β-Conglycinin的体外消化及酶解产物免疫原性变化的研究
发布时间：2022-12-17 20:11
β-伴大豆球蛋白（β-Conglycinin）是大豆中最主要的抗营养因子之一，它的存在在很大程度上影响了大豆制品在饲料中的应用。本试验旨在研究经过胃蛋白酶、黑曲霉酸性蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶处理之后β-Conglycinin的水解度、分子量分布、分子结构和免疫原性的变化情况，从而为开发低致敏性大豆产品提供理论基础。 结合等电点和硫酸铵分段盐析的方法粗提β-Conglycinin，通过琼脂糖凝胶（SephroseCL-6B）层析体系、纯化β-Conglycinin，制备的β-Conglycinin样品纯度＞90%。 采用体外模拟消化的方法，利用胃蛋白酶、黑曲霉酸性蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶对分离纯化的β-Conglycinin进行消化。按照酶与底物比（E/S）为1:50的比例混合，然后水浴（37℃，100rpm）消化，反应时间分别为0.5、1、15、30、60和120min。制备出可满足后续试验所需的酶解产物。 SDS-PAGE结果显示：在酶与底物1:50条件下，胃蛋白酶和黑曲霉酸性蛋白酶单酶消化β-Conglycinin，α亚基对酶的敏感性较强，其次是α′亚基，而β亚基则有...
【文章页数】：45 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一章 文献综述
1.1 大豆抗原蛋白的分类
1.2 β-Conglycinin 的理化性质
1.3 β-Conglycinin 的抗营养作用
1.4 降低/消除β-Conglycinin 致敏性的方法
1.5 本研究课题的主要研究内容及意义
第二章 材料与方法
2.1 试验材料
2.2 试验所用溶液/试剂及配制
2.3 试验方法
第三章 结果与分析
3.1 β-Conglycinin 的分离纯化鉴定结果
3.2 蛋白酶活力的测定
3.3 SDS-PAGE 分析酶解处理后β-Conglycinin 亚基的变化
3.4 不同蛋白酶处理β-Conglycinin 水解度（DH%）的变化
3.5 傅里叶红外光谱（FT-IR）分析酶解β-Conlycinin 二级结构的变化
3.6 抗β-Conglycinin 特异性抗体的制备
3.7 酶解对具有免疫原性的β-Conglycinin 含量的影响
第四章 讨论
4.1 β-Conglycinin 的分离纯化
4.2 SDS-PAGE 分析酶解处理后β-Conglycinin 亚基的变化
4.3 不同蛋白酶处理β-Conglycinin 水解度的变化
4.4 FT-IR 分析β-Conglycinin 二级结构的变化
4.5 酶解对β-Conglycinin 免疫原性的影响
第五章 结论
参考文献
作者简介
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]热处理对β-伴大豆球蛋白二级结构的影响[J]. 李岩涛,秦贵信,龙国辉. 吉林农业. 2013(02)
[2]大豆抗原蛋白β-伴大豆球蛋白抗酶解肽的分离纯化及其免疫活性鉴定[J]. 王俊,潘丽,赵元,鲍男,秦贵信. 中国畜牧杂志. 2012(23)
[3]植物乳酸菌发酵对大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白免疫活性及水解度的影响[J]. 王波,秦贵信,孙泽威,卢家成,李婷琳. 经济动物学报. 2011(02)
[4]FTIR分析脉冲电场和热处理后的大豆分离蛋白结构变化[J]. 刘燕燕,曾新安,陈晓东. 光谱学与光谱分析. 2010(09)
[5]发酵豆粕对仔猪生长性能、血液生化和抗氧化指标的影响[J]. 刘海燕,秦贵信,于维,于秀芳,魏炳栋,邱玉朗,杨侠,李林,陈群. 中国饲料. 2010(17)
[6]蛋白酶联合水解大豆蛋白制备小分子肽的研究[J]. 刘静,张光华. 食品工业. 2010(04)
[7]大豆7S球蛋白碱性蛋白酶酶解产物的结构表征[J]. 段春红,姚晓琳,朱新荣,孙婉,潘思轶. 食品科学. 2009(17)
[8]大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白对酶促聚集的影响[J]. 于泓鹏,吴克刚,柴向华. 食品工业科技. 2008(10)
[9]蒸汽处理对纯化大豆抗原含量及免疫原性的影响[J]. 孙鹏,秦贵信. 中国兽医学报. 2006(05)
[10]酸预处理对碱性蛋白酶水解大豆粕蛋白的影响[J]. 姚香菊,王卫国. 饲料与畜牧. 2006(02)
博士论文
[1]金银花水提物治疗卵清蛋白过敏小鼠的实验研究[D]. 李斐.重庆医科大学 2004
硕士论文
[1]大豆蛋白—多糖共价复合物的制备及功能特性研究[D]. 王延青.河南工业大学 2010
[2]大豆中主要抗原物质对犊牛的影响[D]. 孙泽威.吉林农业大学 2003
[3]大豆对母猪和仔猪生产性能及免疫反应的影响[D]. 詹冬玲.吉林农业大学 2002
[4]利用外源蛋白酶失活大豆中抗原蛋白的研究[D]. 贾振宝.东北农业大学 2002
本文编号：3720571
【文章页数】：45 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一章 文献综述
1.1 大豆抗原蛋白的分类
1.2 β-Conglycinin 的理化性质
1.3 β-Conglycinin 的抗营养作用
1.4 降低/消除β-Conglycinin 致敏性的方法
1.5 本研究课题的主要研究内容及意义
第二章 材料与方法
2.1 试验材料
2.2 试验所用溶液/试剂及配制
2.3 试验方法
第三章 结果与分析
3.1 β-Conglycinin 的分离纯化鉴定结果
3.2 蛋白酶活力的测定
3.3 SDS-PAGE 分析酶解处理后β-Conglycinin 亚基的变化
3.4 不同蛋白酶处理β-Conglycinin 水解度（DH%）的变化
3.5 傅里叶红外光谱（FT-IR）分析酶解β-Conlycinin 二级结构的变化
3.6 抗β-Conglycinin 特异性抗体的制备
3.7 酶解对具有免疫原性的β-Conglycinin 含量的影响
第四章 讨论
4.1 β-Conglycinin 的分离纯化
4.2 SDS-PAGE 分析酶解处理后β-Conglycinin 亚基的变化
4.3 不同蛋白酶处理β-Conglycinin 水解度的变化
4.4 FT-IR 分析β-Conglycinin 二级结构的变化
4.5 酶解对β-Conglycinin 免疫原性的影响
第五章 结论
参考文献
作者简介
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]热处理对β-伴大豆球蛋白二级结构的影响[J]. 李岩涛,秦贵信,龙国辉. 吉林农业. 2013(02)
[2]大豆抗原蛋白β-伴大豆球蛋白抗酶解肽的分离纯化及其免疫活性鉴定[J]. 王俊,潘丽,赵元,鲍男,秦贵信. 中国畜牧杂志. 2012(23)
[3]植物乳酸菌发酵对大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白免疫活性及水解度的影响[J]. 王波,秦贵信,孙泽威,卢家成,李婷琳. 经济动物学报. 2011(02)
[4]FTIR分析脉冲电场和热处理后的大豆分离蛋白结构变化[J]. 刘燕燕,曾新安,陈晓东. 光谱学与光谱分析. 2010(09)
[5]发酵豆粕对仔猪生长性能、血液生化和抗氧化指标的影响[J]. 刘海燕,秦贵信,于维,于秀芳,魏炳栋,邱玉朗,杨侠,李林,陈群. 中国饲料. 2010(17)
[6]蛋白酶联合水解大豆蛋白制备小分子肽的研究[J]. 刘静,张光华. 食品工业. 2010(04)
[7]大豆7S球蛋白碱性蛋白酶酶解产物的结构表征[J]. 段春红,姚晓琳,朱新荣,孙婉,潘思轶. 食品科学. 2009(17)
[8]大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白对酶促聚集的影响[J]. 于泓鹏,吴克刚,柴向华. 食品工业科技. 2008(10)
[9]蒸汽处理对纯化大豆抗原含量及免疫原性的影响[J]. 孙鹏,秦贵信. 中国兽医学报. 2006(05)
[10]酸预处理对碱性蛋白酶水解大豆粕蛋白的影响[J]. 姚香菊,王卫国. 饲料与畜牧. 2006(02)
博士论文
[1]金银花水提物治疗卵清蛋白过敏小鼠的实验研究[D]. 李斐.重庆医科大学 2004
硕士论文
[1]大豆蛋白—多糖共价复合物的制备及功能特性研究[D]. 王延青.河南工业大学 2010
[2]大豆中主要抗原物质对犊牛的影响[D]. 孙泽威.吉林农业大学 2003
[3]大豆对母猪和仔猪生产性能及免疫反应的影响[D]. 詹冬玲.吉林农业大学 2002
[4]利用外源蛋白酶失活大豆中抗原蛋白的研究[D]. 贾振宝.东北农业大学 2002
本文编号：3720571
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