胶体金免疫层析法快速定量检测动物组织中喹乙醇的研究

发布时间：2022-11-06 19:06

　　喹乙醇（Olaquindox）是化学合成的喹噁啉类广谱抗茵药物,作为饲料添加剂可显著促进动物生长,并可预防和治疗细菌感染性疾病。但研究发现,喹乙醇具有中等以上的蓄积毒性,使用不当会导致动物畸变,癌变甚至死亡,且残留在动物组织中的喹乙醇对人体健康也有很大的威胁。目前,动物组织中喹乙醇残留检测方法主要是色谱法和酶联免疫法（ELISA）,但这些方法对操作人员要求较高,耗费时间较长,不易普及。随着胶体金免疫层析技术（gold immune chromatographic assay,GICA）快速诊断试纸条（简称胶体金试纸条）的发展,其因具有检测简便快捷、无需检测仪器,且成本低、无污染等优点,已逐渐被应用于食品农兽药残留的监测中。本试验旨在应用胶体金免疫层析技术建立动物组织中喹乙醇残留的快速定量检测方法。1.喹乙醇多克隆抗体的制备和鉴定。为制备喹乙醇多克隆抗体,采用琥珀酸酐法合成半抗原喹乙醇半琥珀酸酯（OLA-HS）,通过活化酯法将半抗原与载体蛋白（BSA和OVA）偶联制备喹乙醇免疫原（OLA-HS-BSA）和包被原（OLA-HS-OVA）,利用紫外分光光度法测定其浓度并扫描鉴定；利用制备的免... 

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
缩略词中英文对照
前言
上篇 文献综述
    1 喹乙醇的药理学研究概况及生产应用
        1.1 喹乙醇的理化性质
        1.2 喹乙醇的作用与生产用途
        1.3 喹乙醇的吸收代谢和毒性
        1.4 喹乙醇的使用规范和分布残留
    2 喹乙醇残留检测的研究进展
        2.1 理化分析方法
        2.2 免疫学分析方法
    3 胶体金免疫层析技术
        3.1 胶体金免疫层析技术的使用概况
        3.2 胶体金免疫层析原理及试纸条结构
        3.3 胶体金的制备和鉴定
        3.4 胶体金标记的抗体
        3.5 胶体金免疫层析技术的优点
        3.6 胶体金免疫层析技术在动物源食品检测方面的应用
        3.7 胶体金免疫技术发展方向
    4 研究目的和意义
    参考文献
下篇 试验研究
    第一章 喹乙醇多克隆抗体的制备与鉴定
        1 材料与方法
            1.1 试验材料
            1.2 试验方法
        2 结果与分析
            2.1 紫外扫描OLA-BSA,OLA-OVA的图谱并计算分子结合比
            2.2 包被抗原与抗血清最佳工作浓度的确定
            2.3 五次免疫后小鼠血清效价的趋势
            2.4 抗血清纯化后抗体效价的测定
            2.5 抗体敏感性测定
            2.6 抗体特异性测定
        3 讨论
            3.1 载体蛋白的选择
            3.2 分子偶联比对抗原的影响
            3.3 喹乙醇多抗血清的制备
        4 小结
        参考文献
    第二章 胶体金试纸条的制备与初步应用
        1 材料与方法
            1.1 试验材料
            1.2 试验方法
            1.3 试纸条的质量性能检测
        2 结果与分析
            2.1 胶体金的紫外扫描图谱
            2.2 胶体金标记蛋白K_2CO_3最佳含量的确定结果
            2.3 胶体金标记抗体蛋白含量的确定
            2.4 二抗、包被浓度的确定
            2.5 纸条质量性能检测
        3 讨论
        4 小结
        参考文献
    第三章 胶体金试纸条的定量检测与市场调查
        1 材料与方法
            1.1 试验材料
            1.2 试验方法
        2 结果与分析
            2.1 样品的前处理结果
            2.2 试纸条定量检测
            2.3 试纸条的检测应用与比较
        3 讨论
        4 小结
        参考文献
全文结论
致谢
攻读硕士学位期间发表论文情况



本文编号：3704055