草食动物厌氧真菌与共存甲烷菌的分离鉴定及其代谢产物分析

发布时间：2023-01-06 19:39

　　草食动物瘤胃内栖息的微生物包括厌氧真菌、古菌、原虫和真细菌。在长期进化过程中,这些微生物间形成了相互依存,相互制约的复杂关系,并通过代谢等方面的协同作用在提高瘤胃粗纤维降解能力中发挥了重要作用。瘤胃内厌氧真菌由于其强大的粗纤维降解能力,在提高反刍动物粗饲料利用价值中扮演着尤为重要的角色。甲烷作为瘤胃代谢的终产物之一,它的产生既是动物能量的浪费,同时,也对温室效应有一定影响,因此瘤胃甲烷菌及甲烷形成机制的研究受到广泛关注。甲烷菌作为瘤胃中主要的氢利用菌,可利用厌氧真菌的代谢产物如H2、CO2、甲酸和乙酸等产生甲烷。因此,瘤胃内厌氧真菌与甲烷菌在瘤胃粗纤维降解产生甲烷过程中存在较为密切的关系。目前有关于厌氧真菌与甲烷菌代谢关系的研究主要集中在单独厌氧真菌与某些已知甲烷菌的简单混合培养,有关于自然条件下共生的厌氧真菌与甲烷菌的相互代谢机制则鲜有报道。因此本研究拟通过厌氧滚管技术获得厌氧真菌与甲烷菌自然条件下的简单共培养物,并对其中厌氧真菌与甲烷菌进行鉴定以及动态发酵研究,探讨瘤胃内厌氧真菌与甲烷菌间的共存关系,为进一步揭示瘤胃内微生物间代谢关系奠定基础。第一部分：瘤胃降解粗纤维产甲烷的厌氧真... 

【文章页数】：92 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
中英文对照表
引言
文献综述
    1 厌氧真菌
        1.1 厌氧真菌的发现与分类
        1.2 厌氧真菌多样性
        1.3 厌氧真菌的代谢
        1.4 厌氧真菌分子学研究手段
    2 瘤胃甲烷菌
        2.1 甲烷菌的简介与分类
        2.2 甲烷菌的分布
        2.3 SGMT簇与RO簇甲烷短杆菌
    3 厌氧真菌与甲烷菌的相互关系
        3.1 厌氧真菌与甲烷菌体外共培养特性的研究
        3.2 厌氧真菌与甲烷菌的共培养体系的建立
        3.3 厌氧真菌与甲烷菌的自然共生关系的研究
        3.4 共培养物中甲烷菌的鉴定方法
    4 代谢组学
        4.1 代谢组学在微生物学的研究进展
        4.2 微生物代谢组学的分析方法
        4.3 小结
    5 本文研究的目的和意义
    参考文献
第一章 瘤胃降解粗纤维产甲烷的厌氧真菌与甲烷菌共培养物的分离鉴定
    摘要
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 主要试剂和仪器
    2 结果
        2.1 共培养中厌氧真菌的鉴定
        2.2 共培养物中甲烷菌的鉴定
        2.3 共培养中厌氧真菌与甲烷菌相互关系
    3 讨论
    参考文献
    ABSTRACT
第二章 GC-MS比较研究厌氧真菌与甲烷菌共培养物及厌氧真菌纯培养物代谢差异
    摘要
    1 材料和方法
        1.1 培养基成分及其配制
        1.2 菌种来源
        1.3 微生物培养
        1.4 代谢组学样品收集
        1.5 GC-MS样品配制
        1.6 GC/MS分析与数据采集
        1.7 化合物鉴定与数据处理
        1.8 数据处理
    2 结果与分析
    3 讨论
    参考文献
    ABSTRACT
第三章 厌氧真菌代谢产物中有机酸的高效液相色谱检测方法的建立
    摘要
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 高效液相色谱法的建立
        1.3 发酵液中乙醇浓度测定
        1.4 数据处理
        1.5 仪器与试剂
    2 结果与分析
        2.1 检测波长的选择
        2.2 流动相的选择
        2.3 色谱柱的选择
        2.4 保留时间
        2.5 标准曲线及检测限
        2.6 精密度和回收率测定
        2.7 厌氧真菌纯培养与甲烷菌共培养中上清液及细胞内容物中的代谢产物定量分析
    3 讨论
    参考文献
    ABSTRACT
第四章 厌氧真菌与甲烷菌共培养物及厌氧真菌纯培养物发酵动态的比较研究
    摘要
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 主要试剂和仪器
        1.4 数据处理
    2 结果分析
        2.1 厌氧真菌与甲烷菌的共培养组及厌氧真菌纯培养组发酵96h的pH动态变化
        2.2 厌氧真菌与甲烷菌的共培养组及厌氧真菌纯培养组发酵96h累积产气量动态变化
        2.3 厌氧真菌与甲烷菌的共培养组及厌氧真菌纯培养组发酵96h甲烷产量的动态变化
        2.4 共培养组与纯培养组发酵96h过程中有机酸的发酵变化规律
    3 讨论
    参考文献
    ABSTRACT
全文结论
致谢
攻读硕士学位期间发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]反相高效液相色谱法测定厌氧菌有机酸代谢产物[J]. 王忠永,郑佳音,周铁丽,黄小侠,刘佳明.  中国微生态学杂志. 2007(06)
[2]瘤胃体外发酵产物中的甲烷和有机酸含量的快速测定[J]. 胡伟莲,王佳堃,吕建敏,郭嫣秋,刘建新.  浙江大学学报(农业与生命科学版). 2006(02)

博士论文
[1]延胡索酸二钠对山羊瘤胃甲烷生成的调控研究及相关瘤胃微生物菌群分析[D]. 杨承剑.南京农业大学 2011
[2]厌氧真菌与产甲烷菌共培养系统的建立及其代谢与菌群变化的研究[D]. 成艳芬.南京农业大学 2008

硕士论文
[1]茶叶中6种主要儿茶素的高效液相色谱方法建立及应用[D]. 刘丽霞.南京理工大学 2013
[2]自然结合的厌氧真菌与甲烷菌共培养物体外代谢特性及产乳酸潜力的初步研究[D]. 刘军花.南京农业大学 2009



本文编号：3728236