黄曲霉毒素B1诱导MEK/ERK/ROS介导的巨噬细胞自噬反应

发布时间：2022-12-07 20:46

　　为研究黄曲霉毒素B1（AFB1）能否诱导细胞自噬,并初步探讨其可能的作用机制。利用免疫荧光、酶标仪检测、免疫印迹等技术检测经AFB1处理过的细胞的自噬水平、相关蛋白的表达量以及活性氧（Reactive oxygen species,ROS）的产生情况。结果表明:AFB1能够引起RAW264.7细胞和Hela细胞的自噬反应,并且该自噬为完全自噬。AFB1诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7自噬是依赖细胞外信号调节激酶（Extracellular signal-regulated kinase,ERK）途径发生的,并受ROS的调节。此外,发现AFB1诱导ROS产生呈浓度依赖性,而ROS抑制剂同时抑制了ROS和自噬发生,但自噬抑制剂并没有有效地抑制ROS的产生,表明ROS处于AFB1诱导自噬的上游,对自噬起到调节作用。这表明AFB1诱导的自噬现象在细胞中普遍存在,而自噬作为机体的免疫机制,在抵抗AFB1毒力侵染的过程中发挥重要作用。 

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 质粒、细胞与细胞培养
    1.2 主要试剂
    1.3 细胞转染
    1.4 荧光显微镜观察
    1.5 免疫印迹分析
    1.6 荧光酶标仪对ROS进行检测
    1.7 数据分析
2 结果与分析
    2.1 AFB1诱导剂量依赖性自噬的发生
    2.2 AFB1诱导一个完全自噬过程
    2.3 AFB1诱导的自噬应答依赖于MEK/ERK途径
    2.4 AFB1诱导细胞发生的自噬受ROS调节
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]三氯生通过诱导巨噬细胞非mTOR途径自噬加强胞内菌杀伤[J]. 施晓晨,孙青松,安雅男,张巧丽,郭娜,于录.  吉林农业大学学报. 2016(02)
[2]活性氧与内质网应激[J]. 周映彤,肖洪彬,毕明刚.  中国药理学通报. 2011(05)
[3]细胞外信号调节激酶（ERK）与宫颈癌关系的研究进展[J]. 章丽霞,刘钧.  川北医学院学报. 2010(05)
[4]食品中黄曲霉毒素B1检测方法研究进展[J]. 张宸,岳田利,高振鹏,王军.  农产品加工(学刊). 2008(07)



本文编号：3712816