Dhh对ATDC5细胞增殖与分化的影响

发布时间：2023-02-10 20:55

　　以ATDC5细胞为研究对象,分别添加Dhh重组蛋白或转染Dhh干扰片段,应用MTS法、流式细胞术及荧光定量PCR等方法,对Dhh在ATDC5细胞增殖与分化中的作用进行研究。结果显示,Dhh高表达于ATDC5细胞中,添加rDhh可显著增强ATDC5细胞的增殖活性,降低G1期细胞百分比,提高S期细胞数量。通过荧光定量PCR检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1,Ccnd1)、Ccnd2、Ccnd3和Ccne1以及细胞周期蛋白依赖性激酶2(Cyclin-dependent kinase 2,Cdk2)、Cdk4和Cdk6表达的变化。结果显示,添加rDhh可显著提高Ccnd1、Ccnd2、Ccnd3和Ccne1的表达,同时Cdk2、Cdk4和Cdk6的表达也显著增加。添加rDhh可显著提高肥大软骨细胞标志分子Col X和Runx2 mRNA的表达,而转染Dhh siRNA后可降低Col X和Runx2 mRNA的表达。以上结果说明,Dhh对ATDC5细胞的增殖和分化过程起到促进作用。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 ATDC5细胞培养
    1.2 引物设计与合成
    1.3 PCR扩增
    1.4 MTS细胞增殖检测
    1.5 流式细胞术检测
    1.6 siRNA的合成及转染
    1.7 荧光定量PCR
    1.8 统计学分析
2 结果
    2.1 Dhh在ATDC5细胞中的表达
    2.2 Dhh对ATDC5细胞增殖的影响
    2.3 Dhh对ATDC5细胞增殖周期的影响
    2.4 Dhh对ATDC5细胞细胞周期蛋白及细胞周期蛋白激酶表达的影响
    2.5 Dhh对ATDC5细胞分化的影响
3 讨论



本文编号：3739895