Cofilin在鸭肠炎病毒（DEV）感染过程中的作用
发布时间：2022-12-18 02:09
鸭肠炎病毒（Duck enteritis virus,DEV）也称鸭瘟病毒（Duck plague virus,DPV）或鸭1型疱疹病毒（Anatid herpesvirus 1,AHV-1）,具有广泛的组织嗜性,是目前威胁和危害水禽养殖业健康发展的重要病原之一,但其感染机制尚未完全清楚。Cofilin是一种存在于真核细胞中的肌动蛋白解聚因子,调控细胞骨架的组装,参与细胞迁移、粘附、分裂和凋亡等生命活动。研究表明,cofilin调控的宿主细胞内肌动蛋白重排能影响病原体的感染过程。但目前尚未见到有关cofilin在DEV感染过程中作用及其分子机制研究的文献报道。因此,本研究拟在前期基础上,首先采用荧光定量PCR检测分析DEV感染对cofilin基因转录的影响,然后通过cofilin RNA干扰分析DEV增殖情况,以期为进一步阐明DEV致病机制提供重要的理论数据。1.鸭Cofilin2克隆分析及荧光定量PCR方法建立根据GenBank鸡源cofilin2基因（NM001004406.1）序列设计引物,RT-PCR方法扩增鸭源cofilin2全基因序列,生物信息学分析三...
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Summary
缩略词
文献综述
实验研究
第一章 鸭Cofilin2克隆分析及荧光定量PCR方法建立
1 材料
1.1 菌株和动物
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器
2 方法
2.1 Cofilin2全基因克隆分析
2.2 Cofilin2 FQ-PCR质粒制备
2.3 Cofilin2 FQ-PCR检测方法的建立
3.结果
3.1 Cofilin2全基因克隆
3.2 Cofilin2基因生物信息学分析
3.3 Cofilin2 FQ-PCR质粒制备
3.4 Cofilin FQ-PCR检测方法的建立
4 讨论
4.1 关于cofilin家族的研究
4.2 关于cofilin2基因的研究
4.3 关于cofilin2分子克隆分析
4.4 关于荧光定量PCR技术
第二章 Cofilin在DEV感染鸭组织中的转录
1 材料
1.1 实验动物
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器
2 方法
2.1 样品制备
2.2 DEV感染检测
2.3 FQ-PCR检测cofilin的转录
3 结果
3.1 DEV感染检测及cofilin总RNA检测
3.2 Cofilin FQ-PCR产物特异性分析
3.3 Cofilin2基因在DEV感染鸭中的转录
4 讨论
4.1 关于鸭肠炎病毒的研究
4.2 关于cofilin在正常鸭组织转录的研究
4.3 关于DEV对cofilin转录影响的研究
第三章 cofilin在DEV复制过程的作用
1 材料
1.1 毒株和动物
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器
2 方法
2.1 cofilin-shRNA构建
2.2 cofilin-shRNA筛选
2.3 cofilin-shRNA干扰下DEV增殖动态
3 结果
3.1 cofilin-shRNA构建
3.2 cofilin-shRNA筛选
3.3 cofilin-shRNA干扰下DEV增殖动态
4 讨论
4.1 关于RNA干扰
4.2 关于cofilin与病原感染
4.3 关于cofilin对DEV病毒感染的作用
全文结论
参考文献
附录一 攻读学位期间参与科研项目
附录二 各种培养基、溶液及试剂的配制
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸭肠炎病毒感染鸭脾脏的转录组分析[J]. 吴良涛,郑敏,华敏,万润,程振涛,周碧君,文明. 病毒学报. 2017(03)
[2]山羊BMPR-IB基因编码蛋白结构及功能的生物信息学分析[J]. 杨佳栋,刘月琴,张英杰. 中国畜牧兽医. 2017(05)
[3]奶牛乳头状瘤病理学诊断及病原分子检测研究[J]. 贺志昊,刘贤侠,乔军,孟庆玲,张再超,杨海波,陈创夫,都曼·努尔坎杰. 石河子大学学报(自然科学版). 2013(06)
[4]蛋白质二级结构预测的多核学习方法[J]. 连云涓,熊惠霖. 计算机应用. 2013(S1)
[5]鸭肠炎病毒核衣壳蛋白受体的筛选与鉴定[J]. 张荷,毛君婷,杨颖,王开功,周碧君,文明. 病毒学报. 2012(01)
[6]鸭肠炎病毒核衣壳蛋白密码子偏爱性分析[J]. 高颖,代淑燕,张荷,程振涛,周碧君,文明. 山地农业生物学报. 2011(02)
[7]鸭肠炎病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表达[J]. 代淑燕,寨鸿瑞,文明,刘忠伟,周碧君. 生物技术. 2008(04)
[8]鸭瘟病毒弱毒株在免疫雏鸭体内的分布和排毒规律[J]. 程安春,汪铭书,刘菲,宋涌,袁桂萍,韩晓英,徐超,廖永洪,文明,周伟光,贾仁勇. 中国兽医学报. 2005(03)
[9]荧光定量PCR技术及其应用[J]. 韩俊英,曾瑞萍. 国外医学.遗传学分册. 2000(03)
[10]热激诱导烟草悬浮细胞的凋亡[J]. 陈浩明,颜长辉,姜晓芳,夏慧莉,朱海珍,吴逸,戴尧仁. 科学通报. 1999(02)
博士论文
[1]DEV基因文库构建、核衣壳蛋白基因的发现及克隆与表达[D]. 文明.四川农业大学 2005
本文编号：3721118
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Summary
缩略词
文献综述
实验研究
第一章 鸭Cofilin2克隆分析及荧光定量PCR方法建立
1 材料
1.1 菌株和动物
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器
2 方法
2.1 Cofilin2全基因克隆分析
2.2 Cofilin2 FQ-PCR质粒制备
2.3 Cofilin2 FQ-PCR检测方法的建立
3.结果
3.1 Cofilin2全基因克隆
3.2 Cofilin2基因生物信息学分析
3.3 Cofilin2 FQ-PCR质粒制备
3.4 Cofilin FQ-PCR检测方法的建立
4 讨论
4.1 关于cofilin家族的研究
4.2 关于cofilin2基因的研究
4.3 关于cofilin2分子克隆分析
4.4 关于荧光定量PCR技术
第二章 Cofilin在DEV感染鸭组织中的转录
1 材料
1.1 实验动物
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器
2 方法
2.1 样品制备
2.2 DEV感染检测
2.3 FQ-PCR检测cofilin的转录
3 结果
3.1 DEV感染检测及cofilin总RNA检测
3.2 Cofilin FQ-PCR产物特异性分析
3.3 Cofilin2基因在DEV感染鸭中的转录
4 讨论
4.1 关于鸭肠炎病毒的研究
4.2 关于cofilin在正常鸭组织转录的研究
4.3 关于DEV对cofilin转录影响的研究
第三章 cofilin在DEV复制过程的作用
1 材料
1.1 毒株和动物
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器
2 方法
2.1 cofilin-shRNA构建
2.2 cofilin-shRNA筛选
2.3 cofilin-shRNA干扰下DEV增殖动态
3 结果
3.1 cofilin-shRNA构建
3.2 cofilin-shRNA筛选
3.3 cofilin-shRNA干扰下DEV增殖动态
4 讨论
4.1 关于RNA干扰
4.2 关于cofilin与病原感染
4.3 关于cofilin对DEV病毒感染的作用
全文结论
参考文献
附录一 攻读学位期间参与科研项目
附录二 各种培养基、溶液及试剂的配制
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸭肠炎病毒感染鸭脾脏的转录组分析[J]. 吴良涛,郑敏,华敏,万润,程振涛,周碧君,文明. 病毒学报. 2017(03)
[2]山羊BMPR-IB基因编码蛋白结构及功能的生物信息学分析[J]. 杨佳栋,刘月琴,张英杰. 中国畜牧兽医. 2017(05)
[3]奶牛乳头状瘤病理学诊断及病原分子检测研究[J]. 贺志昊,刘贤侠,乔军,孟庆玲,张再超,杨海波,陈创夫,都曼·努尔坎杰. 石河子大学学报(自然科学版). 2013(06)
[4]蛋白质二级结构预测的多核学习方法[J]. 连云涓,熊惠霖. 计算机应用. 2013(S1)
[5]鸭肠炎病毒核衣壳蛋白受体的筛选与鉴定[J]. 张荷,毛君婷,杨颖,王开功,周碧君,文明. 病毒学报. 2012(01)
[6]鸭肠炎病毒核衣壳蛋白密码子偏爱性分析[J]. 高颖,代淑燕,张荷,程振涛,周碧君,文明. 山地农业生物学报. 2011(02)
[7]鸭肠炎病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表达[J]. 代淑燕,寨鸿瑞,文明,刘忠伟,周碧君. 生物技术. 2008(04)
[8]鸭瘟病毒弱毒株在免疫雏鸭体内的分布和排毒规律[J]. 程安春,汪铭书,刘菲,宋涌,袁桂萍,韩晓英,徐超,廖永洪,文明,周伟光,贾仁勇. 中国兽医学报. 2005(03)
[9]荧光定量PCR技术及其应用[J]. 韩俊英,曾瑞萍. 国外医学.遗传学分册. 2000(03)
[10]热激诱导烟草悬浮细胞的凋亡[J]. 陈浩明,颜长辉,姜晓芳,夏慧莉,朱海珍,吴逸,戴尧仁. 科学通报. 1999(02)
博士论文
[1]DEV基因文库构建、核衣壳蛋白基因的发现及克隆与表达[D]. 文明.四川农业大学 2005
本文编号：3721118
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3721118.html
