重组GSTA3与Ex-FABP蛋白对TD肉鸡中红细胞抗菌肽转录表达的影响
发布时间：2022-08-23 22:20
在胫骨软骨发育不良（Tibial Dyschondroplasia,TD）研究中,福美双已广泛用于高规律性和高精确性地诱导TD的发生。谷胱甘肽硫转移酶A3（glutathione-S-transferase A3,GSTA3）作为GSTs家族中的一员,主要参与机体的解毒,抗氧化应激,类固醇和前列腺素的合成。细胞外脂肪酸结合蛋白（extracellular fatty acid-binding protein,Ex-FABP）作为一类脂肪酸结合蛋白,其表达与TD的发生发展过程密切相关。作为血管中最丰富的细胞亚群,鸡红细胞也存在于软骨区中。最近证明,鸡红细胞中存在toll样受体和细胞因子的表达,所以我们猜测鸡红细胞也有助于预防和治疗包括TD在内的骨类疾病。本研究通过实验室前期获得的红细胞RNA,运用RT-PCR技术验证抗菌肽在红细胞中的表达,并运用实时荧光定量PCR技术,检测不同剂量重组鸡GSTA3与Ex-FABP蛋白对TD发生过程中红细胞抗菌肽的转录表达变化,以探究重组GSTA3与Ex-FABP蛋白在TD发生中红细胞的作用。试验结果表明:（1）在鸡红细胞中存在11种抗菌肤的表达,分别为 ...
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
1 文献综述
1.1 胫骨软骨发育不良
1.1.1 骨骼发育异常
1.1.2 正常胫骨软骨生长板与胫骨软骨发育不良的生长板
1.1.3 胫骨软骨发育不良中的基因表达研究
1.1.4 胫骨软骨发育不良的相关研究方法
1.2 抗菌肽
1.2.1 抗菌肽概述
1.2.2 抗菌肽的分类与结构
1.2.2.1 防御素
1.2.2.2 抗菌肽Cathelicidins
1.2.2.3 抗菌肽LEAP-2
1.2.3 抗菌肽的表达
1.2.3.1 防御素的表达
1.2.3.2 Cathelicidins抗菌肽的表达
1.2.3.3 LEAP-2的表达
1.2.4 抗菌肽的生物活性及相关免疫调节作用
1.2.4.1 防御素的抗菌活性和免疫调节功能
1.2.4.2 Cathelicidins的抗菌活性和免疫调节作用
1.3 谷胱甘肽硫转移酶A3蛋白和细胞外脂肪酸结合蛋白
1.3.1 谷胱甘肽硫转移酶概述
1.3.2 细胞外脂肪酸结合蛋白概述
2 研究的目的与意义
3 抗菌肽在鸡红细胞中的表达验证
3.1 材料和方法
3.1.1 试验材料
3.1.1.1 主要试剂
3.1.1.2 主要仪器
3.1.2 试验方法
3.1.2.1 各抗菌肽的引物设计
3.1.2.2 反转录
3.1.2.3 PCR检测
3.1.2.4 PCR结果检测
3.2. 试验结果
3.2.1 RT-PCR电泳结果
3.3 讨论
3.4 小结
4 重组GSTA3蛋白对TD肉鸡红细胞中抗菌肽的转录表达影响
4.1 材料与方法
4.1.1 试验材料
4.1.1.1 试验动物
4.1.1.2 主要试剂
4.1.1.3 主要仪器
4.1.2 试验方法
4.1.2.1 试验动物的分组及处理
4.1.2.2 样品采集
4.1.2.3 红细胞RNA提取及质量浓度检测
4.1.2.4 红细胞RNA反转录
4.1.2.5 建立Real-time PCR反应体系
4.1.2.6 实验数据的收集、处理和分析
4.2 试验结果
4.2.1 TD模型的鉴定
4.2.2 红细胞RNA质量检测结果
4.2.3 各抗菌肽基因在正常鸡红细胞中的mRNA表达
4.2.4 重组GSTA3蛋白在TD发生早期对红细胞中AvBD1、AvBD2、AvBD4、AvBD6、AvBD7、LEAP-2、NK-lysin和CATH-2的mRNA表达水平的影响
4.2.5 重组GSTA3蛋白在TD恢复期对红细胞中AvBD1、AvBD2、AvBD4、AvBD6、AvBD7、LEAP-2、NK-lysin和CATH-2的mRNA表达水平的影响
4.3 讨论
4.4 小结
5 重组EX-FABP蛋白对TD肉鸡红细胞中抗菌肽的转录表达影响
5.1 材料与方法
5.1.1 试验材料
5.1.1.1 试验动物
5.1.1.2 主要试剂
5.1.1.3 主要仪器
5.1.2 试验方法
5.1.2.1 试验动物的分组及处理
5.1.2.2 样品采集
5.1.2.3 红细胞RNA提取及质量浓度检测
5.1.2.4 红细胞RNA反转录
5.1.2.5 建立实时荧光定量PCR反应体系
5.1.2.6 实验数据的收集、处理和分析
5.2 试验结果
5.2.1 TD模型的鉴定
5.2.2 红细胞RNA质量检测结果
5.2.3 重组Ex-FABP蛋白在TD早期对红细胞中AvBD1、AvBD2、AvBD4、AvBD6、AvBD7、LEAP-2、NK-lysin和CATH-2的mRNA表达水平的影响
5.2.4 重组Ex-FABP蛋白在TD恢复期对红细胞中AvBD1、AvBD2、AvBD4、AvBD6、AvBD7、LEAP-2、NK-lysin和CATH-2的mRNA表达水平的影响
5.3 讨论
5.4 小结
全文结论
参考文献
ABSTRACT
致谢
本文编号：3678588
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
1 文献综述
1.1 胫骨软骨发育不良
1.1.1 骨骼发育异常
1.1.2 正常胫骨软骨生长板与胫骨软骨发育不良的生长板
1.1.3 胫骨软骨发育不良中的基因表达研究
1.1.4 胫骨软骨发育不良的相关研究方法
1.2 抗菌肽
1.2.1 抗菌肽概述
1.2.2 抗菌肽的分类与结构
1.2.2.1 防御素
1.2.2.2 抗菌肽Cathelicidins
1.2.2.3 抗菌肽LEAP-2
1.2.3 抗菌肽的表达
1.2.3.1 防御素的表达
1.2.3.2 Cathelicidins抗菌肽的表达
1.2.3.3 LEAP-2的表达
1.2.4 抗菌肽的生物活性及相关免疫调节作用
1.2.4.1 防御素的抗菌活性和免疫调节功能
1.2.4.2 Cathelicidins的抗菌活性和免疫调节作用
1.3 谷胱甘肽硫转移酶A3蛋白和细胞外脂肪酸结合蛋白
1.3.1 谷胱甘肽硫转移酶概述
1.3.2 细胞外脂肪酸结合蛋白概述
2 研究的目的与意义
3 抗菌肽在鸡红细胞中的表达验证
3.1 材料和方法
3.1.1 试验材料
3.1.1.1 主要试剂
3.1.1.2 主要仪器
3.1.2 试验方法
3.1.2.1 各抗菌肽的引物设计
3.1.2.2 反转录
3.1.2.3 PCR检测
3.1.2.4 PCR结果检测
3.2. 试验结果
3.2.1 RT-PCR电泳结果
3.3 讨论
3.4 小结
4 重组GSTA3蛋白对TD肉鸡红细胞中抗菌肽的转录表达影响
4.1 材料与方法
4.1.1 试验材料
4.1.1.1 试验动物
4.1.1.2 主要试剂
4.1.1.3 主要仪器
4.1.2 试验方法
4.1.2.1 试验动物的分组及处理
4.1.2.2 样品采集
4.1.2.3 红细胞RNA提取及质量浓度检测
4.1.2.4 红细胞RNA反转录
4.1.2.5 建立Real-time PCR反应体系
4.1.2.6 实验数据的收集、处理和分析
4.2 试验结果
4.2.1 TD模型的鉴定
4.2.2 红细胞RNA质量检测结果
4.2.3 各抗菌肽基因在正常鸡红细胞中的mRNA表达
4.2.4 重组GSTA3蛋白在TD发生早期对红细胞中AvBD1、AvBD2、AvBD4、AvBD6、AvBD7、LEAP-2、NK-lysin和CATH-2的mRNA表达水平的影响
4.2.5 重组GSTA3蛋白在TD恢复期对红细胞中AvBD1、AvBD2、AvBD4、AvBD6、AvBD7、LEAP-2、NK-lysin和CATH-2的mRNA表达水平的影响
4.3 讨论
4.4 小结
5 重组EX-FABP蛋白对TD肉鸡红细胞中抗菌肽的转录表达影响
5.1 材料与方法
5.1.1 试验材料
5.1.1.1 试验动物
5.1.1.2 主要试剂
5.1.1.3 主要仪器
5.1.2 试验方法
5.1.2.1 试验动物的分组及处理
5.1.2.2 样品采集
5.1.2.3 红细胞RNA提取及质量浓度检测
5.1.2.4 红细胞RNA反转录
5.1.2.5 建立实时荧光定量PCR反应体系
5.1.2.6 实验数据的收集、处理和分析
5.2 试验结果
5.2.1 TD模型的鉴定
5.2.2 红细胞RNA质量检测结果
5.2.3 重组Ex-FABP蛋白在TD早期对红细胞中AvBD1、AvBD2、AvBD4、AvBD6、AvBD7、LEAP-2、NK-lysin和CATH-2的mRNA表达水平的影响
5.2.4 重组Ex-FABP蛋白在TD恢复期对红细胞中AvBD1、AvBD2、AvBD4、AvBD6、AvBD7、LEAP-2、NK-lysin和CATH-2的mRNA表达水平的影响
5.3 讨论
5.4 小结
全文结论
参考文献
ABSTRACT
致谢
本文编号：3678588
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