一株藏猪源纤维素降解菌的筛选鉴定及其纤维素酶的酶学特性研究

发布时间：2022-12-18 00:03

　　藏猪是我国特有的高原放牧型食草猪种，分析藏猪胃肠道微生物特性，研究藏猪的食草机理，对于发展我国节粮型养猪业意义十分重大。本试验以藏猪胃肠道内容物为试验材料，筛选出一株纤维素降解菌，对所产纤维素酶进行了纯化和酶学特性研究。主要研究结果如下： 1.采用麸皮培养基，经富集培养后，从12株纤维素酶活性菌中得到一株透明圈直径和酶活力均最高的菌株，经形态学及分子生物学鉴定，命名为枯草芽孢杆菌BY-4。 2.通过比较分析发现，小麦秸秆、麸皮、玉米秸秆都能够很好地诱导菌株BY-4产生纤维素酶，其中麸皮为最佳碳源，在48h酶产量达到最高，酶活为8.6U/mL，其次为小麦秸秆，酶活为7.1U/mL。粗酶液对本试验选用的底物均具有降解作用，其中对麸皮和小麦秸秆的消化作用最强，相对酶活分别为108.1±14.2、90.3±5.3，同时，该纤维素酶也能够降解微晶纤维素产生还原糖，相对酶活达41.8±2.4。应用扫描电镜从形态学角度验证了粗酶液对麸皮和小麦秸秆的消化作用。 3.发酵上清液经HiTrap Phenyl HP疏水作用层析、HiPrep16/60Sephacryl S-100凝胶过滤层... 

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
文献综述
    第一章 纤维素及纤维素酶研究进展
        1.1 纤维素介绍
        1.2 纤维素酶的组成和降解机理
        1.3 纤维素酶研究新方法
        1.4 纤维素酶的纯化研究
    第二章 产纤维素酶微生物和纤维素酶在畜牧生产中的应用
        2.1 产纤维素酶的微生物
        2.2 纤维素酶在畜牧生产中的应用
            2.2.1 纤维素酶应用于饲料工业的作用机理
            2.2.2 纤维素酶在畜牧行业的应用方式
试验研究
    第三章 藏猪源纤维素酶产生菌的分离鉴定
        3.1 引言
        3.2 材料与方法
            3.2.1 试验材料
            3.2.2 试验方法
        3.3 结果
            3.3.1 纤维素酶产生菌的筛选
            3.3.2 菌株鉴定
        3.4 讨论
        3.5 小结
    第四章 不同碳源对产酶量的影响及粗酶液对底物的降解能力
        4.1 引言
        4.2 材料与方法
            4.2.1 试验材料
            4.2.2 试验方法
        4.3 结果
            4.3.1 葡萄糖标准曲线的绘制
            4.3.2 不同碳源对产酶量的影响
            4.3.3 纤维素酶对不同底物的分解作用
            4.3.4 扫描电镜观察酶处理前后麸皮及小麦秸秆形态变化
        4.4 讨论
        4.5 小结
    第五章 纤维素酶的纯化和酶学特性研究
        5.1 引言
        5.2 材料和方法
            5.2.1 试验材料
            5.2.2 试验方法
        5.3 结果
            5.3.1 纤维素酶的分离纯化
            5.3.2 SDS-PAGE 和酶谱分析
            5.3.3 纤维素酶酶学特性研究
        5.4 讨论
        5.5 小结
    第六章 纤维素酶基因的克隆和序列分析
        6.1 引言
        6.2 材料与方法
            6.2.1 试验材料
            6.2.2 试验方法
        6.3 结果
            6.3.1 纤维素酶基因扩增
            6.3.2 内切葡聚糖酶基因序列分析
        6.4 讨论
        6.5 小结
结论
创新点
进一步研究的问题
参考文献
附录
致谢
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]藏香猪源纤维素分解菌的分离鉴定及酶学特性分析[J]. 杨伟平,孟凡旭,马丽,姬生跃,曹斌云.  动物营养学报. 2014(03)
[2]乳酸菌和纤维素酶对直穗鹅观草青贮的改善效果[J]. 韩立英,玉柱,周禾.  草业科学. 2013(09)
[3]纤维素酶在畜牧生产中的应用[J]. 袁翠林,王利华.  饲料研究. 2013(05)
[4]藏猪食草机理的研究——藏猪肠道微生物的多样性分析[J]. 肖文萍,刘海艳,赵海波,白龙,彭甲银,刘雪青,王建刚,宋宇轩,曹斌云.  中国兽医学报. 2013(03)
[5]风味蛋白酶水解合浦珠母贝肉制备抗菌肽人工神经网络法优化工艺[J]. 吴燕燕,宫晓静,李来好,杨贤庆.  食品科学. 2011(20)
[6]我国农业秸秆的现状与利用方法[J]. 刘耀堂,李晓梦.  北方环境. 2011(07)
[7]纤维素复合酶制剂处理玉米秸秆饲喂肉牛增重效果研究[J]. 李丰成.  中国牛业科学. 2011(04)
[8]一株片烟中纤维素降解菌的筛选鉴定及其初步应用研究[J]. 王莹,范坚强,包可翔,王金华,王志.  现代农业科技. 2011(08)
[9]纤维素酶及相关基因克隆的研究进展[J]. 曾盈宇,陈介南,何钢,张伟涛,詹鹏.  湖南农业科学. 2009(12)
[10]含氰废水处理方法的进展与评述[J]. 薛文平,薛福德,姜莉莉,付瑞娟,褚亮亮,王晓霞,马洪杰.  黄金. 2008(04)

硕士论文
[1]一株新的纤维分解菌的分离及纤维素酶的克隆与表达[D]. 刘海艳.西北农林科技大学 2012
[2]一株生孢噬纤维菌的分离纯化、鉴定及降解纤维素滤纸过程的研究[D]. 张影.东北师范大学 2003



本文编号：3720919