咖啡酸抗LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎性损伤作用及其分子机制

发布时间：2023-02-05 18:02

　　“金蒲”灌注剂是本实验室研制的一种治疗奶牛乳房炎的纯中药制剂,咖啡酸是该方剂中的一种主要活性成分,本文通过研究咖啡酸抗脂多糖(LPS)诱导的奶牛乳腺上皮细胞(bMEC)的炎性损伤作用及其分子机制,为该方剂的临床应用提供理论依据和技术支持。 本研究通过MTT法检测LPS对bMEC细胞活力的影响,并筛选了LPS诱导bMEC损伤模型条件；利用扫描、透射电镜观察bMEC超微结构变化和流式细胞术检测bMEC的凋亡情况对损伤模型进行了评价；通过深度测序技术分析LPS诱导的bMEC基因表达谱变化,筛选差异基因并对其进行多重分析,预测了LPS诱导的bMEC损伤分子机制；利用Western Blot及RT-PCR技术对相关炎症信号通路中关键蛋白和炎性因子的表达进行了验证；并探讨了咖啡酸抗LPS诱导的bMEC结构损伤的分子机制。相关研究结果如下： 不同浓度的LPS(10、50、100、200μg/mL)作用bMEC不同时间(3、6、12、18h)后,结果显示,LPS能够显著地降低bMEC的细胞活力,这种作用具有明显的时间、剂量依赖性。选择50μg/mL的LPS作用bMEC12h作为损伤模型条件。扫描电镜观...

【文章页数】：104 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
目录
英文缩略词表
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附表清单
第一章 绪论
    1.1 研究背景
    1.2 研究目的和意义
    1.3 研究内容与技术路线
第二章 奶牛乳腺上皮细胞的原代培养
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
    2.3 试验结果
    2.4 讨论
    2.5 小结
第三章 LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞损伤模型的建立
    3.1 引言
    3.2 材料和方法
    3.3 试验结果
    3.4 讨论
    3.5 小结
第四章 咖啡酸抗LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞损伤作用
    4.1 引言
    4.2 材料与方法
    4.3 试验结果
    4.4 讨论
    4.5 小结
第五章 LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞基因表达谱变化分析
    5.1 引言
    5.2 材料与方法
    5.3 试验结果
    5.4 讨论
    5.5 小结
第六章 咖啡酸抗LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞损伤作用的分子机制
    6.1 引言
    6.2 材料与方法
    6.3 试验结果
    6.4 讨论
    6.5 小结
结论和创新点
参考文献
致谢
作者简介



本文编号：3735431