捻转血矛线虫耐伊维菌素分离株P-gp-9及GluCI-gbr-2b基因多态性研究

发布时间：2022-08-11 16:22

　　绵羊胃肠道线虫对驱虫药的耐药性已成为全世界共同面临的问题,其中以捻转血矛线虫（Haemonchus contortus）耐伊维菌素药物危害最严重。鉴于目前羊养殖业的生产实践中寄生虫病防控的需要,本论文以国际标准虫株作对照,对捻转血矛线虫本土分离株的P-gp-9基因和GluCl-gbr-2b基因进行了研究,以了解相关耐伊维菌素药物发生机理。结果如下:通过MEGA5.1生物学软件,对捻转血矛线虫GluCl-gbr-2b基因片段的序列进行比较分析,发现以国际标准敏感株Hc-S为对照,国际标准耐药株Hc-R与本土耐药分离株 WSHc-001、WSHc-003、WSHc-138 的 GluCl-gbr-2b 基因片段有 20 个碱基位点是共同突变点;然而以分离敏感株YCHc-022为对照时,Hc-R、WSHc-001、WSHc-003、WSHc-138的GluCl-gbr-2b基因片段仅在第422位碱基位点为共同突变点;表明捻转血矛线虫对伊维菌素的耐药性可能与GluCl-gbr-2b基因片段上的某个碱基位点的突变相关联,其核苷酸多态性有可能作为潜在的分子耐药性检测的标记。对P-gp-9基因中的一... 

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略语表
1 引言
    1.1 捻转血矛线虫病
        1.1.1 捻转血矛线虫生活史
        1.1.2 捻转血矛线虫病流行病学
        1.1.3 捻转血矛线虫病的危害
        1.1.4 捻转血矛线虫病诊断
        1.1.5 捻转血矛线虫病治疗
        1.1.6 捻转血矛线虫病防控措施
    1.2 捻转血矛线虫耐药性研究
        1.2.1 耐药性流行情况
        1.2.2 耐药相关基因研究
    1.3 捻转血矛线虫耐药性检测
        1.3.1 PCR-SSCP法
        1.3.2 其他方法
    1.4 研究目的及意义
2 研究一 捻转血矛线虫GluCl-gbr-2b基因片段多态性分析
    2.1 材料
        2.1.1 仪器与耗材
        2.1.2 试剂与溶液
        2.1.3 实验虫株
    2.2 方法
        2.2.1 基因组DNA提取
        2.2.2 GluCl-gbr-2b基因片段PCR扩增
        2.2.3 PCR产物纯化及测序
    2.3 结果
        2.3.1 PCR扩增结果
        2.3.2 测序结果
        2.3.3 序列分析结果
    2.4 讨论与小结
        2.4.1 讨论
        2.4.2 小结
3 研究二 捻转血矛线虫P-gp-9基因片段多态性分析
    3.1 材料
        3.1.1 仪器与耗材
        3.1.2 试剂与溶液
        3.1.3 实验虫株
    3.2 方法
        3.2.1 基因组DNA提取
        3.2.2 P-gp-9基因片段PCR扩增
        3.2.3 PCR产物纯化及测序
        3.2.4 PCR-SSCP分析
    3.3 结果
        3.3.1 PCR扩增结果
        3.3.2 测序结果
        3.3.3 序列分析结果
        3.3.4 PCR-SSCP分析结果
    3.4 讨论与小结
        3.4.1 讨论
        3.4.2 小结
4 结论
致谢
参考文献
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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[3]中国地区捻转血矛线虫苯并咪唑类抗药性相关基因Ⅰ型β微管蛋白编码基因多样性的研究[D]. 张宗泽.华中农业大学 2017
[4]放牧绵羊胃肠道线虫对常用驱虫药耐药性的调查[D]. 敖登高娃.内蒙古农业大学 2017
[5]基于SNP的捻转血矛线虫（H.contortus）遗传多样性分析及P-糖蛋白基因核苷酸差异位点筛选[D]. 葛程.上海师范大学 2015
[6]捻转血矛线虫第2期幼虫、第3期幼虫、活化第3期幼虫比较蛋白组学研究[D]. 王芳.南京农业大学 2015
[7]捻转血矛线虫抗伊维菌素虫株P-糖蛋白基因多态性研究[D]. 刘鑫远.内蒙古农业大学 2012



本文编号：3674987