月对种鹅血清激素指标的影响
            3.2.3 恒定光照处理6个月对种鹅输卵管组织形态的影响
        3.3 恒定光照处理6个月对种鹅内脏器官和繁殖系统的影响
        3.4 恒定光照处理6个月对种鹅相关基因表达的影响
        3.5 恒定光照处理对垂体GnRH、Mel免疫组化检测结果
    参考文献
第五章 自然休产期产蛋鹅与休产鹅下丘脑基因差异表达分析
    1 材料和方法
        1.1 试验材料
            1.1.1 试验动物
            1.1.2 试剂与试剂盒
            1.1.3 试验仪器
        1.2 试验方法及步骤
            1.2.1 总RNA抽提
            1.2.2 mRNA纯化
            1.2.3 SSH cDNA文库的构建
            1.2.4 差异表达基因的测序及序列分析
    2 结果与分析
        2.1 抑制消减杂结果分析
        2.2 差异表达cDNA文库的PCR检测
        2.3 阳性克隆测序及ESTs序列分析
    3 讨论
    参考文献
第五章 结论
致谢
发表论文、出版制作情况


【参考文献】:
期刊论文
[1]不同醒抱方法对抱窝鹅处理效果的对比[J]. 黄炎坤,赵金艳,韩占兵.  湖北农业科学. 2012(18)
[2]自然光周期条件下种鹅血清生化指标和生殖激素水平变化规律的研究[J]. 陈永华,蔡凤仙,杨海明,王志跃,陈宏军.  中国家禽. 2012(12)
[3]催乳素调控禽类繁殖活动的研究现状与展望[J]. 施振旦,郭日红,邢光东.  中国家禽. 2012(04)
[4]单色光对肉鸡脑内促性腺激素释放激素分布和表达的影响[J]. 王瑶,宋志琦,陈耀星,曹静,王子旭,杨光.  畜牧兽医学报. 2011(11)
[5]LEF-1表达与肿瘤进程研究进展[J]. 葛玉婷,杨艳丽,李鹏鸽,尹田乐,侯颖春.  中国细胞生物学学报. 2011(10)
[6]利用抑制消减杂交技术筛选鹅就巢行为相关基因[J]. 郭军,汤青萍,章双杰,马月辉,陆火林,苏建东,邹剑敏,陈宽维,李慧芳.  畜牧兽医学报. 2011(10)
[7]鹅繁殖季节的调控和配套技术[J]. 施振旦,孙爱东.  中国家禽. 2011(18)
[8]籽鹅卵巢产蛋性能相关基因全长cDNA序列的克隆与分析[J]. 王丹,郭景茹,刘胜军,杨焕民,孙东波,薛琳琳,宿甲子,邓效禹.  中国生物制品学杂志. 2010(12)
[9]籽鹅卵巢组织差异表达基因的研究[J]. 康波,姜冬梅,郭静茹,杨焕民.  畜牧兽医学报. 2010(06)
[10]不同光照周期下鸡输卵管比较形态学及蛋品质的研究[J]. 王翠菊,陈辉,侯永刚,王飞,王洪芳,黄仁录.  河北农业大学学报. 2009(04)

博士论文
[1]鹅催乳素受体基因克隆和多克隆抗体制备及组织表达分析[D]. 邢光东.南京农业大学 2011
[2]日粮蛋白水平和外源性GnRH类似物对溆浦鹅产蛋性能和卵泡发育的作用及其机制研究[D]. 和希顺.华中农业大学 2008

硕士论文
[1]持续光照对雌性大鼠生殖内分泌节律的影响及滋阴补阳序贯中药干预作用的实验研究[D]. 堵吉.南京中医药大学 2012
[2]自然光周期条件下种鹅血清生化指标、生殖激素水平和组织中GnRH、FSH基因表达量的研究[D]. 陈永华.扬州大学 2012
[3]不同强度光照对母鸡中脑和间脑c-fos基因表达的影响[D]. 兰晓宇.河北农业大学 2010
[4]间歇光照对蛋鸡行为节律、生产性能及输卵管形态、血液生化指标的影响[D]. 王飞.河北农业大学 2010
[5]籽鹅血清中FSH、LH和PRL与卵巢相应受体mRNA表达的关系[D]. 张旭.黑龙江八一农垦大学 2010
[6]扬州鹅PRL基因的序列克隆及其多态性与产蛋性状的关联分析[D]. 张高娜.扬州大学 2010
[7]狮头鹅催乳素基因的克隆、表达及其生理活性的初步观察[D]. 吴慧英.广东海洋大学 2010
[8]光诱导c-fos基因在不同日龄母鸡中脑和间脑的表达[D]. 程金金.河北农业大学 2009
[9]鹅生殖周期FSHβ基因mRNA表达规律的研究[D]. 杜晓东.安徽农业大学 2009
[10]鹅生殖周期催乳素基因(PRL)mRNA表达规律的研究[D]. 魏茹华.安徽农业大学 2009



本文编号:3671409

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