染色质重建因子BRG1介导Ile调节牛乳腺上皮细胞乳合成分子机理研究

发布时间：2022-10-05 20:54

　　试验旨在探究染色质重建因子BRG1（Brahma-related gene1）介导异亮氨酸（Isoleucine,Ile）在奶牛乳腺上皮细胞中影响乳合成分子机理。在细胞中添加不同浓度Ile,采用甘油三酯试剂盒、脂滴染色检测奶牛乳腺上皮细胞（Bovine mammary epithelial cells,BMECs）中乳脂肪含量变化,Western blot检测乳蛋白含量变化及乳合成相关信号通路分子（S6K1和SREBP-1c）表达水平变化;添加磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）抑制剂LY294002与最适浓度Ile后,检测乳合成调节相关蛋白表达;检测添加最适浓度Ile同时敲低BRG1对乳蛋白、乳脂肪合成相关信号通路分子影响。结果表明,Ile以剂量依赖性方式促进BMECs乳合成。BRG1正向调控S6K1磷酸化和SREBP-1c表达。Ile显著上调BRG1蛋白水平,而抑制PI3K途径后BRG1蛋白水平显著下降,且Western blot结果显示添加Ile通过PI3K途径调控S6K1磷酸化和SREBP-1c蛋白表达。综上,染色质重建因子BRG1可介导Ile通过调控S6K1磷酸化和SREBP-1c表... 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要试剂与仪器
    1.2 材料
    1.3 Ile对BMECs乳合成调节及其相关信号通路的影响
        1.3.1 Western blot检测
        1.3.2 甘油三酯检测
        1.3.3 脂滴染色
    1.4 Ile介导BRG1对乳蛋白、乳脂肪及其相关信号调节分子的影响
    1.5 PI3K对乳合成相关调节信号通路的影响
    1.6 统计分析
2 结果与分析
    2.1 Ile对BMECs乳合成的调节
    2.2 Ile对BMECs乳合成相关信号分子途径的影响
    2.3 干扰BRG1对乳蛋白和乳脂肪合成相关信号分子的影响
    2.4 PI3K对BMECs乳合成调节相关信号通路的影响
3 讨论
4 结论


【参考文献】：
期刊论文
[1]METTL3对乳腺上皮细胞中乳蛋白和乳脂肪合成的影响[J]. 李冬,黄鑫,李姗姗,于萌萌,李萌,张明辉,高学军.  中国畜牧兽医. 2017(05)
[2]奶牛乳腺上皮细胞培养体系中疑似干/祖细胞的鉴定[J]. 郝雨蒙,赵锋,张娜,陈丹,李庆章.  中国畜牧兽医. 2016(08)
[3]异亮氨酸对大鼠空肠形态和抗菌肽表达的影响[J]. 任曼,吕照勇,史凯,李倩倩,周可柔,吴修磊,李升和.  安徽科技学院学报. 2016(04)



本文编号：3686490