朊病毒感染与VCP关系初探

发布时间：2023-02-16 17:32

　　为了探究感染朊病毒后含缬酪肽蛋白(valosin-containing protein,VCP)的变化情况及其对内质网相关蛋白降解(endoplasmic reticulum-associated degradation,ERAD)信号通路的影响,试验采用细胞免疫荧光和实时荧光定量PCR等方法分析朊病毒感染的细胞系中VCP及其基因表达情况;Western-blot方法检测朊病毒感染的细胞、小鼠脑组织中VCP含量变化,白藜芦醇动态清除朊蛋白(prion protein,PrP)的SMB-S15细胞、PrP重组质粒pcDNA3.1(+)-Cyto-PrP瞬时转染的293T细胞、蛋白酶体抑制剂MG-132处理的SMB-S15细胞中VCP的表达情况,以及朊病毒感染的细胞系中ERAD信号通路关键因子的表达水平。结果表明:与对照组相比,在朊病毒感染的细胞中VCP及基因表达水平差异不显著(P>0.05);在终末期小鼠脑组织中VCP表达水平差异不显著(P>0.05);经动态清除PrP、细胞内聚集PrP以及MG-132处理后,VCP表达水平均差异不显著(P>0.05);在朊病毒感染细胞...

【文章页数】：9 页

【文章目录】：
1 材料
    1.1 动物脑组织及细胞系
    1.2 质粒
    1.3 主要试剂
    1.4 主要仪器
2 方法
    2.1 朊病毒感染细胞中VCP分布及表达量检测
    2.2 朊病毒感染细胞中VCP基因表达水平检测
    2.3 感染朊病毒后VCP与ERAD信号通路关键因子检测
        2.3.1 朊病毒感染细胞及脑组织中VCP含量检测
        2.3.2 朊病毒与VCP相互作用分析
        2.3.3 蛋白酶体异常对泛素和VCP含量的影响
        2.3.4 朊病毒感染细胞中ERAD信号通路关键因子含量检测
    2.4 数据的统计分析
3 结果与分析
    3.1 朊病毒感染细胞中VCP分布及表达量检测
    3.2 朊病毒感染细胞中VCP基因表达水平检测
    3.3 感染朊病毒后VCP与ERAD信号通路关键因子检测
        3.3.1 朊病毒感染细胞及脑组织中VCP含量检测
        3.3.2 朊病毒与VCP相互作用分析
        3.3.3 蛋白酶体异常对泛素和VCP含量的影响
        3.3.4 朊病毒感染细胞中ERAD信号通路关键因子含量检测
4 讨论
5 结论



本文编号：3744200