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绵羊HSP60基因在不同组织的定位表达及相关功能验证

发布时间:2023-01-12 11:19
  中国是世界上绵羊种类最多的国家,随着全国人口的不断增长和生产科学的进步,人们对于绵羊肉食品的需求越来越大。但日益严重的病害和不断恶化的自然条件给我绵羊养殖业造成了重大经济损失。热休克蛋白家族(HSPs)是生物体内的重要抗感染和抗逆基因,HSP60作为HSPs中一个最为保守的大家族,广泛存在于各类生物中,积极参与着机体的应激免疫反应且发挥重要作用,对绵羊HSP60的深入研究有助于我国绵羊养殖业的健康发展。鉴于此,本试验以绵羊HSP60基因为对象,通过Western Blotting和实时荧光定量PCR分别检测HSP60在绵羊不同组织蛋白和基因水平的表达情况,利用免疫组化对HSP60蛋白在不同组织进行定位分析,以2-3月龄绵羊胎儿心肌细胞为对象,构建HSP60过表达载体pIRES2-EGFP-HSP60,合成靶向SiRNA沉默HSP60,进行HSP60基因功能验证。研究结果如下:研究发现(1)通过基因和蛋白两个层面的研究,发现绵羊各组织器官中HSP60表达存在差异;心脏中HSP60基因和蛋白表达量均明显高于其他组织,推测HSP60对维持心脏的正常功能有重要作用。(2)成功构建HSP60过表... 

【文章页数】:59 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
abstract
前言
第一篇 文献综述
    第一章 热休克蛋白研究进展
        1.1 热休克蛋白家族
        1.2 小分子热休克蛋白
        1.3 热休克蛋白40
        1.4 热休克蛋白60
        1.5 热休克蛋白70
        1.6 热休克蛋白90
        1.7 热休克蛋白110
    第二章 绵羊主要功能基因的研究进展
        2.1 影响绵羊产肉性状的功能基因
        2.2 影响绵羊繁殖性状的功能基因
        2.3 影响绵羊泌乳性状的功能基因
        2.4 影响绵羊产毛或产绒的功能基因
    第三章 RNA干扰技术研究进展
        3.1 RNA干扰发展背景
        3.2 RNA干扰技术原理
        3.3 RNA干扰的应用
第二篇 研究内容
    第一章 绵羊HSP60基因在不同组织的定位表达
        1.1 材料与方法
        1.2 结果与分析
        1.3 讨论
        1.4 小结
    第二章 HSP60过表达载体的构建及其功能验
        2.1 材料与方法
        2.2 结果
        2.3 讨论
        2.4 小结
    第三章 SiRNA介导的HSP60基因敲低
        3.1 材料与方法
        3.2 结果
        3.3 讨论
        3.4 小结
结论
参考文献
附录A
附录B
附录C
作者简介
致谢


【参考文献】:
期刊论文
[1]热休克蛋白70和骨桥蛋白在甲状腺癌中的表达及临床意义[J]. 黄卓雅,胡琛,易智君,张耀忠,廖鹏娟,钟晓华,赵文丽.  诊断病理学杂志. 2017(09)
[2]miRNA-1 HSP70与急性心肌梗死相关性研究[J]. 徐好杰,蒋有绪.  现代医药卫生. 2017(04)
[3]HSP60口服耐受诱导调节T细胞Foxp3去甲基化抑制动脉粥样硬化[J]. 李小林,王博远,程伟宁,吴纯,李大主,朱静,汪俊军.  中国免疫学杂志. 2016(05)
[4]牦牛HSP27基因的克隆及其在雌性生殖器官中的表达[J]. 何翃闳,崔燕,潘阳阳,樊江峰,胡威,张译夫,刘鹏刚,李秦,余四九.  中国农业科学. 2015(20)
[5]CYP6CM1基因RNA干扰载体的构建及转基因烟草对烟粉虱抗药性的影响[J]. 张保龙,胡雪虹,陈天子,杨郁文,常蕾,刘方,王坤波.  江苏农业学报. 2012(04)
[6]西农莎能奶山羊和布尔山羊GnRH基因多态性与产羔数的相关分析[J]. 颜泉梅,陈秋菊,崔易虹,朱广琴,朱春梅,安小鹏,杨莎,王建刚,宋宇轩,曹斌云.  中国兽医学报. 2011(11)
[7]雄性生殖中热休克蛋白作用的研究进展[J]. 朱晔敏,丁之德.  国际生殖健康/计划生育杂志. 2010(01)
[8]转EGFP基因猪胎儿神经干细胞的体外分化[J]. 郑月茂,赵雪,贺小英,权富生,刘军,张涌.  中国农业科学. 2009(09)
[9]持续热应激状态下肉鸡心脏和肾脏组织损伤与hsp60 mRNA转录[J]. 严建燕,鲍恩东,于纪棉,朱琳.  南京农业大学学报. 2009(03)
[10]HSP60免疫学特性与疾病的关系[J]. 王鹏,井申荣,曾韦锟.  云南大学学报(自然科学版). 2009(S1)

博士论文
[1]大鼠心肌细胞Hsp60/Hsp10的表达及抗热应激损伤机理研究[D]. 程艳芬.南京农业大学 2015
[2]急性冷应激大鼠组织和细胞热休克蛋白90表达及应激性损伤机理研究[D]. 陈玲.南昌大学 2012
[3]持续热应激肉鸡组织中热休克蛋白表达规律与应激性损伤机理研究[D]. 于纪棉.南京农业大学 2009
[4]应激肉牛几种组织中HSPs表达的研究[D]. 杨焕民.中国人民解放军军需大学 2002

硕士论文
[1]HSP60在大鼠耳蜗发育和药物性聋过程中的表达[D]. 田克勇.第四军医大学 2016
[2]胞外HSP60上调心肌TLR2和TLR4受体表达的研究[D]. 郭昕.宁夏医科大学 2013
[3]过度训练大鼠肾组织热休克蛋白70的表达及山莨菪碱干预的研究[D]. 杨洁.河北医科大学 2012
[4]大鼠肾缺血后处理对热休克蛋白表达的影响及作用[D]. 郭琼梅.河北医科大学 2011



本文编号:3729855

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