H9N2亚型猪流感病毒对犬的致病性及在犬之间的传播特性研究

发布时间：2023-01-25 18:01

　　近年来，关于犬感染流感病毒的报道日趋增多，犬能感染多种亚型的流感病毒如H3N8，H3N2，H5N1，H1N1和H5N2等，此外有研究证实犬对H9N2亚型禽流感病毒也是易感的，并且此病毒可以在犬与犬之间进行水平传播。基因序列分析表明H9N2亚型猪流感病毒（H9N2SIV）所有基因片段与早期H9N2亚型禽流感病毒高度同源。然而并没有关于H9N2SIV感染犬的报道。为了检测A/Swine/Shandong/JT/2007（H9N2SIV）对犬的致病性以及在犬与犬之间的传播特性，本试验采用常规病毒学方法、免疫学方法、病理学方法对试验犬的临床症状、体温、排毒、病理学变化等进行了检测。 1、H9N2SIVs对犬的致病性研究 在致病性试验中，4只犬分别用1ml注射器以滴鼻途径接种A/Swine/Shandong/JT/2007（H9N2SIV）病毒，每只犬接种107.67EID50/ml病毒尿囊液，每个鼻孔500ul，共接种1ml。每天观察试验动物的临床症状，从试验的第1d开始每天收集鼻拭子检测动物的排毒情况，在试验的3d、5d、7d、14d采集犬的血清检测抗体情况并分别在接种后5d、7... 

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符号说明
中文摘要
Abstract
1 流感病毒综述
    1.1 流感病毒的基本特征
        1.1.1 流感病毒的分类与命名
        1.1.2 流感病毒的理化特性
        1.1.3 流感病毒编码的蛋白及其功能
    1.2 H9N2 亚型流感病毒在国内外研究进展
        1.2.1 H9N2 流感病毒在世界的流行情况
        1.2.2 H9N2 流感病毒在我国的流行情况
    1.3 H9N2 流感病毒的危害
        1.3.1 H9N2 流感病毒对禽类的危害
        1.3.2 H9N2 流感病毒对猪的危害
        1.3.3 H9N2 流感病毒对人的危害
    1.4 H9N2 流感的诊断
        1.4.1 病毒分离鉴定
        1.4.2 HA 试验和 HI 试验
        1.4.3 神经氨酸酶抑制试验（NI）
        1.4.4 酶联免疫吸附试验（ELISA）
        1.4.5 RT-PCR
    1.5 本研究的目的与意义
2 实验材料和方法
    2.1 材料及试验动物
    2.2 试剂
    2.3 主要仪器
    2.4 主要试剂的配制
        2.4.1 阿氏液的配制
        2.4.2 0.9%生理盐水的配制
        2.4.3 1%鸡红细胞悬浮液的制备
        2.4.4 0.01M PBS PH7.2 的缓冲液的配制
        2.4.5 4%多聚甲醛固定液的配制
        2.4.6 Harris 氏苏木素染料的配制
        2.4.7 伊红染液的配制
        2.4.8 电泳缓冲液（TAE）的配制
        2.4.9 1%琼脂糖溶液的配制
        2.4.10 溴化乙锭（EB）（10mg/ml）的配制
    2.5 方法
        2.5.1 病毒的复苏与增殖
        2.5.2 A/Swine/Shandong/JT/2007 鸡胚半数感染量的测定（EID_50）
        2.5.3 试验动物的分组及处理
        2.5.4 试验犬的临床症状观察
        2.5.5 试验犬排毒情况的检测
        2.5.6 血清学检测
        2.5.7 病理组织学检测
        2.5.8 病毒在各组织器官中的分布
3 结果
    3.1 病毒的复苏增殖
    3.2 EID50测定结果
    3.3 A/Swine/Shandong/JT/2007 对犬的致病特性及在犬中的传播性研究结果
        3.3.1 犬感染 A/Swine/Shandong/JT/2007 的临床症状
        3.3.2 试验犬体温变化
        3.3.3 试验犬排毒情况的检测
        3.3.4 试验犬的病理变化
        3.3.5 试验犬的病理组织学变化
        3.3.6 HI 抗体的检测结果
        3.3.7 病毒在各器官中的分布
4 讨论
5 结论
6 参考文献
7 攻读学位期间发表论文情况
8 致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]不同H9N2亚型禽流感病毒分离株致病力研究及HA抗原性变异分析[J]. 陈陆,刘守川,赵军,王川庆,王泽霖.  中国农业科学. 2011(24)
[2]H9N2亚型猪流感病毒对小鼠的致病性及其分子特性研究[J]. 张瑞华,崔红玉,徐明举,利凯,陈化兰,王存连,魏东,李寸欣,徐彤.  中国预防兽医学报. 2011(07)
[3]H9N2禽流感病毒研究进展[J]. 鲁健,田科雄.  实用预防医学. 2011(02)
[4]2009年山东H9N2亚型禽流感M基因的分子进化分析及对哺乳动物致病性的研究[J]. 朱雯迎,许传田,胡北侠,鲁梅,颜世敢,杨少华,李建亮,任海松,崔言顺,张秀美.  中国农学通报. 2011(03)
[5]H1N2亚型猪流感病毒A/Swine/Guangdong/1/06分离鉴定和对猪致病性研究[J]. 许传田,樊树芳,杨焕良,乔传玲,陈艳,辛晓光,陈化兰.  中国预防兽医学报. 2009(01)
[6]广西健康青年H9、H6亚型禽流感病毒血清抗体调查[J]. 陈妍梅,葛万运,黄川,赖振屏,樊晓晖.  中国热带医学. 2008(06)
[7]中国猪源H5N1和H9N2亚型流感病毒的分离鉴定[J]. 李海燕,于康震,杨焕良,辛晓光,陈君彦,赵朴,毕英佐,陈化兰.  中国预防兽医学报. 2004(01)
[8]禽H9N2亚型流感病毒能感染人的发现[J]. 郭元吉,李建国,程小雯,王敏,邹毅,李钏华,蔡访潺,廖华乐,张烨,郭俊峰,黄瑞敏,贝东.  中华实验和临床病毒学杂志. 1999(02)
[9]中国禽流感流行株的分离鉴定[J]. 唐秀英,田国斌,赵传删,周金法,于康震.  中国畜禽传染病. 1998(01)
[10]禽流感研究I．鸡A型禽流感病毒的分离与血清学初步鉴定[J]. 陈伯伦，张泽纪，陈伟斌.  中国兽医杂志. 1994(10)

硕士论文
[1]H9N2亚型禽流感山东分离株的抗原变异及其对小白鼠致病性研究[D]. 朱雯迎.山东农业大学 2011
[2]两株H9N2亚型禽流感病毒的传播特性和致病性的比较及62株的NA基因序列的测定和分析[D]. 王贝贝.扬州大学 2009
[3]山东省H5N1和H9N2亚型猪流感病毒的分子流行病学调查[D]. 许传田.山东农业大学 2004



本文编号：3731641