牛瘤胃液中玉米赤霉烯酮降解菌的分离、鉴定及降解特性研究

发布时间：2022-11-01 20:24

　　玉米赤霉烯酮（ZEN）是一种非甾体类雌激素的霉菌毒素,能导致动物和人类雌激素过多症以及引起其他相关中毒。ZEN广泛存在于世界各地的谷物及农副产品中,不仅给人和动物带来极大的毒害作用,也给养殖业带来巨大的经济损失。目前,ZEN的脱毒方法主要包括物理法、化学法和生物学方法。生物学方法由于安全和高效而成为研究的热点,尤其是对微生物降解方法的研究。反刍动物对霉菌毒素有较强耐受,其瘤胃中含有丰富的微生物资源。本课题的主要目的是从牛瘤胃微生物中分离出高效的ZEN降解菌,通过形态学、生物化学、分子生物学方法对筛选出的菌株进行鉴定,并对影响菌株脱毒的因素、降解特性进行研究。研究结果如下：（1）以ZEN为唯一碳源和能源,成功从牛瘤胃中分离纯化出一株能够高效降解ZEN的菌株TH-N1。该菌在温度37℃、pH 6.5、转速160r/min条件下与2 μg/mLZEN共培养72 h,能清除59%的ZEN；（2）根据形态学特点、生理生化及16S rRNA鉴定结果,确定该菌是假单胞属（Pseudomonas）细菌,命名为Pseudomonas otitidis TH-N1;（3）对影响菌株TH-N1脱毒的因素（包... 

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文符号说明
第一章 文献综述
    1 霉菌毒素
    2 玉米赤霉烯酮的研究进展
        2.1 ZEN的理化性质
        2.2 ZEN的产生菌
        2.3 ZEN的污染及限量标准
        2.4 ZEN的代谢
        2.5 ZEN的检测方法
            2.5.1 薄层色谱法
            2.5.2 高效液相色谱法
            2.5.3 气相色谱法
            2.5.4 酶联免疫检测法
            2.5.5 其他检测方法
        2.6 ZEN的毒性
            2.6.1 生殖毒性
            2.6.2 免疫毒性
            2.6.3 致癌作用
            2.6.4 细胞毒性
        2.7 ZEN的脱毒方法
            2.7.1 物理方法
            2.7.2 化学方法
            2.7.3 生物学方法
    3 牛瘤胃液降解ZEN的研究进展
    4 研究的目的与意义
第二章 牛瘤胃中ZEN高效降解菌的分离
    2.1 前言
    2.2 材料
        2.2.1 样品的来源
        2.2.2 主要试剂
        2.2.3 主要仪器与设备
        2.2.4 培养基、溶液及其配制
    2.3 试验方法
        2.3.1 TLC检测体系的建立
        2.3.2 高效液相色谱体系的建立
        2.3.3 ZEN降解菌的筛选
        2.3.4 菌株降解率的测定
    2.4 结果与分析
        2.4.1 ZEN的标准曲线
        2.4.2 菌株的筛选及脱毒结果
    2.5 讨论
第三章 ZEN高效降解菌TH-N1的鉴定
    3.1 前言
    3.2 材料与方法
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 实验试剂与设备
        3.2.3 培养基及溶液的配制
        3.2.4 形态特征鉴定
        3.2.5 生理生化鉴定
        3.2.6 分子生物学鉴定
    3.3 结果与分析
        3.3.1 形态学特征
        3.3.2 生理生化特性
        3.3.3 分子生物学特性
    3.4 讨论
第四章 TH-N1菌株降解ZEN能力的影响因素分析
    4.1 前言
    4.2 材料与方法
        4.2.1 实验材料
        4.2.2 实验试剂与设备
        4.2.3 培养基及溶液的配制
        4.2.4 TH-N1降解ZEN能力与反应时间的关系
        4.2.5 TH-N1降解ZEN能力与反应温度的关系
        4.2.6 TH-N1降解ZEN能力与起始菌液浓度的关系
        4.2.7 TH-N1降解ZEN能力与起始pH值的关系
        4.2.8 灭活菌与无细胞上清降解ZEN能力比较
        4.2.9 细胞内含物及细胞壁的降解ZEN能力比较
    4.3 结果与分析
        4.3.1 TH-N1降解ZEN能力与反应时间的关系
        4.3.2 TH-N1降解ZEN能力与反应温度的关系
        4.3.3 TH-N1降解ZEN能力与起始菌液浓度的关系
        4.3.4 TH-N1降解ZEN能力与起始pH值的关系
        4.3.5 灭活菌与无细胞上清降解ZEN能力比较
        4.3.6 细胞内含物及细胞壁的降解ZEN能力比较
    4.4 讨论
第五章 全文总结
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文



本文编号：3700041