兔斯氏艾美尔球虫野外毒株的分离与纯化

发布时间：2023-01-07 08:57

　　本实验从患有兔斯氏艾美尔球虫病（Eimeria stiedai,ES）的肝脏中分离出球虫,加入2.5%重铬酸钾溶液孵育球虫卵囊使其孢子化,然后用蔗糖作介质,通过密度梯度离心法纯化球虫的子孢子,再将纯化的子孢子侵染入健康家兔体内,再次分离培养肝脏细胞,观察体外子孢子侵入肝脏细胞的生长过程。实验结果显示,可得到纯化的艾美尔球虫卵囊及孢子,并在体外用子孢子感染肝细胞,为以后对子孢子侵染肝细胞的机理的研究打下基础。 

【文章页数】：35 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
目录
摘要
文献综述
    1 兔球虫病研究进展
        1.1 病原学
        1.2 发病原因
        1.3 流行病学
            1.3.1 流行特点
            1.3.2 国内流行概况
            1.3.3 国内针对兔球虫病的概况性研究
        1.4 临床症状
            1.4.1 肝型
            1.4.2 肠型
            1.4.3 混合型
        1.5 病理变化
            1.5.1 肝型
            1.5.2 肠型
        1.6 实验室检验方法
        1.7 防治措施
            1.7.1 预防措施
            1.7.2 治疗措施
    2 艾美耳球虫的研究进展
        2.1 艾美耳球虫的发育
            2.1.1 无性繁殖阶段(裂殖生殖阶段,即复分裂阶段)
            2.1.2 有性繁殖阶段(配子生殖阶段)
            2.1.3 孢子繁殖阶段(孵化阶段)
        2.2 我国对兔球虫各阶段虫体感染机体血液生物化学及细胞化学研究
        2.3 艾美耳球虫卵囊孵化条件
            2.3.1 重铬酸钾浓度的选择
            2.3.2 培养温度的选择
            2.3.3 培养时间
            2.3.4 肝脏组织和胆汁对E.stiedai卵囊体外培养的影响
        2.4 艾美耳球虫的致病性
前言
1 实验材料
    1.1 实验样品
    1.2 主要试剂
    1.3 主要仪器
    1.4 主要试剂的配制
    1.5 试验步骤
        1.5.1 球虫卵囊的提取
        1.5.2 球虫子孢子的提取
    1.6 组织病理观察(石蜡切片)
        1.6.1 取材,固定与冲洗
        1.6.2 脱水
        1.6.3 透明,浸蜡与包埋
        1.6.4 切片,展片,贴片,烤片
        1.6.5 苏木精—伊红染色(HE)
    1.7 肝细胞接种兔子E.stiedai孢子试验
2 试验结果与分析
    2.1 兔E.stiedai对肝脏的侵害
    2.2 兔E.stiedai球虫的子孢子化的过程
    2.3 纯化后兔E.stiedai球虫的发育过程
    2.4 肝脏组织病变
    2.5 肝细胞接种子孢子的结果
3 讨论
    3.1 关于E.stiedai生物学特性
    3.2 关于E.stiedai的孢子生殖
    3.3 E.stiedai对家兔肝脏的损害
        3.3.1 感染E.stiedai家兔肝脏的病理解剖学变化
        3.3.2 感染E.stiedai家兔肝脏的病理组织学变化
    3.4 E.stiedai孢子的纯化
    3.5 接种斯氏艾美尔球虫子孢子对家兔肝细胞的影响
4 结论
参考文献
Abstract
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]幼兔球虫病的防治[J]. 史艳荣.  吉林畜牧兽医. 2010(07)
[2]防治兔球虫病应了解及注意的问题[J]. 黄招玲.  福建畜牧兽医. 2009(04)
[3]球虫病对兔的危害与防治[J]. 毕旺盛.  吉林畜牧兽医. 2009(07)
[4]兰州地区兔球虫种类调查[J]. 乔军,才学鹏,田广孚,孟庆玲,景志忠,严鸿斌,毕研丽.  中国兽医杂志. 2008(08)
[5]兔球虫病的综合防治[J]. 刘发全.  山东畜牧兽医. 2008(07)
[6]兔球虫病的实验室诊断[J]. 王广秀,徐镔蕊,王世宠,杜宁,吕俊,郭艳,王雨舟.  中国养兔杂志. 2008(03)
[7]吉林省九台市兔球虫种类的初步调查[J]. 郑星道,刘德惠,刘学龙,高炳林.  中国兽医杂志. 2008(02)
[8]兔球虫病的诊断及防治[J]. 刘丽萍,陈海彬,谭海云.  畜牧兽医科技信息. 2007(11)
[9]兔球虫特性及其防治[J]. 陈仰兴.  福建农业科技. 2007(05)
[10]呼和浩特市某养兔场球虫感染情况调查与种类鉴定[J]. 禹旺盛,殷翠琴,马永梅,郝成,李海燕.  动物医学进展. 2007(S1)



本文编号：3728347