不同抗冻剂对绒山羊精子冷冻过程中HSP70和HSP90表达与分布的影响

发布时间：2023-02-16 17:46

　　本文旨在研究不同抗冻剂(甘油和乙二醇)对绒山羊精子冷冻过程中HSP70和HSP90表达与分布的影响。采集6只年龄相同、体况良好绒山羊的精液,混合后加入到含不同抗冻剂的稀释液中进行冷冻,解冻后检测了不同冷冻保护剂对精子的冷冻保存效果、HSP70和HSP90表达与分布。主要结果如下所示:1.比较了不同浓度的甘油和乙二醇对内蒙古绒山羊精液冷冻的效果。在内蒙古绒山羊精液冷冻稀释液中添加5%甘油,冷冻-解冻后精子活力为61.72%,显著高于3%乙二醇组和5%乙二醇组(分别为49.71、42.6%,P<0.05);5%甘油组的精子顶体完整率、质膜完整率(分别为60.14%、63.09%)显著高于3%乙二醇组(分别为43.26%、41.84%,P<0.05)和 5%乙二醇组(分别为 36.7%、31.96%,P<0.05);5%甘油组的精子DNA完整率为95.7%,与3%乙二醇组(95.37%,P>0.05)和5%乙二醇组(93.08%,P>0.05)之间差异不显著。因此,在稀释液中添加乙二醇作为精子抗冻剂,其冷冻效果并不优于甘油。说明5%甘油作为精子抗冻剂有较好的保护...

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
1 引言
    1.1 精子冷冻保存原理
    1.2 冷冻保存对精子造成的影响
        1.2.1 精液冷冻过程中精子超微结构的变化
        1.2.2 冷冻保存对精子蛋白组和表观遗传修饰的影响
        1.2.3 冷冻保存对精子运动的影响
    1.3 影响冷冻保存效果的因素
        1.3.1 抗冻剂
        1.3.2 抗氧化剂
        1.3.3 抗冻蛋白
    1.4 冷冻过程中与精子活力相关的蛋白质
        1.4.1 热休克蛋白70
        1.4.2 热休克蛋白90
    1.5 研究目的与意义
2 研究一 不同浓度抗冻剂对绒山羊精子冷冻保存效果的影响
    2.1 精液采集
    2.2 材料与方法
        2.2.1 试剂
        2.2.2 仪器
    2.3 稀释液配置
    2.4 精液处理与冷冻
    2.5 不同抗冻剂对冷冻-解冻后绒山羊精子质量评定
        2.5.1 精子活力
        2.5.2 精子顶体完整性
        2.5.3 精子质膜完整性
        2.5.4 精子DNA完整性
    2.6 统计分析
    2.7 结果与分析
        2.7.1 不同抗冻剂对冷冻-解冻后绒山羊精子活力与运动参数的影响
        2.7.2 不同抗冻剂对冷冻-解冻后绒山羊精子顶体、质膜和DNA完整性的影响
    2.8 讨论
    2.9 小结
3 研究二 不同抗冻剂对绒山羊精子冷冻过程中热休克蛋白70表达与分布的影响
    3.1 精液采集
    3.2 材料与方法
        3.2.1 试剂
        3.2.2 仪器
    3.3 稀释液配置
    3.4 精液处理与冷冻
    3.5 精子中热休克蛋白70的检测
    3.6 免疫荧光试验
    3.7 精子ATP含量检测
    3.8 结果
        3.8.1 不同抗冻剂对冷冻-解冻后绒山羊精子中热休克蛋白70表达的影响
        3.8.2 不同抗冻剂对冷冻-解冻后绒山羊精子中热休克蛋白70分布的影响
    3.9 讨论
    3.10 小结
4 研究三 不同抗冻剂对绒山羊精子冷冻过程中热休克蛋白90表达与分布的影响
    4.1 精液采集
    4.2 材料与方法
        4.2.1 试剂
        4.2.2 仪器
    4.3 稀释液配置
    4.4 精液处理与冷冻
    4.5 精子中热休克蛋白90的检测
    4.6 免疫荧光试验
    4.7 结果
        4.7.1 不同抗冻剂对冷冻-解冻后绒山羊精子中热休克蛋白90表达的影响
        4.7.2 不同抗冻剂对冷冻-解冻后绒山羊精子中热休克蛋白90分布的影响
    4.8 讨论
    4.9 小结
5 结论
致谢
参考文献
作者简介



本文编号：3744219